国家质检总局科技计划项目(2008IK004)
- 作品数:3 被引量:5H指数:2
- 相关作者:唐泰山张常印欧瑜蒋原姜焱更多>>
- 相关机构:江苏出入境检验检疫局中国药科大学更多>>
- 发文基金:国家质检总局科技计划项目更多>>
- 相关领域:医药卫生轻工技术与工程农业科学更多>>
- 呼和浩特地区牛羊布鲁菌流行株种及生物型鉴定被引量:1
- 2011年
- 应用常规细菌学方法,对呼和浩特部分地区疑似布鲁菌病的牛、羊流产胎儿病料进行了布鲁菌分离,共分离到4株布鲁菌。进一步根据细菌形态、培养特性、生化特性以及平板凝集试验等对分离到的细菌进行种型鉴定。结果表明,其中3株为羊种布鲁菌生物3型,1株为牛种布鲁菌生物3型。本研究结果为内蒙古地区布鲁菌病的防控奠定了病原学基础。
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- 牛肉和牛奶中布氏杆菌免疫磁珠富集方法的建立被引量:2
- 2014年
- 为建立牛肉和牛奶样品中布氏杆菌的免疫磁珠富集方法,采用布氏杆菌特异性抗体包被磁珠并优化包被条件,制备成免疫磁珠。对不同稀释梯度的布氏杆菌菌液用免疫磁珠富集,联合布氏杆菌选择性平板培养或荧光PCR,确定免疫磁珠的敏感性。同时,分别用免疫磁珠富集添加有其它细菌的布氏杆菌,富集后于选择性平板培养,统计目标菌落数并挑取可疑目标菌落用荧光PCR鉴定,确定免疫磁珠的特异性。此外,将该方法应用于人工模拟牛肉和牛奶样品中布氏杆菌的富集,进一步确定免疫磁珠的富集效果。结果表明:在1mL布氏杆菌菌液中,2 mg免疫磁珠富集联合选择性平板培养能检测≥2×10~3CFU布氏杆菌,其敏感性高于免疫磁珠联合荧光PCR法。在其它细菌的高浓度背景下,免疫磁珠仍能够特异性地富集到布氏杆菌。此外,用该免疫磁珠富集方法可成功地富集到人工模拟牛肉和牛奶样品中的布氏杆菌。表明建立的免疫磁珠富集方法,可用于实际检测时牛肉和牛奶样品中布氏杆菌的富集,具有良好的应用前景。
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- 关键词:布氏杆菌免疫磁珠敏感性特异性
- 布氏杆菌表面特异性多表位抗原的串联表达与免疫磁珠的初步建立(英文)被引量:2
- 2013年
- 目的为获得布氏杆菌表面多表位抗原的特异性抗体,用于布氏杆菌免疫磁珠的构建。方法从布氏杆菌3个表面蛋白中分析到特异性抗原表位,人工合成其串联基因片段并插入原核表达载体,转化至E.coli BL21(DE3),获得重组质粒pET-32a(+)-CJMEA-A,IPTG诱导后表达出30kDa的重组蛋白,亲和层析纯化后将其进行Western blot分析、间接ELISA鉴定和兔免疫试验,制备的抗血清经亲和层析纯化后,包被成免疫磁珠并用于布氏杆菌富集。结果表达的重组蛋白能与牛抗布氏杆菌血清反应,其抗血清与布氏杆菌发生良好反应,纯化抗体包被的免疫磁珠能特异性吸附布氏杆菌。结论获得的布氏杆菌特异性抗体和免疫磁珠具有良好的应用前景。
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- 关键词:布氏杆菌多表位抗原免疫磁珠