上海市卫生局科技发展基金(00418)
- 作品数：3 被引量：3H指数：1
- 相关作者：罗敏贾秀娟谢晓雁谢超周文中更多>>
- 相关机构：上海交通大学医学院附属瑞金医院更多>>
- 发文基金：上海市卫生局科技发展基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 人血清IA-2抗体检测方法的建立及应用
- 2006年
- 目的建立糖尿病患者血清中IA-2自身抗体的检测方法。方法以原核表达的人IA-2融合蛋白作为抗原建立人血清IA-2抗体的固相酶联免疫吸附检测方法（ELISA），该方法经优化后用于糖尿病患者血清中IA-2抗体的检测。结果该文所建立方法的平均批内和批间变异系数分别为6．8％和7．7％；回收率为99．2％～105％。所测定的1型和2型糖尿病患者血清中IA-2抗体的阳性率分别为49％和3．6％。结论应用原核表达的人IA-2蛋白为抗原所建立的ELISA方法简单且可靠，为糖尿病患者血清中IA-2抗体的检测提供了条件。
- 贾秀娟谢晓雁李果谢超张迪周文中罗敏
- 关键词：糖尿病自身抗体IA-2
- 胰岛素瘤相关蛋白-2自身抗体酶联免疫吸附测定方法的建立被引量：1
- 2003年
- 目的:建立糖尿病患者血清中胰岛素瘤相关蛋白鄄2(IA鄄2)自身抗体的酶联免疫吸附测定(ELISA)方法。方法:以链亲和素预包被的聚苯乙烯微量滴定板为固相载体,原核表达的生物素酰化IA鄄2胞内段融合蛋白为抗原,辣根过氧化物酶标记的山羊抗人IgG为二抗,2,2’鄄连氮鄄双鄄[3鄄乙基苯并噻唑啉磺酸](ABTS)为显色底物建立ELISA。结果:本方法的平均批内变异系数为8.8%,批间变异系数为7.7%。用该方法和Roche公司生产的“DiapletsAnti鄄IA鄄2”IA鄄2自身抗体酶联免疫试剂盒进行对比,共检测218例糖尿病患者,以Roche试剂盒的检测结果为准,本方法的诊断灵敏度为92.1%,特异度为98.9%。结论:本研究建立的IA鄄2自身抗体ELISA法有较好的灵敏度、特异度和精密度,且操作简单方便,有较广阔的应用前景。
- 贾秀娟谢晓雁张迪周文中刘优萍郑升杨键罗敏
- 关键词：自身抗体酶联免疫吸附测定糖尿病
- 人胰岛素瘤相关蛋白-2基因的克隆及原核表达研究被引量：2
- 2003年
- 目的 克隆1型糖尿病自身抗原人胰岛素瘤相关蛋白-2(IA-2)的编码基因,并从大肠杆菌中表达具有免疫原性的人IA-2重组蛋白。 方法 抽提胎脑总RNA,通过RT-PCR获得编码IA-2胞内结构域的cDNA,与Pinpoint Xa-1T质粒相连接,构建表达型重组质粒,经转化、筛选并鉴定后,从大肠杆菌诱导表达生物素酰化融合蛋白,进而用亲和层析纯化之,以dot-blot鉴定其免疫原性。 结果 重组质粒转化的大肠杆菌经IPTG诱导表达及亲和层析后得到了纯度较高、分子量约为59kd的融合蛋白,表达产物用dot-blot证明具有免疫原性。 结论 原核表达的生物素酰化人IA-2胞内段融合蛋白具有正确的免疫学构象。
- 贾秀娟陈战许光武谢超谢晓雁罗敏
- 关键词：原核表达1型糖尿病自身抗原大肠杆菌RT-PCR
