辽宁省自然科学基金(20042061)
- 作品数：2 被引量：1H指数：1
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- 白细胞介素-1β小干扰RNA的设计、合成及筛选
- 2008年
- 目的设计和合成针对白细胞介素-1β(IL-1β)的特异性小干扰RNA(siRNA),研究其对体外培养的新西兰白兔膝关节滑膜成纤维细胞表达IL-1βmRNA的干扰作用,筛选出有干扰效果的IL-1βsiRNA,为进一步构建IL-1β特异性双链RNA(dsRNA)质粒载体创造条件。方法参照siRNA的设计原则,采用Ambion公司提供的软件,利用Finder程序查找和设计针对IL-1βsiRNA的正义和反义寡核苷酸链。体外转录法合成4个IL-1βsiRNA,将合成的IL-1βsiRNA分别转染体外培养的新西兰白兔膝关节滑膜成纤维细胞,并以未转染细胞作为空白对照,采用RT-PCR技术检测所合成的IL-1βsiRNA对体外培养的兔滑膜成纤维细胞IL-1βmRNA表达的影响。结果转染48小时后,4条IL-1βsiRNA链中有1条(L4)能够使兔滑膜成纤维细胞IL-1βmRNA的表达水平明显下调,其余3条IL-1βsiRNAs链未见明显的干扰效果。结论不同的IL-1βsiRNA对兔膝关节滑膜成纤维细胞IL-1βmRNA表达水平具有不同的干扰效能。成功筛选出1个有效的IL-1βsiRNA,初步提示RNA干扰技术可用于抑制兔膝关节滑膜成纤维细胞IL-1βmRNA的表达。
- 张宁杨丽丽崔华东
- 关键词：白细胞介素-1ΒMRNA小干扰RNA
