广西研究生教育创新计划(2006105981001009)
- 作品数：1 被引量：12H指数：1
- 相关作者：范蓉罗彬黄绍明肖绍文何少健更多>>
- 相关机构：广西医科大学广西医科大学第一附属医院更多>>
- 发文基金：国家教育部博士点基金广西新世纪十百千人才工程基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 精子蛋白sp32/OY-TES-1 mRNA及其蛋白在正常组织表达的探讨被引量：12
- 2007年
- 目的了解正常组织中sp32/OY-TES-1 mRNA的表达量是否存在差异以及该蛋白的表达情况,为sp32/OY-TES-1表达谱增加更多信息。方法提取40例(19种)正常组织总RNA,逆转录-聚合酶合成cDNA,普通PCR检测cDNA质量;构建目的基因sp32/OY-FES-1及看家基因HPRT质粒,制备标准品,绘制标准曲线,建立实时定量PCR(TaqMan)方法和优化反应体系,检测组织中sp32/OY-TES-1和HPRT的表达,sp32/OY-TES-1 mRNA的表达量以OY-TES-1/HPRT表示。通过制备的OY-TES-1多克隆抗体,结合免疫组织化学检测sp32/OY-TES-1蛋白在多种正常组织中的表达。结果正常组织中sp32/OY-TES-1 mRNA阳性率为72.50%(29/40);2.非睾丸正常组织中sp32/OY-TES-1 mRNA的相对表达量值(目的基因/看家基因)为0.0001～0.4950,呈对数正态分布;3.睾丸组织中sp32/OY-TES-1 mRNA的相对表达量为44.9,是其他正常组织的91～1000倍;4.免疫组织化学(IHC)显示在所检测的多种正常组织和细胞中(10例睾丸组织、8例结肠、7例肝、6例骨骼肌、5例胃、5例晶状体、4例精子、3例外周血白细胞和1例肾),除4例精子和1例肾组织中的肾小管外,其余均未见OY-TES-1蛋白阳性反应。结论sp32/OY-TES-1 mRNA广泛地表达在各种正常组织,表达量因组织不同而异;睾丸组织是所检测的正常组织中其mRNA表达量最高的组织。而sp32/OY-TES-1蛋白比其mRNA更具有限制性表达的特点。
- 范蓉余良肖绍文何少健罗彬黄绍明罗国容谢小薰
- 关键词：癌-睾丸抗原精子蛋白定量PCR免疫组织化学
