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猪三毛滴虫对4种药物的体外药敏试验被引量：3: 2011年; 目的探讨硝唑尼特、替硝唑、甲硝唑和制霉菌素4种药物对猪三毛滴虫的作用效果,以期为临床用药提供依据。方法在体外培养条件下,用24h敏感性试验确定4种药物对猪三毛滴虫24h的最低致死浓度(MLC);绘制时间-杀虫曲线,分析不同浓度受试药物作用不同时间对猪三毛滴虫的杀灭效果。结果 4种药物均具有不同程度的抑制或杀灭猪三毛滴虫的作用,其中硝唑尼特杀灭猪三毛滴虫的效果较好,24hMLC为12.50mg/L;替硝唑和甲硝唑24hMLC均为25.00mg/L,但时间-杀虫曲线显示替硝唑效果好于甲硝唑;制霉菌素的杀虫效果较差。结论猪三毛滴虫对硝唑尼特和替硝唑敏感。; 李文超李伟志王泽东孟莹李赫宫鹏涛李建华张西臣; 关键词：替硝唑甲硝唑制霉菌素

不同细菌及酵母菌对阴道毛滴虫体外生长的影响: 2014年; 目的研究大肠埃希菌J20、保加利亚乳杆菌、金黄葡萄球菌及AH109酵母菌体外对阴道毛滴虫生长的影响。方法分别将不同浓度(104、105、106和107个/ml)的大肠埃希菌J20、保加利亚乳杆菌、金黄葡萄球菌及AH109酵母菌与阴道毛滴虫进行体外共培养,并对不同培养时间(2、4、6和8 h)的虫体进行计数。结果与空白对照组相比,大肠埃希菌J20及金黄葡萄球菌在低浓度(104个/ml)时即明显影响阴道毛滴虫体外生长(P均<0.01),在6 h时即可见白色死亡虫体沉淀:保加利亚乳杆菌仅在高浓度(106和107个/ml)时对阴道毛滴虫的生长有明显影响(P均<0.01):AH109酵母菌在不同浓度及不同培养时间对阴道毛滴虫的生长均无明显影响(P>0.05)。结论大肠埃希菌J20、金黄葡萄球菌及高浓度(106和107个/ml)保加利亚乳杆菌对阴道毛滴虫生长影响显著,而AH109酵母菌无明显影响,为进一步研究阴道毛滴虫感染后,在体内与阴道菌群的相互作用关系奠定了理论基础。; 丁鹤于艳辉宫鹏涛李建华杨举李赫张国才张西臣; 关键词：阴道毛滴虫保加利亚乳杆菌金黄葡萄球菌

犬贾第鞭毛虫α-12贾第素基因的原核表达及纯化: 2014年; 为了原核表达、纯化犬贾第鞭毛虫α-12贾第素蛋白,试验经RT-PCR获得α-12贾第素基因片段,克隆至原核表达载体p ET-28a(+),构建重组原核表达质粒p ET-28a-α-12,再转化入E.coli Rosetta(DE3)后,用IPTG诱导表达,表达的重组蛋白经SDS-PAGE和Western-blot分析验证,并用Ni琼脂糖凝胶纯化融合的α-12贾第素蛋白。结果表明:重组原核表达质粒p ET-28a-α-12经双酶切和测序证实构建正确;表达的重组蛋白相对分子质量约为40 ku,且主要以包涵体形式存在;表达量约占菌体总蛋白的15.7%;纯化的重组蛋白纯度达90%以上。; 宋百军赵娜赵源宫鹏涛李建华杨举李赫张西臣; 关键词：原核表达包涵体蛋白纯化

双抗夹心ELISA检测犬粪贾第虫抗原方法的建立及应用被引量：4: 2014年; 目的建立简便、特异的检测犬粪贾第虫抗原贾第素α-12的双抗夹心ELISA方法。方法利用辣根过氧化物酶标记抗贾第素α-12单克隆抗体4C9,通过过滤、超声的方法处理犬粪样品。以抗贾第素α-12单克隆抗体3H10为捕获抗体,5%脱脂奶粉作为封闭剂,辣根过氧化物酶标记的抗贾第素α-12单克隆抗体4C9为检测抗体,经底物显色后,用酶标仪测量490nm处的吸光度(A)值。通过棋盘滴定法确定抗体最适包被浓度、最佳封闭剂、待检粪液最佳稀释度及酶标抗体最佳稀释度。应用建立的ELISA方法对122份犬粪样品进行检测。结果建立的双抗夹心ELISA检测标准阳性样品的A490为0.465,标准阴性样品的A490为0.098;优化的最佳检测条件为:抗体包被浓度为0.01mg/ml,封闭剂为1%BSA,粪液稀释度为1∶2,酶标二抗稀释度为1∶400,该试验与犬等孢球虫、犬隐孢子虫、犬蛔虫样品均无交叉反应,批间和批内变异系数较小,重复性好。应用本方法对122份犬粪进行检测,阳性率为36.9%。结论建立的双抗夹心ELISA方法特异性高,重复性好,为贾第虫流行病学调查提供了一种更简便、快速、特异的免疫学检测方法。; 宋百军刘原源宫鹏涛李建华杨举李赫张西臣; 关键词：贾第虫单克隆抗体

猪三毛滴虫长春株的形态观察及其5.8 S rRNA基因分析被引量：5: 2010年; 对从长春地区腹泻仔猪结肠中分离到的1株毛滴虫进行了形态观察,并采用PCR扩增该毛滴虫的5.8SrRNA基因,测序后与国外已报道的三毛滴虫进行核酸同源性分析,并应用DNAStar软件绘制系统发育进化树。形态观察表明分离的毛滴虫为猪三毛滴虫。猪三毛滴虫长春分离株5.8SrRNA序列与国外已报道的三毛滴虫高度同源。系统发育进化树表明该序列与已报道的猪三毛滴虫5.8SrRNA(序列号U85966.1),牛胎儿三毛滴虫5.8SrRNA(序列号U85967.1,AF339736.1,AF466749.1,AF466750.1,AF466751.1)和T.mobiliensis5.8SrRNA(序列号U86612.1)同属于一个亚群,但与另1株猪三毛滴虫5.8SrRNA(序列号AY349190.1)亲缘关系较远。形态观察和5.8SrRNA基因分析表明,从长春地区分离的猪毛滴虫为猪三毛滴虫。; 李建华韩红卫宫鹏涛张西臣

鹿人五毛滴虫巢式PCR检测方法的建立被引量：3: 2015年; 为了建立鹿人五毛滴虫巢式PCR检测方法并进行验证,根据人五毛滴虫18S r RNA基因的特异性片段设计巢式PCR特异性引物,对两轮PCR反应的退火温度和反应体系中Mg2+浓度进行探索和优化,在此基础上,进一步通过灵敏性和特异性的检测。采用建立的巢式PCR检测方法对68份鹿粪便样品进行检测。结果表明,建立的巢式PCR方法,第一轮PCR最适退火温度为53℃,第二轮PCR最适退火温度为53℃;镁离子浓度为2.5 mmol·L-1。对鹿人五毛滴虫的检测精度可达每毫升10个虫体DNA;对犬贾第虫、阴道毛滴虫、弓形虫、柔嫩艾美尔球虫、大肠杆菌、旋毛虫基因组DNA的扩增的结果均为阴性;68份鹿粪便样品鹿人五毛滴虫的检出率为50%。由此可见,建立的巢式PCR检测方法具有较高的灵敏度和特异性,可用于鹿人五毛滴虫感染的临床检测。; 董兵余裕强李显赫李智鹏宫鹏涛李建华张西臣; 关键词：巢式PCR

猪三毛滴虫长春株不同染色方法的比较被引量：1: 2011年; 将从长春地区腹泻仔猪盲肠中分离得到的猪三毛滴虫用1640培养基短期培养后,使用碘染色法、瑞氏染色法、姬氏染色法、姬氏-瑞氏复染法、Weigere铁苏木素染色法和鞭毛染色法染色分别对其染色,观察不同虫体形态结构,并比较了不同染色方法的染色效果。结果显示,姬氏染色、瑞氏-姬氏复染和鞭毛染色法对猪三毛滴虫染色效果较好,可获得虫体形态完整、结构清晰的染色标本。; 李伟志李文超王泽东宫鹏涛李建华张西臣; 关键词：染色

猪毛滴虫病的研究进展被引量：3: 2012年; 毛滴虫是猪体内较为常见的原虫,目前有关猪毛滴虫的报道较少,其兽医公共卫生学意义尚未确定。文章就猪毛滴虫的分类地位、虫体形态、生活史、致病性、流行病学情况、诊断、防治等方面的内容作一综述,为猪毛滴虫和毛滴虫病的研究提供参考。; 李文超李伟志王泽东宫鹏涛李建华张西臣; 关键词：病原形态流行病学

白头翁提取物体外抗猪三毛滴虫作用研究被引量：7: 2012年; 目的探讨白头翁4种提取物对猪三毛滴虫的杀灭效果,为临床用药提供依据。方法利用不同浓度白头翁4种提取物进行体外抗猪三毛滴虫试验,绘制虫体生长曲线,分析猪三毛滴虫对白头翁4种提取物的敏感性。结果白头翁4种提取物在0.312 5～5.0mg/ml浓度时均具有抑制或杀灭猪三毛滴虫的作用,且作用效果随着药物浓度的增加而增强。白头翁4种提取物抑杀猪三毛滴虫效果水浸膏>乙酸乙酯>正丁醇>皂苷。结论白头翁水浸膏和乙酸乙酯成分具有较强的抗猪三毛滴虫作用。; 李赫苏立波王泽东李文超李伟志孟莹时维静宫鹏涛李建华张西臣; 关键词：白头翁提取物体外

蛇床子素体外对蓝氏贾第鞭毛虫超微结构的影响被引量：2: 2014年; 用含1.345 mg/ml(24 h IC50)蛇床子素的改良TYI-S-33培养基培养蓝氏贾第鞭毛虫滋养体,采用扫描和透射电镜观察蛇床子素作用后24 h虫体超微结构的变化。结果显示,经蛇床子素作用后,鞭毛虫滋养体表面凹凸不平,腹吸盘和中体附近表面有明显的病变,主要表现为腹吸盘表面细胞膜破裂,细胞内容物外溢、稀疏,出现板层样结构,空泡化严重,细胞核畸形,边缘锯齿状,核内染色质边集,吸盘微管部分结构崩解。; 李文超顾有方刘畅吴娜罗文武宫鹏涛李赫李建华张西臣; 关键词：蓝氏贾第鞭毛虫蛇床子素体外超微结构

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