潍坊医学院口腔医学研究所
- 作品数：9 被引量：13H指数：3
- 相关作者：孙学玲何永云曲政赵娜张鹏更多>>
- 相关机构：滨州医学院口腔医学院山东大学附属济南市中心医院更多>>
- 发文基金：山东省自然科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 即刻与延迟桩腔预备对3种根充糊剂加牙胶根充后根尖封闭性影响的研究被引量：3
- 2011年
- 目的评价即刻桩腔预备与延迟桩腔预备对3种根充糊剂充填根管根尖封闭性的影响。方法选取离体直根管牙105颗,截冠后随机分为5组。A组:牙胶尖+AH Plus根充(n=30);B组:GuttaFlow+单牙胶尖根充(n=30);C组:牙胶尖+ZOE根充(n=30)。D组:为阳性对照,牙胶尖根充(n=10);E组:为阴性对照,牙胶尖根充(n=5)。其中A、B、C各组内分别随机分为A1、A2、A3,B1、B2、B3,C1、C2、C3组(n=10)。各组均采用手用Protaper冠向下法预备根管。对A1、B1、C1组行即刻桩腔预备;A2、B2、C2组根充1周后行延迟桩腔预备。A3、B3、C3、D、E组不做桩腔预备。利用印度墨水染色,透明牙技术评价经即刻桩腔预备与延迟桩腔预备后剩余根充材料的根尖微渗漏情况。结果即刻与延迟桩腔预备在相同根充材料之间对根尖的封闭性影响无统计学差异(P>0.05);相同预备时机不同材料组间比较AH Plus组和GuttaFlow组好于ZOE组(P<0.05),AH Plus组和GuttaFlow组间无统计学差异(P>0.05)。结论即刻与延迟桩腔预备对相同根充材料根尖封闭性的影响无统计学差异。建议根充后行即刻桩腔预备并使用AH Plus或GuttaFlow做根充糊剂。
- 荆祥李倜白建文迟春媛张海明张学明
- 关键词：透明牙桩腔预备微渗漏
- 转录因子Dlx1和Dlx2在成釉细胞中调控MMP20启动子转录活性的研究被引量：2
- 2013年
- 目的:观察Dlx家族转录因子Dlx1和Dlx2对小鼠成釉细胞基质金属蛋白酶20(matrix metallo proteinase20,MMP20)基因的调控作用,初步确定Dlx家族在釉质发育中的作用。方法:构建Dlx1和Dlx2真核表达载体重组质粒,用双荧光素酶报告基因检测系统分析不同剂量的Dlx1和Dlx2对MMP20基因启动子转录活性的影响;确定Dlx1和Dlx2有明显作用的启动子区段,用基因定点突变和双荧光素酶报告基因检测系统分析Dlx1、Dlx2对MMP20基因启动子转录活性的影响,以及Dlx1、Dlx2在调控MMP20基因时的相互作用;最后观察Dlx1与Dlx2共转染时MMP20基因活性表达的变化。结果:Dlx1转染小鼠成釉细胞后MMP20启动子活性表达上调,Dlx2转染小鼠成釉细胞后MMP20启动子活性表达抑制;突变MMP20启动子的Dlx结合位点后,MMP20启动子的转录活性下降,而且Dlx1失去上调MMP20启动子转录活性的作用;当Dlx1与Dlx2共转染后,在Dlx1转染剂量不变的前提下,随着Dlx2转染量的增加,小鼠成釉细胞MMP20启动子转录活性显著增加。结论:Dlx1和Dlx2在釉质发育过程中有重要的生物学意义,对MMP20基因表达具有重要的调节作用。
- 袁杰刘晓影曲政孙岩张娟娟高玉光
- 关键词：DLX基因定点突变
- Runx2介导TGF-β1调控成釉细胞MMP20基因表达的研究被引量：3
- 2012年
- 目的:研究Runx2在TGF-β1调控小鼠成釉细胞金属基质蛋白酶-20(matrix metalloprotei-nase 20,MMP20)基因表达中的作用。方法:首先利用双荧光素酶基因报告系统分析TGF-β1对MMP20基因启动子转录活性的影响;然后利用染色体免疫共沉淀(Chromatin Immunoprecipitation,ChIP)方法观察Runx2与MMP20特异性结合位点之间的相互作用,并利用基因定点突变和双荧光素酶基因报告系统分析Runx2对MMP20基因启动子转录活性的影响;最后运用小RNA干扰技术使Runx2基因沉默,实时定量RT-PCR技术观察TGF-β1诱导MMP20基因表达的改变。结果:TGF-β1刺激成釉细胞后,MMP20启动子在-87～+23区域转录活性无明显变化外,其他各区域转录活性均增强。利用ChIP研究发现Runx2与MMP20基因核心启动子的特征性序列"TGTGGG"相互作用;将该特征性序列由"TGTGGG"突变为"TGTAAG"后,利用双荧光素酶基因报告系统发现Runx2对MMP20基因启动子转录活性的影响减弱;利用小RNA干扰技术使Runx2基因沉默后,TGF-β1上调MMP20基因表达的作用减弱。结论:TGF-β1通过转录因子Runx2调控成釉细胞MMP20的表达。
- 孙学玲孙岩张娟娟赵娜梁广智刘晓影成敏高玉光
- 关键词：RUNX2TGF-Β1
- Runx 2在牙釉质形成中的作用研究被引量：1
- 2011年
- 目的:研究小鼠成釉细胞中Runx 2对釉成熟蛋白(Amelotin,AMTN)、成釉蛋白(Ameloblas-tin,AMBN)、牙成釉细胞相关蛋白(odontogenic ameloblast-asssociated protein,ODAM)基因表达的调控作用,为研究Runx 2在牙釉质形成中的作用奠定基础。方法:通过RT-PCR法从小鼠成釉细胞中克隆得到Runx 2全长基因,测序正确后将其亚克隆至pcDNA3.1-hisA载体中;构建针对小鼠Runx 2的siRNA表达框架,将反应质粒pcdna-3.1-HisA-Runx 2及针对Runx 2的特异性小分子干扰RNA(siRNA)分别转染小鼠成釉细胞,用RT-PCR方法检测Runx 2,AMTN,AMBN以及ODAM的mRNA水平。结果:转染的小分子干扰RNA(siRNA)对Runx 2mRNA的表达有显著性抑制作用,Runx 2基因沉默可显著抑制AMTN和AMBN的mRNA表达水平;Runx 2基因过表达可显著上调AMTN和AMBN的mRNA表达水平。Runx 2基因的表达变化对ODAM的mRNA表达水平则无显著性调控作用。结论:Runx 2通过调控AMTN和AMBN的表达水平,在牙釉质形成过程中发挥作用。
- 何永云梁广智刘晓影孙岩高玉光
- 关键词：核心结合因子
- Foxo3a调控小鼠釉质发育过程中MMP-20基因的表达被引量：2
- 2014年
- 目的:探讨转录因子Foxo3a在釉质发育过程中调控基质金属蛋白酶-20(MMP-20)基因表达的分子机制。方法:分别利用免疫组织化学技术、免疫荧光、RT-PCR法、双荧光素酶报告基因检测系统检测转录因子Foxo3a与MMP-20启动子区域的转录调控水平,分析Foxo3a调控MMP-20的转录活性的机制。结果:免疫组织化学染色发现Foxo3a在成釉细胞核中呈阳性表达,并且随着釉质的分泌表达逐渐增强,晚期变弱;RT-PCR证实Foxo3a促进MMP-20基因表达(P<0.05);双荧光素酶检测显示,Foxo3a促进MMP-20表达(P<0.05);特定序列定点突变后的Foxo3a对MMP-20基因的转录活性无显著的影响(P>0.05)。结论:转录因子Foxo3a可能通过与特定序列结合而调控MMP-20的表达,从而在釉质分泌过程中发挥重要作用。
- 王云虹慈浩粟杨勇张莉王玉敏李伯翰高玉光
- 关键词：FOXO3ART-PCR
- TGF-β1调控小鼠成釉细胞Amelotin基因表达的研究被引量：4
- 2011年
- 目的:探讨TGF-β1对Amelotin基因表达的影响及作用机制。方法:通过实时定量RT-PCR法观察TGF-β1对釉成熟蛋白(Amelotin)基因表达的影响;利用TGFBR1小RNA干扰(siRNA)技术阻断TGF-β受体I(TGFBR1)表达,或在成釉细胞中过表达活化型TGF-β受体I(T204D),观察Amelotin基因表达的改变;利用双荧光素酶基因报告系统观察TGF-β1和T204D对成釉细胞Amelotin启动子转录活性的调控作用。结果:TGF-β1刺激成釉细胞后,Amelotin基因表达显著增强;利用小RNA干扰技术使TGFBR1基因沉默,实时定量RT-PCR显示TGF-β1调控Amelotin基因表达的作用减弱,而pCDNA3.1-T204D转染成釉细胞促进了Amelotin基因表达。将pGL3-Amelotin启动子转染成釉细胞,并用TGF-β1刺激成釉细胞,Amelotin启动子的转录活性明显增强。TGFBR1小RNA干扰阻断了TGF-β1诱导的Amelotin启动子转录活性,而将pGL3-Amelotin与T204D共转染成釉细胞后,促进了Amelotin启动子的转录活性。结论:在牙釉质发育过程中,TGF-β1和活化型TGFBR1信号通路调控成釉细胞Amelotin基因表达。
- 周红英孙学玲何永云刘晓影赵娜孙岩梁广智高玉光
- 关键词：TGF-Β1成釉细胞
- 表皮生长因子受体EGFR在腺样囊性癌中的表达
- 2014年
- 目的:检测EGFR在腺样囊性癌中的表达强度,为治疗腺样囊性癌提供分子靶向依据。方法:应用免疫组化技术,在光镜下对腺样囊性癌细胞计数,进行图像分析,观察EGFR表达情况,计算阳性细胞率,统计数据分析。结果:腺样囊性癌免疫组化染色切片的光镜高倍视野中,检测到EGFR阳性表达,阳性表达组和阴性对照组之间统计学分析存在着明显的差异(P<0.05)。结论:EGFR在腺样囊性癌中高表达。
- 张世龙王明国林明李秀梅张鹏
- 关键词：EGFR腺样囊性癌免疫组化
- MEF2C调控成釉细胞MMP-20基因启动子转录活性的研究被引量：1
- 2013年
- 目的:通过研究MEF2C转录因子对小鼠成釉细胞金属基质蛋白酶-20(matrix metalloprotei-nase-20,MMP-20)基因表达的调控作用,明确MEF2C的功能,为研究MEF2C在釉质形成中的作用奠定基础。方法:用RT-PCR的方法扩增小鼠MEF2C基因,并构建真核表达载体pcDNA3.1/myc-hisA-MEF2C;对MMP-20基因启动子区域(-1197～+23)中MEF2C潜在的结合位点进行定点突变,并构建至荧光报告载体pGL3-Basic中;利用双荧光素酶基因报告系统分析MEF2C对MMP-20基因启动子转录活性的影响。结果:在成釉细胞中过量表达MEF2C能够明显提高MMP-20基因启动子的转录活性,而对定点突变后的MMP-20基因启动子转录调控作用减弱。结论:小鼠成釉细胞核中MEF2C可通过MMP-20启动子上MEF2C潜在的结合位点,上调MMP-20基因表达水平。
- 刘珩李伯翰韩婷婷李东亮王玉敏孙岩曲政高玉光
- 关键词：成釉细胞定点突变
- 转录因子Ets-2调控小鼠成釉细胞MMP-20基因表达的研究被引量：1
- 2013年
- 目的:通过研究Ets-2转录因子对调控小鼠成釉细胞金属基质蛋白酶-20(matrix metalloproteinase-20,MMP-20)基因表达的调控作用,进一步明确Ets-2在釉质发育中的作用。方法:应用免疫组化方法观察出生后5d小鼠切牙成釉细胞中Ets-2的表达;在小鼠成釉细胞中分别转染200ng pcDNA3.1/myc-HisA-Ets-2和Ets-2siRNA后,利用实时定量RT-PCR法检测MMP20基因表达的不同变化;用双荧光素酶报告基因检测系统分析Ets-2对MMP-20启动子突变后转录活性的影响。结果:免疫组化显示Ets-2在成釉细胞中呈阳性表达。实时定量RT-PCR研究发现Ets-2过表达后,MMP-20表达水平显著增加;当Ets-2基因沉默后,MMP-20表达水平则显著下降。双荧光素酶报告基因检测系统检测显示,转染pcDNA3.1/myc-HisA-Ets-2的实验组与对照组相比,MMP-20启动子的转录活性升高;对启动子Ets潜在结合部位进行定点突变后,MMP-20启动子的转录活性显著下降,Ets-2丧失上调MMP-20启动子转录活性的作用。结论:小鼠成釉细胞核中Ets-2可通过MMP-20启动子上Ets潜在结合位点,上调MMP-20基因表达水平。
- 孙霞王青山韩婷婷李东亮孙学玲孙岩纪虹利高玉光
- 关键词：免疫组化RT-PCR
