国家自然科学基金(30171091)
- 作品数：6 被引量：9H指数：2
- 相关作者：姜永强郑玉玲马茹邓小红宁保安更多>>
- 相关机构：军事医学科学院陕西师范大学重庆工商大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金北京市自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 葡萄球菌A型肠毒素的高效表达和分离纯化被引量：2
- 2002年
- 根据已知葡萄球菌A型肠毒素 (SEA)的基因序列 ,用PCR从产毒标准株S .aureusFRI 10 0中扩增得到约70 0的SEA基因片段 ,并将该片段克隆至表达载体 pBV2 2 0中 ,实现了高效表达。表达产物以可溶性形式存在 ,表达的毒素用CM SephroseFF离子交换层析进行纯化 ,获得了高纯度的重组SEA ,SDS PAGE显示单一条带。ELISA试验证明所获重组SEA具有与天然SEA相似的免疫学性质。
- 姜永强郑玉玲宁保安马茹王景林高志贤
- 关键词：纯化
- 葡萄球菌中毒性休克毒素的分离纯化及其体外抗肝癌活性分析被引量：3
- 2002年
- 采用固体膜进行TSST 1的产毒培养,然后从金葡菌产毒产物中经CM纤维素离子交换层析、SephadexG 75、SephacrylS 200三步纯化,成功地获得了纯度为95.3%的毒素,SDS PAGE呈现单一条带,与其对应抗血清有免疫学特异反应,不含核酸、糖和其它肠毒素等物质.与同类方法相比,该方法步骤少、快速、简便.对其体外抗肝癌活性进行了分析,首次证明即使TSST 1的浓度为10-8g L仍然对人肝癌细胞有显著抑制作用.
- 姜永强郑玉玲宁保安马茹王忠泽李韩平
- 关键词：分离纯化肝细胞癌
- 从噬菌体表面展示肽库中筛选葡萄球菌B型肠毒素抑制剂被引量：2
- 2005年
- 通过生物淘选,从噬菌体表面展示12肽肽库中筛选能与葡萄球菌B型肠毒素(staphylococcalenterotoxinB ,SEB)结合且能抑制其肠毒活性的特异性短肽.采用Phage ELISA和MTT鉴定所得目的肽的亲和性;根据优势噬菌体阳性克隆序列合成相应多肽.利用竞争ELISA研究合成肽与SEB单克隆抗体竞争结合SEB的情况;通过动物实验考察其抑制SEB的超抗原特性和肠毒活性情况.筛选所得短肽在一定浓度范围内可以抑制SEB对鼠脾淋巴细胞的激活;合成肽与SEB质量比为16 0∶1时,合成肽可较好地抑制SEB对乳猫的肠毒活性,并对SEB引起的小鼠致死具有明显保护作用.结果表明,初步得到了能与SEB特异结合并能抑制SEB超抗原特性和肠毒活性的短肽,为进一步研制SEB高效抑制剂奠定了基础.
- 李韩平郑玉玲邓小红马茹姜永强
- 葡萄球菌肠毒素B突变体(K172E)的制备和抗肿瘤活性分析被引量：1
- 2004年
- 目的 :制备葡萄球菌B型肠毒素 (SEB)突变体 ,观察其抗肿瘤活性变化。方法 :将诱导表达的SEB突变体重组蛋白包涵体进行变性复性和分离纯化 ,并对其肿瘤抑制活性与野生型SEB进行比较。观察突变体蛋白的抑瘤效果。结果 :建立了可行的包涵体复性条件和纯化方法 ,获得的突变体蛋白具有明显的抗肿瘤作用 ,其抑瘤活性比野生型SEB至少高 10倍。结论 :获得的突变体SEB K172E的抗肿瘤效果经体外实验证实优于野生型SEB 。
- 邓小红郑玉玲郁枫宁保安姜永强
- 关键词：葡萄球菌肠毒素B突变体复性抗肿瘤活性
- 重组金葡萄球菌肠毒素B纯化工艺研究被引量：1
- 2007年
- 目的建立无降解、高纯度的重组金葡萄球菌肠毒素B(Staphylococcal enterotoxin B,SEB)的纯化工艺,并检测活性以考察纯化工艺对蛋白的影响。方法用PBV220表达载体诱导表达出重组SEB后,采用(NH4)2SO4粗纯—疏水层析—离子交换色谱的组合纯化法纯化该蛋白。纯化后的样品经Western-blot鉴定及动物致死实验检测活性。结果通过该纯化工艺得到了纯度高(纯度>99%),稳定性高的重组SEB,其活性与天然SEB蛋白无明显差异,保持了高活性。结论本实验建立了无降解、高纯度、高活性的重组SEB的纯化工艺,为进一步研究SEB的临床应用打下了基础。
- 邓小红郑玉玲曾政姜永强
- 关键词：纯化工艺生物活性
- 从噬菌体表面展示环状7肽肽库中筛选葡萄球菌B型肠毒素抑制剂
- 2005年
- 目的:拟通过生物淘选从噬菌体表面展示环状7肽肽库中筛选出与葡萄球菌B型肠毒素(Staphylococcalenter-otoxinB,SEB)结合并能抑制该毒素毒性效应的特异性短肽.方法:采用Phage-ELISA来鉴定所得目的肽的亲和性;利用竞争ELISA研究合成肽与SEBmAb竞争结合SEB的情况;通过动物实验考察其抑制SEB的超抗原特性和肠毒活性情况.结果:筛选所得短肽在一定浓度范围内可以抑制SEB对鼠脾淋巴细胞的激活;合成肽与SEB质量比160∶1下,合成肽可较好地抑制SEB对乳猫的肠毒活性,并对SEB引起的小鼠致死具有明显保护作用.结论:得到了能与SEB特异结合并能抑制SEB超抗原特性和肠毒活性的短肽.
- 李韩平周宏郑玉玲邓小红马茹姜永强
- 关键词：肽库抑制剂
