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国家自然科学基金(30400163)

作品数:19 被引量:93H指数:5
相关作者:张银刚王金堂郭雄刘淼张宏更多>>
相关机构:西安交通大学医学院第一附属医院西安交通大学第四军医大学唐都医院更多>>
发文基金:国家自然科学基金陕西省科学技术研究发展计划项目更多>>
相关领域:医药卫生生物学农业科学更多>>

文献类型

  • 16篇中文期刊文章

领域

  • 13篇医药卫生
  • 2篇生物学
  • 1篇农业科学

主题

  • 10篇椎间盘
  • 7篇退变
  • 7篇基因
  • 5篇椎间盘退变
  • 3篇蛋白
  • 3篇细胞
  • 3篇干细胞
  • 2篇凋亡
  • 2篇形态发生蛋白
  • 2篇增龄
  • 2篇增龄过程
  • 2篇生长分化
  • 2篇生长分化因子...
  • 2篇转染
  • 2篇细胞凋亡
  • 2篇基因转染
  • 2篇间质干细胞
  • 2篇骨髓
  • 2篇骨髓间质
  • 2篇骨髓间质干细...

机构

  • 10篇西安交通大学...
  • 7篇西安交通大学
  • 3篇第四军医大学...
  • 1篇第四军医大学
  • 1篇陕西省人民医...
  • 1篇西安交通大学...

作者

  • 13篇张银刚
  • 4篇刘淼
  • 4篇郭雄
  • 4篇王金堂
  • 2篇王世捷
  • 2篇许鹏
  • 2篇任峰玲
  • 2篇任晓勇
  • 2篇李天清
  • 2篇贾光辉
  • 2篇王民
  • 2篇陈文弦
  • 2篇张小卫
  • 2篇李萌
  • 2篇孙正明
  • 2篇张宏
  • 1篇刘广宇
  • 1篇邹爱民
  • 1篇杨康平
  • 1篇王栋琪

传媒

  • 5篇西安交通大学...
  • 2篇南方医科大学...
  • 2篇中国组织工程...
  • 1篇陕西医学杂志
  • 1篇中国修复重建...
  • 1篇中华风湿病学...
  • 1篇Journa...
  • 1篇中南大学学报...
  • 1篇Journa...
  • 1篇Journa...

年份

  • 1篇2011
  • 3篇2009
  • 4篇2008
  • 4篇2007
  • 2篇2006
  • 2篇2005
19 条 记 录,以下是 1-10
排序方式:
An animal model to create intervertebral disc degeneration characterized by radiography and molecular biology
2008年
Objectives:To develop a rabbit model of intervertebral disc degeneration that more exactly simulates the pathological changes of human intervertebral disc degeneration.Methods:Twelve New Zealand white rabbits were utilized to establish three different disc injury models according to the following protocol;group A:anulus punctures were done with a 18-gauge needle at L2-L3 and L5-L6; Group B:intradiscal injection of interleukin-1 IL-1βwith a 23-gauge needle at L3-L4;and Group C:intradiscal injection of phosphate buffer saline(PBS)with a 23-gauge needle at L4-L5.The L1-L2 level was used as a control.Rabbits were killed after 24 weeks.The intervertebral disc height was measured by lateral plain radiographs.After the radiographic measurements were obtained,the interver- tebral discs were removed and analyzed for DNA,sulfated glycosaminoglycan(s-GAG)and water contents of nucleus pulposus.Results: The intervertebral disc height,s-GAG,and water contents in anulus needle punctures were significantly decreased in Group A,but the DNA content in the nucleus pulposus was significantly increased when compared to the control.The significant decrease of disc height and water contents were demonstrated,only the s-GAG and DNA contents did not show a significant difference in Group B when compared to the control.The significant decrease of disc height,s-GAG,water,and DNA contents did not show in Group C when compared to the control.Conclusion:The 18-gauge puncture models produced the most consistent disc degeneration in the rabbit lumbar spine.
Zhengming Sun Miao Liu Yingang Zhang
关键词:椎间盘退化分子生物学
大鼠增龄过程中椎间盘退变指标的研究被引量:10
2008年
目的研究大鼠增龄过程中椎间盘退变的指标。方法同批SD大鼠21只,分别喂养6月(9只)和22月(12只)建立青年大鼠组和老龄大鼠组模型,计算椎间盘退变Miyamoto分级值,体视法分析椎体软骨终板血管芽数量、面积、钙化层和非钙化层厚度,单克隆抗体免疫组化染色测定软骨Ⅱ型和X型胶原的表达。结果老龄组大鼠椎体软骨终板血管芽数量、血管芽相对面积、非钙化层/钙化层比值、钙化层和髓核Ⅱ型胶原含量均低于青年组(P<0.05);老龄组非钙化层X型胶原含量高于青年组(P=0.003);而Miyamoto分级老年组和青年组无统计学差异(P=1.130)。结论终板血管芽相对面积、非钙化层/钙化层比值、Ⅱ型胶原和X型胶原表型表达是评估增龄性椎间盘退变的灵敏指标,而Miyamoto分级不是评估增龄性椎间盘变化的灵敏指标。
张银刚刘江涛王金堂郭雄
关键词:椎间盘退变增龄胶原
髓核内注射骨髓间质干细胞对椎间盘基质的影响被引量:3
2007年
目的研究髓核内注射骨髓间质干细胞对椎间盘基质的影响。方法32只新西兰大白兔,L2-3、L3-4、L4-5、L5-6被随机分为正常对照组、生理盐水对照组、细胞移植组Ⅰ、细胞移植组Ⅱ(BMP2转基因组)。髓核内注射后1、3、6月时间点,用Ⅰ、Ⅱ型胶原单克隆抗体免疫组化染色分析胶原表型的改变,用实时荧光定量PCR分析Ⅰ、Ⅱ型胶原及蛋白多糖的mRNA表达,采用重复测量方差分析进行统计学分析。结果术后1、3、6月时间点,细胞移植组髓核有较多的细胞,蛋白多糖染色显示细胞移植组髓核兰染增加,免疫组化显示Ⅰ型胶原实验各组未见明显差异,Ⅱ型胶原细胞移植组有较强的红染颗粒沉积。实时荧光定量RT-PCR分析显示,在细胞移植组,蛋白多糖和Ⅱ型胶原的mRNA增加,而Ⅰ型胶原mRNA则无改变。与细胞移植组Ⅰ比较,细胞移植组Ⅱ蛋白多糖和Ⅱ型胶原mRNA增加。结论骨髓间质干细胞移植能够提高髓核中蛋白多糖和Ⅱ型胶原的含量,复合BMP2转基因有"分子增强效应",提示基于骨髓间质干细胞移植策略是治疗椎间盘退变潜在的有效方法。
张银刚郭雄李天清王世捷李曙明许鹏任峰玲
关键词:骨髓间质干细胞椎间盘基因治疗
BMP_2-EGFP融合蛋白的构建及其生物活性被引量:3
2005年
目的:构建BMP2/pLEGFP重组逆转录病毒表达载体,并检测其表达的融合蛋白的生物活性。方法: 用基因重组技术构建BMP2/pLEGFP重组逆转录病毒表达载体,并通过酶切和PCR鉴定。脂质体法转染COS 7细 胞,用荧光显微镜检测和Westernblotting分析其在COS 7细胞表达,细胞活性实验和动物体内异位成骨实验进一 步检测融合蛋白的生物活性。结果:经酶切和PCR鉴定重组质粒BMP2/pLEGFP构建成功。转染COS 7细胞后, 荧光显微镜和Westernblotting检测均显示融合蛋白在细胞中表达;分泌的产物经细胞活性实验和动物体内异位成 骨实验证实具有BMP2和EGFP的双重蛋白活性。结论:基因重组技术成功构建BMP2/pLEGFP重组体,重组体表 达的融合蛋白具有GFP和BMP2的双重活性。
张银刚郭雄师常宏邹爱民许鹏
关键词:BMP2基因转染真核表达生物活性
生长分化因子5的研究现状和应用前景被引量:1
2005年
任晓勇张银刚陈文弦
关键词:生长分化因子骨形态发生蛋白CDNA文库基因定位成熟肽
hGDF5基因转染对骨髓间充质干细胞增殖和分化的影响被引量:5
2006年
目的探讨人生长分化因子5(hGDF5)基因转染对骨髓间充质干细胞(BMSCs)增殖及分化的影响。方法采用脂质体介导方法将hGDF5基因转入体外培养的兔BMSCs,用逆转录多聚酶链反应(RT-PCR)、间接免疫荧光检测hGDF5 mRNA和蛋白质的表达,并通过检测碱性磷酸酶活性、细胞增殖能力(MTT法)、Ⅱ型胶原(ColⅡ)以及蛋白多糖(PG)的表达,分析转染hGDF5对BMSCs增殖、分化的影响。结果hGDF5 mRNA及蛋白在基因转染细胞内得到正确表达;hGDF5基因转染组和对照组相比,ColⅡ、PG表达水平显著增高(P<0.01,P<0.01),而碱性磷酸酶活性和细胞增殖能力无明显变化(P>0.05)。结论外源基因转染可以使BMSCs表达有生物活性的hGDF5。高表达的hGDF5可以促进BMSCs向软骨表型分化,但对细胞增殖和碱性磷酸酶活性无明显影响。
任晓勇张银刚陈文弦
关键词:生长分化因子5骨髓间充质干细胞基因转染分化
Features of intervertebral disc degeneration in rat's aging process被引量:11
2009年
Objective:The age-related change is important part of degenerative disc disease. However,no appropriate animal model or objective evaluation index is available. This study aimed to investigate the features of intervertebral disc degeneration in aging process of rats. Methods:22-month-old Sprague-Dawley(SD) rats were used as spontaneously occurring intervertebral disc degeneration models and 6-month-old rats as young controls. Expression of collagen types II and X was measured by immunohistochemistry. Degenerations of intervertebral discs were scored according to Miyamoto's method. Numbers and areas of afferent vascular buds were measured. The thicknesses of non-calcified and calcified layers were measured and statistically analyzed. Results:There were less collagen type II expression and more collagen type X expression in the calcified layer of the cartilage endplates and nucleus pulposus in the rats of the aged group than in the young control. There were fewer and smaller afferent vascular buds in the rats of the aged group than in the young control group. The ratio of the non-calcified to the calcified layers in the rats of the aged group significantly decreased,compared with that of the young control group(P<0.01) . Conclusion:Rats can spontaneously establish intervertebral disc age-related degeneration. The expression of collagen types II and X,numbers and areas of afferent vascular buds,the ratio of the non-calcified to the calcified layers,and water and glycosaminoglycan contents in the nucleus pulposus are sensitive indexes of intervertebral disc degeneration.
Yin-gang ZHANGZheng-ming SUNJiang-tao LIUShi-jie WANGFeng-ling RENXiong GUO
关键词:衰老过程椎间盘退变
大鼠增龄过程中骨质疏松与椎间盘退变的相关性分析被引量:2
2007年
目的研究大鼠增龄过程中骨质疏松症和椎间盘退变的相关性。方法50只健康纯种SD大鼠,喂养22个月,建立老龄大鼠模型,进行股骨、胫骨、腰椎等组织学观察,并评价椎间盘退变的相关指标(椎间盘软骨Ⅱ型和Ⅹ型胶原表达、软骨终板血管芽相对面积、软骨终板钙化层/非钙化层厚度)与骨质疏松的相关指标(骨皮质厚度指数、骨小梁相对面积、骨密度、骨最大应力和应变)的相关性。结果骨质疏松相关指标骨皮质厚度指数、骨小梁相对面积、股骨密度、椎体骨密度与椎间盘退变指标终板血管芽相对面积、非钙化/钙化层比值、Ⅱ型胶原定量之间存在中度到强度的负相关,而与Ⅹ型胶原表达存在中度到强度的正相关,其中椎体骨密度与软骨终板的Ⅹ型胶原相关性最强。骨生物力学指标最大变形和最大负荷与椎间盘退变的各个指标无相关性。结论骨质疏松和椎间盘退变呈负相关,这种相关并不能完全归因于环境因素;而骨生物力学最大变形、最大负荷和椎间盘退变无相关性。
张银刚李天清王金堂郭雄
关键词:骨质疏松症椎间盘老龄大鼠
人退变腰椎间盘中细胞凋亡与Bax及半胱胺酸蛋白酶蛋白3基因的表达被引量:12
2008年
目的检测人腰椎间盘组织中的细胞密度、细胞凋亡率以及Bax和半胱氨酸蛋白酶蛋白3(Caspase-3)的表达,为深入了解人腰椎间盘退变的机制提供实验依据,并为将来通过生物学方法延缓腰椎间盘退变提供新的思路。方法实验组30个椎间盘标本(L2~S1)来自27例行后路腰椎间盘切除椎间融合手术自愿捐赠的患者,男18例,女9例;年龄30~72岁,平均51.09岁。所有病变节段均经MRI证实,患者术前均未接受椎间盘造影、胶原酶髓核溶解或椎间盘激光汽化术。对照组20个标本(L2~S1)来自5例青年男性意外死亡者新鲜尸检腰椎间盘;年龄24~37岁,平均30.83岁。采用HE染色观察凋亡软骨细胞、凋亡小体和细胞密度,TUNEL染色法检测人腰椎间盘中的凋亡细胞率,用SP免疫组织化学法检测Bax及Caspase-3表达,图像分析Bax及Caspase-3的平均灰度值。结果HE染色示对照组、实验组软骨终板和髓核内的平均细胞密度分别为(17.16±1.22)、(12.41±0.95)个/HP,二者差异有统计学意义(P<0.01)。TUNEL染色观察示对照组的软骨终板与髓核内的平均凋亡细胞率为6.97%±0.92%,低于实验组的12.59%±0.95%(P<0.01)。SP免疫组织化学染色示对照组髓核内Bax、Caspase-3染色阳性细胞率分别为11.02%±1.18%和9.01%±1.00%,均低于实验组的19.29%±1.18%和15.07%±0.97%,差异均有统计学意义(P<0.01)。对照组腰椎间盘髓核内Bax、Caspase-3的平均灰度值分别为187.33±7.88和185.68±3.26,实验组分别为124.98±6.69和160.13±4.37,两组间比较差异有统计学意义(P<0.01)。将全部腰椎间盘标本进行Pearson相关分析,对照组和实验组腰椎间盘凋亡细胞率与细胞密度间成负相关,相关系数r分别为-0.88和-0.93(P<0.01);两组髓核内Bax、Caspase-3阳性细胞率与凋亡细胞率之间成正相关,相关系数r分别为0.83和0.91(P<0.01)。结论细胞密度下降参与了人腰椎间盘的退变过程,Bax和Caspase-3的表达上调在人腰椎�
王栋琪刘淼宋焕瑾王民杨康平张银刚
关键词:腰椎间盘退变细胞凋亡BAX
大骨节病和骨性关节炎患者滑膜白介素-1β和肿瘤坏死因子-α的比较被引量:29
2009年
目的比较大骨节病(KBD)和骨性关节炎(OA)关节滑膜和滑液中白介素-1β(IL-1β)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的表达,探讨两种病的发病机制。方法分别收集大骨节病和骨性关节炎患者关节滑膜和滑液20例和18例,以单纯半月板损伤患者的关节滑膜和滑液19例为对照;采用免疫组织化学染色法,观察大骨节病、骨性关节和半月板患者关节滑膜IL-1β和TNF-α阳性表达强度;采用ELISA法检测三种滑液标本IL-1β和TNF-α的水平。结果TNF-α在KBD和OA滑膜组织中的表达与对照组相比有显著性差异(P<0.05);IL-1β在KBD和OA滑膜组织中的表达与对照组相比也有显著性差异(P<0.01);IL-1β和TNF-α在KBD滑膜组织中的表达与OA相比无显著性差异(P>0.05)。TNF-α和IL-1β在KBD和OA滑液中的水平与对照组相比均有显著性差异(P<0.05);IL-1β和TNF-α在KBD滑液中的水平与OA相比均无显著性差异(P>0.05)。结论IL-1β和TNF-α可能在KBD和OA发生发展中扮演着重要的角色。
孙正明凌鸣刘淼张银刚
关键词:大骨节病滑膜滑液白介素-1Β肿瘤坏死因子-Α
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