中国医科大学实验动物部
- 作品数：355 被引量：934H指数：13
- 相关作者：张梅英董婉维周生来史晓萍李兆阳更多>>
- 相关机构：解放军军需大学军事兽医研究所中国农业大学生物学院首都医科大学基础医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金辽宁省科学技术计划项目辽宁省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学农业科学化学工程更多>>
- 615小鼠ES细胞集落的分离及初步鉴定
- 2002年
- 目的 分离和培养 6 15小鼠的ES细胞集落 ,为建系打下基础。方法 以PMEF为饲养层分离 6 15小鼠的ES细胞集落 ,进行无饲养层培养 ,并对其进行初步鉴定。结果 ES细胞集落的出现率和传代成功率为 2 2 6 %和 0 94 % ,其ALP染色阳性 ,具有稳定的二倍体核型 ,可自发分化为多种类型的细胞。结论 成功分离和培养了6
- 周欣董婉维王太一
- 关键词：615小鼠近交系细胞系
- pcDNA3.1/myc-His-DJ-1M26I重组载体构建及其对NIH3T3细胞增殖和凋亡研究
- 目的 构建pcDNA3.1/myc-His-DJ-1和pcDNA3.1/myc-His-DJ-1M26I重组表达载体,为研究DJ-1M26I突变与细胞增殖、凋亡的关系及建立转基因动物模型奠定基础.方法 采用突变试剂盒将D...
- 张梅英徐影琪王惟赵越杨葳于萌郭晓冲秦英郑志红
- 关键词：DJ-1NIH3T3细胞
- 细胞周期素依赖性激酶抑制因子p27的生物学特性研究
- 2000年
- p27是一种细胞周期素依赖性激酶抑制因子（cyclin dependent kinase inhibitor,CKI）,其在细胞周期调控中的作用和许多其他的生物学特性及自身调控机制被相继发现并引起人们广泛关注。此外，p27作为一种抑癌基因，在多种人类肿瘤中是独立的预后因子可作为临床诊断的标志。深入研究p27对揭开生命活动过程的机理和防治肿瘤有重要意义。
- 时伟红李凯高山王太一
- 关键词：细胞周期素依赖性激酶人类肿瘤预后因子细胞周期调控继发生物学特性研究
- TLR4/Myd88/NF-κB通路介导表没食子儿茶素没食子酸酯对脓毒血症大鼠急性肾损伤的保护作用被引量：10
- 2019年
- 目的观察表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)对脂多糖(LPS)诱导大鼠急性肾损伤(AKI)的保护作用及TLR4/Myd88/核因子kappa B (NF-κB)的作用机制。方法将SD大鼠随机分为假手术组(Sham组)、LPS诱导急性肾损伤组(AKI组)、EGCG治疗组(EGCG组)和EGCG+LPS+TLR4抑制剂组(TLR4组),每组10只。建立内毒素血症大鼠模型,检测血清肌酐(Cr)和尿素氮(BUN)的变化;ELISA检测血清中白细胞介素-6 (IL-6)、白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-10 (IL-10)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平;HE检测肾脏病理组织学变化,Western blotting和实时PCR检测大鼠肾脏中TLR4、Myd88和NF-κB蛋白及m RNA表达。结果与Sham组相比,AKI组大鼠肾脏损伤明显,血清中Cr、BUN及促炎性细胞因子水平显著升高,IL-10水平显著降低,TLR4、Myd88和NF-κB蛋白及mRNA表达显著升高;而在建模前给予EGCG可以改善AKI,明显降低炎性细胞因子表达,降低TLR4、Myd88和NF-κB表达;给予TLR4抑制剂后,EGCG对AKI的保护作用受到抑制。结论 EGCG对LPS导致的AKI具有保护作用,其机制可能与抑制TLR4/Myd88/NF-κB通路的激活有关。
- 李木子陈克研孙倩邱雨华
- 关键词：表没食子儿茶素没食子酸酯急性肾损伤核因子KAPPA脂多糖
- 制备嵌合体小鼠实验中ES细胞的处理方法被引量：2
- 2008年
- 目的介绍两种制备嵌合体小鼠实验中ES细胞的处理方法。方法一种为差速贴壁分离法即消化后的ES细胞接种在明胶包被的平皿中,利用饲养层细胞与ES细胞贴壁速度的不同来分离ES细胞;另一种方法为冰水浴自然沉淀分离法,即消化后的ES细胞移入15ml离心管中冰水浴,利用细胞间自然沉淀的位置不同分离ES细胞。结果两种方法均可得到足够数量处于未分化状态的ES细胞。结论这两种方法都可以应用于制备嵌合体小鼠实验中的ES细胞处理。
- 王惟于洋张梅英王禄增郑志红
- 关键词：嵌合体小鼠ES细胞
- 实验动物屏障环境应用不同气流方式的比较被引量：2
- 2008年
- 目的通过改变屏障系统实验动物环境设施气流方式,提升设施空气洁净度。方法在乱流式动物室内增加改变气流方式的围帘式屏障,将乱流气流改变为单向流气流。结果单向流气流方式室内空气落下菌、浮游菌及尘埃粒子数量明显少于乱流气流方式。结论单向流气流方式可有效地控制微生物污染,保护实验动物工作者。
- 宗阿南黄乐辉王丽清王光王禄增
- 关键词：单向流实验动物
- 小檗碱激活p38MAPK/FOXO3a信号通路抑制三阴性乳腺癌细胞增殖、侵袭和EMT被引量：6
- 2021年
- 目的探讨小檗碱(Berberine)对三阴性乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖、侵袭及上皮–间质转化(EMT)的影响及可能机制。方法以不同浓度小檗碱处理MDA-MB-231细胞,采用CCK8方法观察细胞增殖能力变化,Transwell实验检测细胞侵袭能力变化。裸鼠移植瘤实验观察小檗碱对肿瘤的增殖影响。Western blot方法检测小檗碱处理后MDA-MB-231细胞p38MAPK、p-p38MAPK、FOXO3a、p-ERK、p-JNK及EMT相关标志物(Ecadherin、Vimentin、N-cadherin、Snail)的表达。结果小檗碱抑制MDA-MB-231细胞的增殖,降低侵袭迁移能力,并抑制荷瘤小鼠肿瘤生长,上调MDA-MB-231细胞E-cadherin蛋白的表达,下调Snail、vimentin和Ncadherin蛋白表达;小檗碱能够上调p38MAPK磷酸化水平并促进转录因子FOXO3a的表达。结论小檗碱抑制三阴性乳腺癌细胞增殖与侵袭,与p38MAPK/FOXO3a信号通路有关。
- 刘岚耿真许颖陈娜陈克研周生来张爱君
- 关键词：三阴性乳腺癌小檗碱
- IL-38对胶原诱导性关节炎大鼠Th17/Treg失衡的调节作用被引量：3
- 2020年
- 目的探讨IL-38对胶原诱导性关节炎Th17/Treg失衡的调节作用。方法SPF级SD大鼠30只,随机分为3组,即正常对照组(CON)、胶原诱导性关节炎大鼠(collagen-induced arthritis rats,CIA)、CIA+IL-38(5ng/g)组;CIA组、IL-38组采用大鼠尾根部皮下注射牛II型胶原乳剂建立CIA大鼠模型;IL-38组于初次免疫后第24天起每天注射IL-38(20-152)5 ng/g,连续给药10d;观察大鼠后足及关节情况,HE染色观察大鼠滑膜组织病理变化,流式检测Th17/Treg细胞变化,ELISA、qRT-PCR检测Th17/Treg相关基因的表达情况。结果IL-38明显改善胶原诱导性关节炎大鼠的症状、滑膜组织病理情况、调节Th17/Treg细胞的表达水平以及Th17/Treg相关基因的表达水平。结论IL-38通过调节Th17/Treg失衡对胶原诱导性关节炎大鼠具有保护作用。
- 裴冰陈克研吴腾飞肖卫国
- 关键词：胶原诱导性关节炎
- 应用基因组步移克隆小鼠Doc-1R基因组序列被引量：16
- 2001年
- 目的 获得小鼠 Doc- 1R基因组序列。方法 根据小鼠 Doc- 1R基因的 c DNA序列设计、合成特异引物 ,应用基因组步移策略对小鼠基因组步移文库进行扩增。以含有特殊接头 (adaptor)的小鼠基因组步移文库作为模板 ,用巢式 PCR法扩增目的片段。结果 应用此方法得到约 1.5 kb的目的片段 ,经测序分析证实 Doc- 1R基因克隆成功。此基因含有 4个外显子、3个内含子 ,外显子与内含子接头符合 GT- AG法则。结论 基因组步移方法简单、可靠、有效 。
- 生秀杰姜莉周伟强王太一张学
- 关键词：基因组步移基因克隆基因组序列
- G418和潮霉素B双重抗性小鼠胚胎干细胞饲养层的制备被引量：4
- 2005年
- 通过脂质体转染的方法,先后将含有neo基因的质粒pWL/neo和含有潮霉素基因的质粒导入NIH3T3细胞中,利用G418和潮霉素B的药物选择特性,对转染细胞进行压力筛选,经500μg/ml的G418和300μg/ml潮霉素B压力筛选后,获得了具有G418和潮霉素B双重抗性细胞克隆。抗性NIH3T3细胞的形态和生长速度与正常NIH3T3细胞没有差异,用PCR法特异性核苷酸引物检测抗性细胞基因组DNA,可以扩增出对应的核苷酸片段。生长在双抗NIH3T3细胞饲养层上ES细胞基本保持正常ES细胞特征,成功地培育了G418和潮霉素双重抗性的NIH3T3细胞,为进行pTet-on和pTRE-H-Insulin目的基因电转染ES细胞的阳性细胞克隆筛选打下了基础。
- 张梅英李华董婉维秦英杨葳王禄增王太一
- 关键词：胚胎干细胞饲养层细胞NIH3T3细胞G418脂质体转染
