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人血管生成素相关蛋白2单克隆抗体的制备与鉴定: 2006年; 目的：制备人血管生成素相关蛋白2（angiopoietin—related protein2，ARP2）的单克隆抗体。方法：用RT-PCR方法获取人脾脏组织ARP2基因序列，构建pET32a-ARP2，经电穿孔导入大肠杆菌诱导表达，获得可溶蛋白样品和包涵体蛋白样品，回收、纯化蛋白，免疫BALB／c小鼠，采用杂交瘤技术建立产生ARP2抗杂交瘤细胞株，Western印迹鉴定。结果：获得融合蛋白的相对分子质量为570000，与理论计算值相符，纯化后蛋白浓度〉90％，杂交瘤细胞培养上清抗体效价为1：10^4，腹水抗体效价为1：10^7～1：10^8，抗体亚型为IgG2a类，Western印迹示目的蛋白相对分子质量为570000，免疫组化显示该抗体能特异结合人ARP2。结论：制备的抗ARP2单克隆抗体可用于ARP2蛋白鉴定。; 孟舒曹江黄盛东秦永文; 关键词：杂交瘤技术

血小板衍生生长因子在老年小鼠新血管生成中的作用被引量：1: 2004年; 目的?探讨血小板衍生生长因子(PDGF)-AB促进老年小鼠新血管生成的作用及机制。方法:从年轻成年和老年小鼠心脏中分离心脏血管内皮细胞(CMEC),用RT-PCR法分别测定其中PDGF-BB和PDGF-AAmRNA的表达,然后用 ChemoTX培养皿测定PDGF-AB对CMEC迁移的影响。制作小鼠耳部血管生成模型,用激光多普勒测定PDGF-AB处理前后血流量的改变。然后,经心脏穿刺注入生物素化的右旋糖苷以活体标记血管,取鼠耳做免疫组化,于数字式显微镜下获取图像并定量分析小鼠耳部血管密度。结果:PDGF-BB和PDGF-AA在年轻成年小鼠CMEC中均有较丰富的表达,而PDGF-B 在老年小鼠CMEC中无表达。PDGF-AB处理后,培养的老年小鼠CMEC的迁徙能力明显增加(P<0.01)。PDGF-AB局部注射后,老年小鼠耳部小血管密度和侧支循环的数目显著增加(P<0.05)。结论:PDGF-AB可促进老年小鼠新血管和侧支循环的形成,其作用可能是通过PDGF-BB刺激CMEC迁徙来实现的。; 关战军张传森秦永文郑兴; 关键词：血小板衍生生长因子老年小鼠新血管生成血管内皮细胞

血管生成素相关蛋白-2的研究进展被引量：1: 2003年; 孟舒秦永文; 关键词：血管生成素细胞因子糖蛋白

小鼠心脏冠状动脉毛细血管内皮细胞的培养对研究其心功能的意义被引量：6: 2003年; 目的:培养小鼠心脏冠状动脉毛细血管内皮细胞,探讨其对研究心功能具有的意义。方法:采用Jian-MeiLi的方法,从ICR小鼠心室肌获得组织,用胶原酶、胰酶和DNase进行消化,通过离心、种植和培养及经VIII因子、CD34相关抗体进行免疫组化鉴定。结果:培养的细胞呈单层贴壁生长,细胞初为圆形,伸展后为多角形和菱形,五六天呈不规则“铺路石样”征象,CD34相关抗体免疫组化鉴定为阳性。结论:体外培养小鼠心脏冠状动脉毛细血管内皮细胞的方法简单、易行,对其心功能的研究具有重要意义。; 孟舒吴弘关战军秦永文; 关键词：心脏冠状动脉毛细血管血管内皮细胞心功能

血管生成素相关蛋白2对老年大鼠缺血心肌促血管生长作用的初步观察: 目的观察和评价血管生成素相关蛋白2(angiopoietin—related protein2,ARP2)基因移植于老年大鼠急性缺血心肌后的促血管新生作用,探讨其促血管新生机制。方法建立急性心肌缺血老年大鼠模型,随机分为...; 孟舒曹江杨志宏秦永文; 文献传递

体外促进血管内皮细胞分化的实验观察:人血管生成素相关蛋白2全长编码基因的克隆被引量：2: 2005年; 目的:克隆人血管生成素相关蛋白2(angiopoietin-relatedprotein2,ARP2)全长编码基因,使其以体外方式促进血管内皮细胞分化,拟构建PET32a载体。方法:采用反转录多聚酶链反应(RT-PCR)从人脾脏组织中扩增ARP2cDNA,构建PET32a载体,采用EcoRI,HindIII双酶切以及DNA测序进行鉴定。结果:RT-PCR扩增长度为1492bp的基因片段。EcoRI,HindIII双酶切结果显示重组T载体中含有目的基因片段,测序结果显示编码区无基因突变。结论:顺利构建PET32a载体,人ARP2全长cDNA基因克隆成功。ARP2有非常明显的促进血管内皮细胞生长的作用,可能对缺血性心脏病的促血管形成治疗有较大帮助。; 孟舒赵仙先黄盛东秦永文; 关键词：血管内皮生长因子血管生成素基因表达

血管生成素相关蛋白与心血管疾病的相关性研究进展被引量：4: 2003年; 生物治疗已成为当前缺血性心脏病治疗的一个研究热点。血管生成素相关蛋白(angiopoietin-relatedprotein,ARP)家族是最新发现的一族促血管生长因子,自1999年以来,先后发现了该家族的6个成员,其中5个可能与心血管疾病的治疗有关。ARP1能促进体外血管生成,并具有保护内皮细胞功能;ARP2能在体外诱导内皮细胞分化;ARP3可能通过肝脏和脂肪细胞间的激素途径抑制脂蛋白脂肪酶,从而促进脂肪分解,提高极低密度脂蛋白三酰甘油的水平,因此,行ARP3基因突变是治疗冠状动脉粥样硬化性心脏病和高脂血症的一个新方向;另外,它还能与整合素αvβ3连接从而促进血管生成;ARP4是肾细胞癌(Rcc)的标志,测定血浆ARP4水平可以作为肿瘤复发和转移的标志,对于不能行放疗和化疗的肾脏Rcc患者,行ARP4基因突变可能是一个重要的治疗目标;其次,它还能应用于冠状动脉粥样硬化性心脏病和高脂血症的治疗;它亦能保护内皮细胞免于凋亡;对于ARP5的功能及其有关机制,国内外尚在研究之中,但根据其相应的结构来推测,它能促进血管生成。; 孟舒秦永文; 关键词：心血管疾病生物治疗

可调控性鼠血管生成素相关蛋白2的重组腺病毒制备: 2003年; 目的　构建并鉴定血管生成素相关蛋白 2 (ARP2 )重组腺病毒 ,为心肌缺血区促血管生长因子基因转染做准备。方法　将ARP2克隆到PTRE -Shuttle构成重组穿梭质粒 ,再与Adeno -X腺病毒DNA连接构成重组腺病毒DNA ,以Lipo fectamineTM2 0 0 0转染 2 93人胚肾细胞株细胞。结果　从感染ARP2重组腺病毒的 2 93细胞中检测到ARP2的表达 ;重组腺病毒可感染 2 93细胞并在 2 93细胞内进行有效复制 ,从而表明本研究成功地构建了ARP2重组腺病毒 ,为进一步研究其功能提供了条件。; 孟舒吴弘关战军秦永文沈茜; 关键词：腺病毒心肌缺血缺血性心脏病

血管生成素相关蛋白2对大鼠缺血心肌促血管生长作用的初步观察被引量：1: 2007年; 目的观察和评价血管生成素相关蛋白2(angiopoietin-related protein 2,ARP2)基因移植于大鼠急性缺血心肌后的促血管新生作用,探讨其促血管新生机制。方法建立急性心肌缺血大鼠模型,将42只大鼠随机分为3组:缺血区域心肌内注射ARP2重组腺病毒组(Ⅰ组,n=14);注射ARP2空腺病毒组(Ⅱ组,n=14)和注射磷酸缓冲溶液组(Ⅲ组,n=14),注射后28天行心脏彩色超声检查、心肌声学造影,并取注射点心肌切片作常规病理HE染色、VB染色、Ⅷ因子相关抗原免疫学检测。结果Ⅰ组大鼠心脏功能及心肌灌注较Ⅱ、Ⅲ组明显改善,免疫组织化学检测显示Ⅰ组心肌高度表达ARP2蛋白,心肌纤维间毛细血管数目明显增多。结论ARP2能通过促进大鼠缺血心肌血管新生,从而改善心脏功能。; 孟舒曹江杨志宏秦永文; 关键词：冠状动脉疾病血管生成因子心肌缺血

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国家自然科学基金(30171029)

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