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NDRG1互作蛋白的双向电泳检测被引量：1: 2008年; 【目的】为了更好地了解NDRG1的功能,通过双向电泳技术寻找与NDRG1相互作用的蛋白。【方法】先准备高表达肿瘤细胞系HHCC,然后纯化融合蛋白GST-NDRG1,最后孵育HHCC与融合蛋白,并通过双向电泳检测与NDRG1相互作用的蛋白。【结果】经SDS-PAGE和双向电泳后,在pH 7.0、Mr=43 ku处出现了新增点。【结论】在肿瘤细胞HHCC中存在与NDRG1相互作用的蛋白。; 杨谦魏永胜刘永忠刘新平药立波赵惠贤; 关键词：双向凝胶电泳人肝癌细胞系

ndrg2 mRNA在人胎脑组织中表达的时空特点被引量：5: 2008年; 本研究利用反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)检测了ndrg2 mRNA在人胎脑组织中表达的时空特点,为进一步研究其功能提供实验依据。收集正常引产16～28周人胎脑组织标本,进行总RNA提取,应用RT-PCR方法半定量分析ndrg2基因在上述人胎脑组织中的表达水平和变化规律。RT-PCR结果显示:ndrg2 mRNA在正常人胎脑16、20、24和28周的各脑功能区均有表达,但随着发育,其表达水平有差别。在小脑、延髓和海马等部位,ndrg2 mRNA的表达水平在16周胎脑中较高。而在额叶和顶叶等部位,ndrg2 mRNA的表达水平在28周胎脑中达到高峰。以上结果表明,在人胚脑发育过程中ndrg2 mRNA从16～28周均有表达,但在不同脑后其表达存在一定差异,提示ndrg2基因对中枢神经系统的发育和成熟可能有重要影响。; 侯双兴王立峰邓艳春刘新平张健刘娜; 关键词：NDRG2 RT-PCR 胎脑

人NDRG1的融合表达、纯化及抗体制备被引量：4: 2003年; NDRG1是在N myc缺陷的小鼠胚胎组织中发现的一异常高表达的新基因 .在研究高同型半胱氨酸血症引起动脉粥样硬化的机制时 ,在培养的人脐静脉内皮细胞 (HUVEC)中发现了人NDRG1 .为了研究人NDRG1的功能以及结构与功能之间的关系 ,用RT PCR技术 ,从人脑总RNA中克隆NDRG1cDNA ,进行序列测定后 ,将NDRG1插入pPROEXHTb表达载体中 ,转化E .coliDH5α感受态细胞 ,并在LB培养基中获得高效可溶表达 .表达的 6His NDRG1融合蛋白经Ni2 + NTA偶联的琼脂糖珠纯化 ,通过圆二色性分析其二级结构 ,结果为 :α螺旋 :2 3 6 ,β片层 :1 8 6 ,转角 :2 5 7,无规卷曲 :32 0 .用此融合表达的蛋白免疫家兔 ,制备得到高效价的抗体 ,利用固定于硝酸纤维素膜上的NDRG1抗原亲和吸附纯化抗血清提高了抗体的特异性。; 张健刘新平张伟吴国强沈岚王立峰苏金张万会药立波; 关键词：圆二色性免疫血清抗体制备 NDRG1基因

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国家自然科学基金(30171044)