黑龙江省博士后基金(LBH-Z09008)
- 作品数：2 被引量：1H指数：1
- 相关作者：丁涛蔡冬燕翟小龙赵立军韩凤娟更多>>
- 相关机构：黑龙江中医药大学哈尔滨医科大学广州医学院更多>>
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- 慢病毒介导的EZH2靶向RNA干扰对人卵巢癌SKOV3细胞增殖的影响
- 2012年
- 目的:通过慢病毒介导的EZH2-shRNA干扰载体,沉默人卵巢癌SKOV3细胞中果蝇zeste基因的人类同源物(EZH2)的表达,探讨靶基因EZH2对卵巢癌细胞增殖的影响。方法:设计含EZH2基因序列的shRNA慢病毒干扰载体,转染人卵巢癌SKOV3细胞株;利用CCK-8比色法检测EZH2基因沉默后对SKOV3细胞增殖的影响;利用RT-PCR、Western blot分别检测EZH2、PCNA mRNA及蛋白的表达情况。结果:EZH2-shRNA载体感染SKOV3细胞后,可显著抑制SKOV3细胞生长(P<0.05),并下调EZH2、PCNA mRNA和蛋白的表达(P均<0.05),而在空白对照组和空载体转染组中,无抑制作用。结论:沉默EZH2基因可抑制人卵巢癌SKOV3细胞增殖,可能是一种新的基因治疗方法。
- 闫忠鑫翟小龙韩凤娟丁涛蔡冬燕赵立军
- 关键词：慢病毒属细胞增殖EZH2SKOV3
- siRNA转染复合物对卵巢癌细胞SKOV3裸鼠模型EZH2的影响被引量：1
- 2012年
- 目的:利用siRNA载体介导的RNA干扰技术靶向沉默EZH2基因,从而观察对卵巢癌裸鼠模型中肿瘤组织EZH2 mRNA的表达水平,探讨siRNA转染之后,EZH2对肿瘤组织黏附、侵袭和转移的作用。方法:采用原位造模方式,即人卵巢癌细胞SKOV3移植方法构建卵巢癌裸鼠模型。将30只卵巢癌裸鼠随机分为3组(n=10):siRNA干扰(EZH2-siRNA组)组、阴性对照组(NC-siRNA组)和空白对照组(Con组),前两组每日分别腹腔注射100μl siRNA转染复合物和阴性对照转染复合物(1次,共注射5次。末次腹腔注射后48h断颈处死裸鼠,观察腹腔肿瘤组织病灶形成情况,取肿瘤病灶标本。RT-PCR和Western blotting检测肿瘤组织EZH2 mRNA与蛋白表达水平。结果:实验裸鼠共35只,30只造模成功。RT-PCR检测结果显示,与NC-siRNA组和Con组相比,EZH2-siRNA组EZH2 mRNA表达水平明显下降(P<0.05),而后两者之间差异无统计学意义(P>0.05)。Western blotting结果显示,EZH2-siRNA组EZH2蛋白表达明显减弱(P<0.05),而后两者之间差异无统计学意义(P>0.05)。结论:EZH2基因siRNA转染之后的肿瘤组织中EZH2 mRNA与蛋白表达明显减弱siRNA转染之后的肿瘤组织的侵袭、转移能力明显下降,EZH2基因表达减弱可以作为基因治疗的新手段。
- 蔡冬燕翟小龙韩凤娟丁涛闫忠鑫赵立军
- 关键词：EZH2SKOV3转染
