国家科技支撑计划(2011BAI15B01-32)
- 作品数：7 被引量：32H指数：4
- 相关作者：杜小燕陈振文衣帅任文陟李益琛更多>>
- 相关机构：首都医科大学吉林大学华北制药集团新药研究开发有限责任公司更多>>
- 发文基金：国家科技支撑计划国家自然科学基金北京市自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学农业科学环境科学与工程更多>>
- 微卫星DNA标记技术对试验用虎皮猫群体遗传结构的分析被引量：4
- 2013年
- 用筛选优化出的24个具有丰富多态性的微卫星位点对华北制药厂的34只虎皮猫基因组DNA进行PCR扩增,对扩增产物进行琼脂糖凝胶电泳和STR扫描,运用popgene3.2软件对试验用虎皮猫群体进行群体遗传结构分析。结果显示,虎皮猫群体平均观测等位基因数为4.083 3,平均有效等位基因数为2.632 3,平均有效杂合度为0.610 8,平均香隆指数为1.078 6。结果表明,微卫星DNA标记技术适于猫群体遗传结构分析;该试验用虎皮猫群体符合封闭群的遗传特性。
- 衣帅谢姗珊刘继峰杜小燕齐飞虎李益琛任文陟刘殿峰陈振文
- 关键词：微卫星DNA多态性PCR
- 近交系基因敲除小鼠微卫星不稳定性分析
- 2013年
- 前期研究中选取了198个与基因突变和疾病相关的小鼠微卫星不稳定性位点,经对转基因和基因突变小鼠研究,发现有41个位点具有不稳定性。为了进一步确认这些位点与基因改变的相关性,本试验应用这41个微卫星位点对29种C57BL/6J基因敲除小鼠进行了检测,并将野生型C57BL/6J和129品系小鼠(ES供体)作为对照。通过PCR扩增,STR扫描和直接测序的方法检测微卫星的不稳定性。在41个微卫星位点中有10个位点在11种基因敲除小鼠中呈现不稳定性(24.4%,10/41)。核心序列为三核苷酸的D3Mit22在9号基因敲除小鼠中显示不稳定性,其余40个位点的核心序列均为二核苷酸,有9个位点呈现不稳定性(22.5%,9/40);另一方面,29种基因敲除小鼠有11种出现了不稳定性(37.9%,11/29);(TG)n为核心序列的二核苷酸表现不稳定性的比率最大(50%,2/4),依次为(GT)n(27.27%,3/11)和(AG)n(25%,1/4),重复序列(CA)n、(CT)n分别为23.08%(3/13)和20%(1/5)。克隆测序的结果显示,6种基因敲除小鼠呈现核心序列片段的插入,1种基因敲除小鼠则为缺失。有2个位点(D13Mit3和D14Mit102)在2种基因敲除小鼠中出现不稳定性,9号基因敲除小鼠在2个位点(D3Mit22和D13Mit3)呈现不稳定性。结果显示基因敲除小鼠出现了微卫星不稳定性。
- 王思珍曹颖霞左宝芬杜小燕陈振文
- 关键词：微卫星不稳定性基因敲除近交系小鼠
- 长爪沙鼠资源开发利用进展被引量：11
- 2014年
- 长爪沙鼠是源于我国的"多功能"实验动物资源,在某些研究领域发挥重要作用。随着研究深入,越来越多的长爪沙鼠生物学特性将被发现,这些将使长爪沙鼠资源利用更加多元化。本文对长爪沙鼠的开发研究历程及在分类学、寄生虫学、脑缺血、脂质代谢、神经性疾病和肿瘤学等研究中的应用作简要概述。
- 李长龙杜小燕陈振文
- 关键词：长爪沙鼠资源开发和利用
- 兽医在实验动物工作中的主要作用被引量：8
- 2012年
- 全面概述了兽医在实验动物工作中的作用,重点阐述了兽医在实验动物设施建设、运行与管理中的作用,包括兽医在实验动物设施设计、设施运行管理及国内、国际的实验动物认证中发挥的重要作用。同时阐明了兽医工作在实验动物健康保障和护理、运输管理、动物实验的设计与实施、实验动物福利监督与管理、生物安全的评价与管理中的作用以及兽医对实验动物各种药品和废弃物管理中的作用。
- 杜小燕王超陈振文
- 关键词：兽医实验动物动物实验动物福利运输管理生物安全
- 近交系基因敲除小鼠微卫星不稳定性分析
- 目的 前期研究从文献中选取了198个与基因突变和疾病相关的小鼠微卫星不稳定性位点,经对转基因和基因突变小鼠研究,发现有41个位点具有不稳定性.为了进一步确认这些位点与基因改变的相关性,本实验应用这41个微卫星位点对29种...
- 左宝芬杜小燕陈振文
- 关键词：微卫星不稳定性基因敲除近交系小鼠
- 慢病毒载体转染犬睾丸生殖细胞被引量：1
- 2013年
- 目的观察慢病毒载体(Lentiviral vector,LV)对犬生殖细胞的转染,为基于LV的精子介导法制备转基因动物提供依据。方法采用睾丸打点注射法,向比格犬两侧睾丸分别注入滴度为5×108、1×108、2×107TU/mL的慢病毒液组成3个剂量组,每点注射量为每只犬0.2 mL。于注射后第2周开始采集精液,通过精液DNA的PCR检测和精子荧光镜检评估绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)基因的整合及表达。结果 1)在高剂量组,整合并表达GFP基因的精子于第4周首现并持续至第17周;在中、低剂量组于第5周首现,分别持续到第14周、12周。2)GFP表达的高峰期在注射后第7周～10周。3)GFP表达于整个精子,以顶体后区和精子尾颈部表达最强。4)注射后第2周～6周,中剂量组犬采精困难,高低剂量组犬精子畸形率有上升的趋势。5)在GFP表达的高峰期,绿色荧光精子的百分率在高、中、低剂量组分别为43.33%、35.53%和4.55%,具有明显的差异。结论基于LV的精子介导转基因法(Sperm-mediated gene transfer,SMGT)可成功获得转基因犬精子,转基因阳性率、表达的强度与持续时间与慢病毒滴度相关。
- 王洪军马啸赵明杜小燕李益琛陈振文
- 关键词：比格犬慢病毒载体生殖细胞
- 转基因小鼠和基因突变小鼠微卫星不稳定性分析被引量：1
- 2013年
- 目的探讨微卫星在转基因和基因突变小鼠中的变化,为基因修饰和遗传突变动物的遗传检测和表型分析提供理论依据和技术手段。方法根据文献报道,从GenBank中选取198个等位基因数量多、富含多态性的微卫星位点,以野生型动物为对照,对6种近交系遗传背景的转基因小鼠和5种自然基因突变的近交系小鼠进行微卫星多态性检测,选用1.5%琼脂糖凝胶电泳和STR扫描技术,比较分析微卫星不稳定性。结果共有40个微卫星位点在转基因和基因突变小鼠中表现出多态性。在基因突变小鼠中,微卫星不稳定性有55.6%(10/18)是由纯合变为杂合(Ⅰ型),有3个位点(16.6%,3/18)是纯合突变(Ⅱ型),有5个位点同时存在2种类型的突变。但是在转基因动物中,大多数的微卫星多态性为Ⅰ型突变(87.5%,28/32),只有2个位点(6.2%,2/32)是Ⅱ型突变。另外有2个位点同时存在2种类型的突变。结论基因修饰或基因突变可引起小鼠相关微卫星发生不稳定性,而且某些微卫星位点对基因改变敏感性较高。
- 王迎崔静陈振文路静霍学云李振坤杜小燕
- 关键词：微卫星DNA转基因小鼠微卫星不稳定性
- C57BL/6J小鼠亚慢性镉中毒模型的建立被引量：7
- 2013年
- 为了建立小鼠亚慢性镉中毒模型,本研究将20只C57BL/6J雄性小鼠随机分为4个剂量组和溶剂对照组,每组隔天分别腹腔注射含0.25、0.5、1和2mg/kg剂量的氯化镉溶液和等量去离子水(溶剂),共染毒4周,观察不同剂量的镉离子对雄性小鼠肝脏、肾脏、睾丸的损伤情况。结果各处理组小鼠体质量增长要比对照组慢,脏器系数与对照组相比也有显著差异,处理组小鼠肝脏、肾脏、睾丸中镉含量显著高于对照组。病理组织切片结果表明,各处理组中小鼠的肝脏、肾脏、睾丸组织均出现不同程度的损伤。氯化镉可以显著地抑制小鼠体质量增长,并对小鼠的脏器系数产生影响,腹腔注射后在肝脏、肾脏、睾丸组织中产生蓄积,并对其造成一定损伤。隔天腹腔注射2mg/kg剂量的氯化镉,4周可建立较理想的小鼠镉中毒模型。
- 蓝田丰艾纯旭衣帅高巍袁宝陈建胡进平杜小燕任文陟陈振文
- 关键词：镉中毒动物模型C57BL
