华东理工大学生物工程学院
- 作品数：3,157 被引量：12,895H指数：35
- 相关作者：谭文松袁勤生王永红李元广钱江潮更多>>
- 相关机构：上海应用技术学院香料香精技术与工程学院中国疾病预防控制中心寄生虫病预防控制所中国科学院上海有机化学研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：生物学化学工程医药卫生轻工技术与工程更多>>
- CdTe@SiO2@Au 多功能纳米材料在生物分析中的应用
- 能性复合纳米材料，由于其多种独特的光学、电子和电磁学性质，具有多种功能和和良好的生物兼容性，因而被广泛应用于医学成像、药物释放、电子器件等方面。[1,2] 本文通过溶胶- 凝胶法和自组装法成功合成了多功能纳米复合材料Cd...
- 李原婷李大伟龙亿涛
- 关键词：MULTIFUNCTIONALBIOANALYSIS
- 植物乳杆菌X7022对D-半乳糖诱导的类阿尔兹海默症改善作用研究
- 本研究探讨了一株植物乳杆菌X7022对D-半乳糖诱导的具有记忆减退和认知障碍的类阿尔兹海默症模型小鼠症状的缓解和改善作用及其作用机理。结果显示:源于臭豆腐卤液的植物乳杆菌X7022具备良好耐受胃肠液性能且可在小鼠体内稳定...
- 杜磊谢静莉
- 关键词：D-半乳糖记忆衰退神经炎症
- 海藻糖对面包品质的影响被引量：8
- 2005年
- 该文研究了海藻糖对面包品质的影响。通过对面包成品的感官、比容、硬度等指标的分析,发现海藻糖可以在一定程度上增大面包的比容,改善面包品质;面包贮藏实验表明海藻糖有延长面包保鲜期的功效。
- 彭亚锋周家春
- 关键词：海藻糖面包品质比容
- 人碱性成纤维细胞生长因子在大肠杆菌中的融合表达
- 1997年
- 将人碱性成纤维细胞生长因子ｈｂＦＧＦ基因克隆于质粒ｐＧＥＸ，构建了融合蛋白ＧＳＴ－ＦＧＦ的表达质粒ｐＧＥＸ－ＦＧＦ，将ｐＧＥＸ－ＦＧＦ转化大肠杆菌ＤＨ５α，诱导培养后测得融合蛋白表达量占菌体总蛋白量的２２％，每升发酵液中可产生１８８ｍｇＧＳＴ－ＦＧＦ。纯化后的ＧＳＴ－ＦＧＦ用ＥＬＩＳＡ方法检测，证明它有ＦＧＦ的抗原性，以鼠ＢＡＬＢ／ｃ３Ｔ３测得它具有ｂＦＧＦ的促细胞分裂活性。
- 周宇荀魏东芝沈林南王二力
- 关键词：融合蛋白HBFGFFGF大肠杆菌
- 实时荧光RT-PCR检测贝类中的札幌病毒
- 2009年
- 建立检测贝类中GⅠ、GⅡ、GⅣ和GⅤ型札幌病毒的实时荧光RT-PCR新方法。首先使用PEG8000对贝类中的札幌病毒进行富集,然后采用Tri-reagent提取材料中的总RNA,针对札幌病毒RNA3'端含PolyA尾的特点,使用带有Poly(dT)25的磁珠对病毒RNA进行纯化,用所获的高纯度RNA进行四种型别札幌病毒的实时荧光RT-PCR检测。该方法高效、灵敏,检测下限为101数量级拷贝,能够用于日常检验。
- 邓恬宁潘良文吕蓉高琴张舒亚卢钟山
- 关键词：实时荧光RT-PCR
- 日本血吸虫金属蛋白酶基因的克隆和表达及其对小鼠的免疫保护性研究被引量：2
- 2011年
- 目的克隆和表达日本血吸虫金属蛋白酶(metalloprotease)编码基因并纯化表达产物,观察其在成虫体内定位及在小鼠的免疫试验。方法根据表达序列标签(EST)测序的结果设计引物,从含有金属蛋白酶基因的日本血吸虫cDNA克隆(SJM2CFB04,简称SjB04)中扩增得到该编码基因片段,亚克隆至原核表达载体pET28a中表达,应用组氨酸标签亲和层析法纯化表达产物,蛋白质印迹(Western blotting)分析其免疫原性。应用间接免疫荧光法,观察金属蛋白酶在血吸虫成虫体内的分布。将18只C57BC/6小鼠随机分成两组,实验组用SjB04重组蛋白(25μg/只)免疫小鼠,共3次,每次间隔2周;对照组用佐剂免疫(50μl/只)。末次免疫后2周,每鼠腹部感染40±2条日本血吸虫尾蚴,攻击后第37天起连续收集6 d小鼠粪便,计算每克粪虫卵数和减卵率;第42天剖杀小鼠,门静脉灌注收集成虫并计算减虫率。结果获得了SjB04基因(ORF 528 bp)的编码序列,构建了原核表达载体,并在大肠埃希菌中表达,经组氨酸标签亲和层析法获得纯化重组蛋白SjB04。免疫荧光法检测结果显示,SjB04主要定位于日本血吸虫成虫的肠管表皮。Western blotting分析结果显示,该纯化重组蛋白SjB04能被感染兔血清和免疫兔血清识别,在相对分子质量(Mr)29 800处出现一清晰条带。用该纯化蛋白免疫C57BC/6小鼠后,减虫率为27.1%,粪减卵率为57.8%。结论克隆获得的日本血吸虫SjB04重组蛋白主要定位于日本血吸虫成虫的肠管表皮,该蛋白可明显减少感染日本血吸虫的C57BC/6小鼠的粪卵排出量。
- 徐斌鞠川卢艳莫筱谨冯正许学年胡薇
- 关键词：日本血吸虫金属蛋白酶免疫保护力
- 豌豆蛋白双螺杆挤压参数对其停留时间分布的影响被引量：5
- 2021年
- 豌豆蛋白是制备植物蛋白肉的一种新兴的植物蛋白。以豌豆蛋白作为原料,采用双螺杆高水分挤压技术,利用停留时间分布的原理分析螺杆转速、喂料速度和挤压温度3种挤压参数对物料的影响。随着螺杆转速和喂料速度的增加,物料平均停留时间缩短,轴向混合程度减弱,组织化效果变差。豌豆蛋白的组织化需要较高的温度,达到一定温度后,随着挤压温度的增加,物料平均停留时间延长,混合程度增加,组织化效果变好。正交试验结果显示,3种挤压参数对混合程度的影响为喂料速度>挤压温度>螺杆转速,最佳试验条件为螺杆转速300 r/min、喂料速度10 g/min、挤压温度150 ℃。最佳试验条件下的豌豆组织化蛋白的质构与熟牛肉接近,组织化程度也有了明显的提升。
- 金鑫刘少伟高遹宸林绍梁郑国生周英
- 关键词：豌豆蛋白组织蛋白
- 锌转运蛋白8在酿酒酵母中的重组表达及其抗原性分析
- 2022年
- 锌转运蛋白8(zinc transporter 8,ZnT8)是Ⅰ型糖尿病的重要候选抗原,基于ZnT8所开发的自身抗体检测试剂盒可用于帮助诊断Ⅰ型糖尿病,相关产品已在欧美国家上市。目前,国内正在积极开发Ⅰ型糖尿病检测试剂盒,由于国内尚未建立活性ZnT8的重组生产体系,因此这一关键原料严重依赖进口。本研究主要利用酿酒酵母系统开展了ZnT8的重组表达研究。首先,设计了ZnT8的多种抗原形式,分别为C端单倍体蛋白(C)、C端二倍体(C-C)以及N端和C端串联体蛋白(N-C),并使用酿酒酵母系统对上述蛋白进行了重组表达与纯化。随后,通过桥连法ELISA对纯化蛋白进行了抗原性测试,检测13位Ⅰ型糖尿病病人血清及16位健康志愿者血清后发现:C、N-C、C-C蛋白具有相似的检出率,分别为53.8%(7/13)、61.5%(8/13)及53.8%(7/13);3组的特异性均为100%(16/16);N-C蛋白相对其他2个蛋白而言,其在P3、P4、P8阳性样本上的检测值提高90%以上,表明具有更好的血清抗体识别能力。最后,选取N-C蛋白做进一步的血清样本测试,并将测试结果用ROC曲线进行敏感性及特异性表征,结果表明,与进口金标抗原相比,本方法敏感性无明显差异,特异性有待提高。综上可见,本研究基于酿酒酵母表达生产的ZnT8 N-C串联体蛋白有潜力作为Ⅰ型糖尿病体外诊断试剂开发中的国产替代原料。
- 吴诗璟钱静雯张元兴刘琴
- 关键词：自身免疫ELISA
- 皮肤成纤维细胞在生物反应器中的生长和扩增被引量：8
- 2003年
- 目的 探讨皮肤成纤维细胞在生物反应器中批式和间歇换液培养过程的生长、扩增与代谢特性。方法 将幼儿包皮组织中分离皮肤成纤维细胞接种到含 5 mg/ ml微载体浓度的 1.5升 Celli Gen生物反应器中 ,测定在间歇换液培养和批式培养过程中细胞生长密度、葡萄糖消耗及乳酸生成 ,同时与方瓶和转瓶中间歇换液培养结果进行比较。 结果 在生物反应器间歇换液培养过程中 ,成纤维细胞生长的最终密度达到 2 .0 8× 10 6 / ml,扩增 2 9.7倍 ,是批式培养的 1.81倍。与间歇换液的方瓶和转瓶培养结果相比 ,由于消除了营养和贴壁表面的限制 ,细胞密度分别提高9.16倍和 1.4 3倍。 结论 利用生物反应器和微载体悬浮培养人皮肤成纤维细胞 ,是大量制备组织工程种子细胞的一种有效方法。
- 周燕邓明安华平谭文松
- 关键词：皮肤成纤维细胞生物反应器细胞生长细胞扩增细胞代谢皮肤移植
- Streptomyces rimosus M4018中氧化应激转录抑制因子Rex的克隆表达及与rex操纵子的体外结合活性
- 2012年
- 【目的】为了研究龟裂链霉菌Streptomyces rimosus M4018中的rex基因对自身rex operator(ROP)的调控机制。【方法】根据天蓝色链霉菌Streptomyces coelicolor A3(2)中rex基因的同源序列设计引物进行PCR,从S.rimosus M4018中获得其rex基因(Sr-rex)。同时,通过染色体步移的方法,获得其上游的ROP序列。采用体外凝胶迁移的方法,分析了Sr-Rex对ROP的调控作用。【结果】获取的Sr-rex基因核苷酸序列长度为846 bp,预测的编码氨基酸序列与S.coelicolor A3(2)中Rex的同源性为84%,获得GenBank登录号:GQ849479。圆二色光谱显示Sr-Rex的结构以α螺旋和β折叠为主,与软件预测相符。凝胶迁移实验表明,Sr-Rex能与S.rimosus M4108中扩增到的ROP片段特异性结合。同时,以Rex:ROP的最小结合序列为基础,设计了一条22 bp的单链DNA片段,和Sr-Rex的最大结合摩尔浓度比约为5:1。高浓度的NADH抑制两者的结合活性,而NAD+对结合没有影响。【结论】在S.rimosus M4108中,Rex是通过响应胞内NAD(H)水平的方式来调控ROP的表达的。
- 沈晶唐振宇肖慈英郭美锦
- 关键词：龟裂链霉菌氧化应激基因克隆和表达
