教育部“新世纪优秀人才支持计划”(IRT0532)
- 作品数：2 被引量：19H指数：2
- 相关作者：聂尧王海燕肖荣许娜穆晓清更多>>
- 相关机构：江南大学生物化学系更多>>
- 发文基金：教育部“新世纪优秀人才支持计划”长江学者和创新团队发展计划国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学理学更多>>
- 固定化细胞生物催化制备(S)-苯基乙二醇的研究被引量：3
- 2007年
- 采用海藻酸钙固定化细胞方法能有效提高近平滑假丝酵母催化(RS)-苯基乙二醇(S-PED)去消旋化反应的稳定性,在优化反应条件下,固定化细胞催化批次由游离细胞的2次提高至6次,产物可保持高光学纯度(>95%)、高产率(>85%)。与化学合成液晶掺杂剂S-1011的理化特性对比结果表明,生物催化法制备获得的(S)-PED能够替代化学法制备的相同产品。
- 穆晓清徐岩聂尧刘鑫勤李韶辉
- 关键词：近平滑假丝酵母固定化细胞
- 重组大肠杆菌不对称还原2-羟基苯乙酮合成(R)-苯基乙二醇被引量：16
- 2006年
- 通过对近平滑假丝酵母(R)-专一性羰基还原酶(rCR)进行氨基酸序列分析并根据其序列的保守性设计PCR引物,以近平滑假丝酵母基因组为模板利用PCR技术得到目的基因rcr。该基因全长1011bp,共编码336个氨基酸。将该基因与表达载体pET21c连接后构建重组质粒pETRCR,并转化入EscherichiacoliBL21(DE3)中进行表达。重组大肠杆菌具有(R)-专一性羰基还原酶活性,可催化不对称还原2-羟基苯乙酮合成(R)-苯基乙二醇。研究发现,在重组菌培养过程中,同添加IPTG诱导培养的情况相比,不添加IPTG诱导培养的酶活及不对称转化(R)-苯基乙二醇的效果较好。在反应过程中,转化48h及在pH值8～9的条件下更有利于不对称反应的进行。另外,较高的底物浓度会对反应产生抑制作用,通过提高重组菌细胞浓度可显著提高转化效果。在5g/L的底物浓度条件下,利用0.3g/mL重组菌细胞可还原2-羟基苯乙酮得到(R)-苯基乙二醇,产物光学纯度为95.5%e.e,产率为92.6%。
- 聂尧徐岩王海燕许娜肖荣
- 关键词：羰基还原酶重组大肠杆菌苯基乙二醇
