国家自然科学基金(31172335) 作品数:8 被引量:40 H指数:4 相关作者: 刘永生 刘永安 李学瑞 马丽娜 王立燕 更多>> 相关机构: 中国农业科学院兰州兽医研究所 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 更多>> 相关领域: 农业科学 医药卫生 更多>>
一株松鼠猴源粪肠球菌的分离鉴定及耐药性分析 被引量:4 2017年 为了确定引起松鼠猴死亡的致病菌株及其耐药性情况,试验采用病原菌分离、革兰氏染色、生化试验、16S rRNA PCR扩增鉴定、致病性试验、药敏试验、毒力基因和耐药基因扩增试验等方法对致病菌进行了研究。结果表明:该菌革兰氏染色阳性,马尿酸盐、V-P、6.5%Na Cl等生化反应呈阳性,阿拉伯糖、蔗糖等生化反应呈阴性;16S rRNA基因BLAST比对,与粪肠球菌相似性为100%;致病性试验显示,该菌株致病性不是很强;该菌株对苯唑西林、红霉素、复方新诺明、四环素等耐药,对青霉素G、呋喃妥因敏感,对万古霉素、米诺环素中等耐药;毒力基因hyl、asal、gelE、cylA、esp、acm和耐药基因TEM、ant(6)-I、ermB、aac(6')-aph(2″)、TetM扩增试验均为阳性。说明该菌株为粪肠球菌(Enterococcus faecalis),具有较强耐药性,但致病性不是很强,可能与毒力基因和耐药基因的高阳性率有关。 刘永安 储岳峰 马丽娜 周建华 李学瑞 刘永生关键词:松鼠猴 毒力因子 耐药基因 细菌规律成簇间隔短回文序列相关机制的研究进展 被引量:1 2015年 近年来,在许多细菌和古细菌中发现一种新的基因干扰途径一规律成簇间隔短回文序列(Clusteredregularlyinterspacedshortpalindromicrepeats,CRISPR),该序列是许多细菌和古细菌用来保护自己免受噬菌体、接合质粒和其他转座因子(Mobilegeneticelements,MGEs)干扰的一段DNA序列,其转录的RNA序列与相关蛋白结合在一起可使入侵的特异性核酸发生降解。目前CRISPR已被开发为一种基因编辑工具, 王立燕 刘永生关键词:回文序列 古细菌 成簇 RNA序列 转座因子 Toll样受体及其在雌性家畜生殖中的作用 被引量:1 2012年 概述了Toll样受体(TLRs)家族的分子结构、识别的配体以及在免疫应答中起的作用。重点介绍了不同家畜中存在的TLRs及其在雌性家畜排卵、受精、妊娠和分娩各生殖过程中的作用,旨在为研制治疗雌性家畜TLR相关疾病的药物提供参考。 高宗良 谷元兴 赵峰 刘永生关键词:TOLL样受体 生殖过程 一株羊源致病性屎肠球菌的分离鉴定及耐药性分析 被引量:9 2017年 试验从甘肃肃南县某羊场死亡羊中分离出疑似某球菌菌株XCP,为进一步确定该致病菌株及其耐药性情况,进行了病原菌分离、革兰氏染色、生化试验、16SrRNA PCR扩增鉴定、小鼠致病力试验、药敏试验、毒力基因和耐药基因扩增试验研究。结果发现,该菌革兰氏染色阳性,高盐、蜜二糖、蔗糖等生化反应阳性,VP、马尿酸盐、阿拉伯糖等生化反应阴性;16SrRNA基因PCR扩增后,进行BLAST比对,结果与GenBank中的屎肠球菌16SrRNA基因序列同源性为100%;小鼠致病力试验发现,该菌株具有很强的致病性;该菌株对β-内酰胺类抗生素苯唑西林、青霉素G,喹诺酮类抗生素诺氟沙星、环丙沙星、左氟沙星,以及四环素等高度耐药,对红霉素、万古霉素、克林霉素等抗生素敏感;毒力基因Asal、cylA、acm和耐药基因TetM、ant(6)-Ⅰ、aac(6′)-aph(2′′)、ermB扩增均为阳性。结果表明,该菌为屎肠球菌(Enterococcus faecium),具有较强的致病性和耐药性,可能与毒力基因和耐药基因的高阳性率有关。 刘永安 李学瑞 周建华 马丽娜 刘永生关键词:屎肠球菌 耐药性 毒力因子 耐药基因 牛分枝杆菌耐药性检测研究进展 牛结核病(Bovine tubereulosis)作为一种人畜共患传染病,表现为慢性消耗性症状,可对养牛业以及公共卫生安全造成极其严重的危害。牛结核病在世界范围内传播流行,主要由牛分枝杆菌(Mycobacterium b... 刘永安 李学瑞 刘永生关键词:牛分枝杆菌 耐药性检测 分子生物学 结核分枝杆菌耐药机制与检测技术研究进展 被引量:8 2017年 近年来耐药结核分枝杆菌的不断出现给结核病的治疗带来前所未有的压力。研究发现,不但牛型分枝杆菌可感染人,人型结核分枝杆菌也可感染牛,这也给养牛业的发展带来了威胁与挑战。如何建立快速、简便、敏感性强、特异性好、价格低廉的耐药性检测方法是控制该病蔓延的关键。作者阐述了常用药物异烟肼、利福平、链霉素、乙胺丁醇、吡嗪酰胺等的作用机制及传统分枝杆菌耐药性检测方法(荧光素酶系统、显微镜观察药敏检测技术(MODS)、比例法、Bactec MGIT 960系统)和以分子生物学为基础的分枝杆菌耐药性检测方法(单链探针反向杂交试验(LiPA)、Gene Xpert全自动检测系统、PCR-单链构象多态性分析(PCR-SSCP)、PCR-限制性片段长度多态性分析(PCR-RFLP)、DNA测序、基因芯片技术)的研究进展,以期为进一步的研究与应用提供参考。 刘永安 李学瑞 刘永生关键词:结核分枝杆菌 耐药性检测 耐药机制 牛分枝杆菌耐药性检测研究进展 牛结核病(Bovine tubereulosis)作为一种人畜共患传染病,表现为慢性消耗性症状,可对养牛业以及公共卫生安全造成极其严重的危害。牛结核病在世界范围内传播流行,主要由牛分枝杆菌(Mycobacterium b... 刘永安 李学瑞 刘永生儿茶酸对副猪嗜血杆菌生物被膜形成的影响 被引量:1 2016年 为了解决副猪嗜血杆菌的耐药性和慢性感染问题,试验采用儿茶酸抑制密度感应机制,研究影响副猪嗜血杆菌生物被膜形成的方法,结果表明:儿茶酸使副猪嗜血杆菌生物被膜的形成能力降低了25.4%。说明儿茶酸确实能够降低副猪嗜血杆菌生物被膜的形成能力。 王立燕 马丽娜 刘永生关键词:副猪嗜血杆菌 细菌生物被膜 密度感应系统 儿茶酸 细菌群体感应种类及其信号分子的研究进展 被引量:16 2015年 细菌的群体感应(Quorum sensing,QS)效应为存在于细菌中,通过响应细菌细胞的密度变化而调节基因表达的机制。随着细菌细胞数目的增加,细菌通过QS的作用产生、释放类激素分子-自诱导物(Autoinducers,AI)并积聚在细菌细胞的外环境中,细菌就是通过这种被称作AI的信号分子的浓度变化来进行信息交流[1]。AI是随着细菌细胞密度的增大而增大的,当AI积聚达到一定的阈值时,又反过来调控细菌内的一些基因的表达,导致一个信号转导级联反应开始,并最终使机体行为发生改变[2]。 王立燕 刘永生关键词:细菌细胞 信号分子 基因表达 细胞数目 屎肠球菌荚膜多糖的提取纯化及其多糖含量的测定 2017年 为提取纯化屎肠球菌(E.faecium)荚膜多糖(CPS)并测定其多糖含量,试验采用高压法破碎菌体,加入核糖核酸酶(25μg/mL)、脱氧核糖核酸酶(0.5mg/mL)、溶菌酶(0.25mg/mL)及蛋白酶K(1.25mg/mL)等去除核酸和蛋白质,得到荚膜多糖粗提物,经过30ku和100ku超滤离心管超滤浓缩和DEAE Sepharose Fast Flow层析柱层析后,得到纯化的屎肠球菌荚膜多糖,再利用苯酚-硫酸法测定其含量。结果表明,成功从屎肠球菌中提取纯化出荚膜多糖,其含量为75.21%,初步确定了屎肠球菌荚膜多糖的提取纯化方法,为今后相关疫苗的研制奠定了基础。 刘永安 李学瑞 周建华 马丽娜 刘永生关键词:屎肠球菌 荚膜多糖 提取纯化 苯酚-硫酸法