淮海工学院江苏省海洋生物产业技术协同创新中心
- 作品数：11 被引量：17H指数：2
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- 相关领域：生物学轻工技术与工程农业科学环境科学与工程更多>>
- N-(2-呋喃甲基)-N-甲基-3,6-二氧代-1,4-环己二烯氯化铵的合成
- 2016年
- 以对苯二酚和糠胺为原料、质量分数95%的乙醇为溶剂合成N-(2-呋喃甲基)-N-甲基-3,6-二氧代-1,4-环己二烯氯化铵.对苯二酚和糠胺物质的量比为1∶2,在60℃下反应5h,再转变为盐酸盐形式,经柱层析分离方式得红色针状晶体,收率为42%.对产物结构进行红外、紫外、核磁及质谱表征.
- 王建刘玮炜黄桂青王赪胤高广林王丽陶玲史天智
- 正交试验优化鲬鱼微冻复合保鲜剂配方研究被引量：4
- 2020年
- 为了解鲬鱼在微冻(-5±1)℃条件下品质变化规律并建立相应的调控措施。以挥发性盐基氮(total volatile basic nitrogen,TVB-N)值为主要指标、硫代巴比妥酸(thiobarbituric acid,TBA)值、pH值和总色差值为参考指标,考察鲬鱼在微冻贮藏过程中的腐败、脂肪氧化和蛋白质变性等方面的变化,并采用单因素和正交试验考察茶多酚、壳聚糖和普鲁兰多糖及其复配对供试样品品质的调控作用。结果表明:经过最佳配比复合保鲜剂浸泡的鲬鱼各项检测指标均优于空白对照组,其最佳配比为壳聚糖添加量0.8%、茶多酚添加量0.2%、普鲁兰多糖添加量0.15%。经验证,在该配比下的保鲜剂可使鲬鱼在微冻16 d的TVB-N值为10.526 mg/100 g、TBA值为0.162 mg/kg、pH值为7.01,总色差值为40.25,鲬鱼仍符合食用标准。
- 徐倩刘晓攀赵永慧胡馨月刘冰赵行王祥鹏盘赛昆
- 关键词：茶多酚普鲁兰多糖微冻
- 利用短短芽孢杆菌进行酮还原酶CgKR2的高效表达与纯化被引量：1
- 2019年
- 酮还原酶CgKR2能够一步还原前手性羰基化合物生成高附加值的手性醇,有望解决手性醇传统制备方法的步骤烦琐和高成本问题,具有很高的经济效益。研究表明,CgKR2催化底物2-氧代-4-苯基丁酸乙酯(OPBE)生成普利类降压药的重要中间体(R)-2-羟基-4-苯基丁酸乙酯[(R)-HPBE]具有良好效果。但CgKR2的生产成本高昂、过程烦琐。利用短短芽孢杆菌胞外分泌表达酮还原酶CgKR2,获得该酶的高效表达,并经简便的一步镍亲和层析纯化,即获得高纯度酮还原酶CgKR2,产率高达每升发酵7. 8mg纯酶。以酶标板法测定其比活力、温度稳定性以及动力学参数等基本酶学性质,结果显示,CgKR2的比活力为(78. 32±7. 62) U/mg、Km为(0. 2±0. 02) mmol/L、Vmax为(117. 64±3. 6)μmol/(min·mg)、Kcat为73s^-1,与以往报道的数据一致,并且获得的CgKR2纯酶在30℃下孵育72h依然保持80%的活性,酶活的稳定性远好于以往的制备方法。开发出的一套简便高效的酮还原酶CgKR2表达纯化工艺,降低了生产成本、简化了生产工艺,可推进手性醇生物催化制备的普及,对其他生物催化工程酶的制备方法研究也有借鉴作用。
- 胡艳红龚雪梅丁柳柳高嵩李婷婷
- 关键词：分泌表达生物催化
- 利用GpC DNA甲基化酶M.CviPI高效表达限制性内切酶Pst Ⅰ被引量：1
- 2017年
- 源自原核生物"限制-修饰"系统的限制性内切酶是生命科学研究的重要工具酶.将小球藻Chlorella病毒NYs-1的GpC DNA甲基化酶M.CviPI导入大肠杆菌表达宿主ER2566,高效表达限制酶PstⅠ的基因,再通过简便的Ni亲和、阴离子交换两步层析纯化获得重组限制酶PstⅠ.结果表明,该重组限制酶的蛋白纯度达到90%以上,比活力达到640 000U·mg^(-1),并具有快速酶切性能,能够在15min内完成1μg底物λDNA的消化,达到商业化限制酶PstⅠ的质量标准.
- 陈凯王佩吕应堂高嵩
- 关键词：重组蛋白表达限制性内切酶甲基化酶
- PAEs对四角蛤蜊毒性和免疫的影响被引量：2
- 2015年
- 研究PAEs对四角蛤蜊毒性和免疫的影响.96h的急性毒理试验表明,在助溶剂Tween 20的安全质量浓度范围内,随着DMP,DEP和DBP水平的升高,蛤蜊存活率呈下降趋势,而安全质量浓度随PAEs碳链的增加而下降;DMP,DEP和DBP分别处理蛤蜊96h,短期内蛤蜊免疫力显著提高,30d的慢性毒理试验表明,长期使用PAEs可引起蛤蜊免疫力下降.
- 苏洪波王兴强曹梅阎斌伦张庆起
- 关键词：四角蛤蜊PAES安全质量浓度
- 脊尾白虾MSTN基因组织及不同蜕皮后时间点的表达特征被引量：2
- 2016年
- 肌肉生长抑制素(myostatin,MSTN)是动物肌肉生长与发育过程中重要的调控因子.为揭示该基因在脊尾白虾中的生物学功能,依据克隆获得的脊尾白虾MSTN基因的部分序列设计引物,采用实时荧光定量PCR技术对脊尾白虾不同组织和不同蜕皮后时间点的表达特征进行了分析.结果表明:MSTN在脊尾白虾的眼柄、鳃、心脏、肝胰腺、卵巢、胃、肠和肌肉共8个组织中均有表达,且在眼柄、心脏和胃中表达量均高于肌肉,说明除参与肌肉生长和发育的调控外,MSTN在脊尾白虾中还可能发挥其他作用;在不同蜕皮后时间点的表达特征分析中发现,在蜕皮后初期,脊尾白虾体内MSTN的表达量显著低于蜕皮间期个体,随蜕皮后时间的延长,MSTN的表达量逐渐升高,说明MSTN在脊尾白虾蜕皮相关的肌肉生长过程中发挥着负调控作用.
- 薛蓓张培李志辉赵莲邰小飞徐晔赖晓芳高焕阎斌伦
- 关键词：脊尾白虾肌肉生长抑制素
- 罗氏沼虾组织蛋白酶D基因的克隆及其组织表达分析被引量：1
- 2016年
- 采用cDNA末端快速扩增技术(RACE)从罗氏沼虾肝胰腺中克隆了组织蛋白酶D基因(CATD)全长cDNA,采用实时荧光定量PCR技术对罗氏沼虾CATD在肝胰腺、眼柄、鳃、心脏、肌肉、胃等组织中的表达进行了研究.结果显示,罗氏沼虾CATDcDNA全长1 361bp,开放阅读框为1 158bp,编码385个氨基酸,CATD蛋白预测分子质量为42.1kDa,理论等电点为6.602;基于CATD氨基酸同源序列比对和系统发育分析显示,罗氏沼虾与脊尾白虾、日本囊对虾、斑节对虾和美洲螯龙虾紧密聚为一枝,相似度分别是94%,88%,87%和82%;罗氏沼虾所有组织中均检测到CATD的表达,其在眼柄中的相对表达量最高,其次是心脏.
- 张夏青许建和潘茜易乐飞彭永兴高焕阎斌伦王姗韩振程汉良
- 关键词：罗氏沼虾组织蛋白酶D基因克隆
- 汞胁迫下脊尾白虾线粒体基因组拷贝数变化特征分析被引量：2
- 2016年
- 利用重金属Hg对脊尾白虾进行了96h的急性毒性实验,研究了Hg^(2+)胁迫下脊尾白虾线粒体基因组拷贝数的变化特征.设置了0.003 68,0.011 6和0.036 8μmol/L Hg^(2+)浓度梯度,分别在Hg^(2+)胁迫后0,3,6,12,24,48,72和96h时间点取样,利用Taqman实时荧光定量PCR技术,测定不同Hg^(2+)浓度及胁迫时间下的线粒体基因组拷贝数.结果显示,0.003 68,0.011 6和0.036 8μmol/L Hg^(2+)胁迫下的线粒体基因组拷贝数均值分别为3 065,3 758和4 357,即随Hg^(2+)浓度增加,线粒体基因组拷贝数也随之升高;同一Hg^(2+)浓度下,脊尾白虾线粒体基因组拷贝数与对照组相比随胁迫时间延长总体呈上升趋势;脊尾白虾线粒体基因组拷贝数在Hg^(2+)胁迫下的变化与Hg^(2+)剂量和时间存在一定的相关性.因此,线粒体基因组拷贝数可作为研究甲壳类重金属Hg毒性的生物指标.
- 张培李志辉赵莲薛蓓李明传赖晓芳阎斌伦高焕
- 关键词：脊尾白虾线粒体基因组拷贝数
- 条浒苔破壁方法研究
- 2019年
- 为了建立一种有效的条浒苔细胞壁破壁方法,以显微观察和蛋白质提取率为评价指标,考察干法超微粉碎法、湿法超微粉碎法、超声波粉碎法、湿法超微粉碎+酶解法和超声波粉碎+酶解法5种方法对条浒苔细胞壁的破坏效果.结果表明,5种方法中湿法超微粉碎+酶解法处理后,细胞组织形态被破坏,细胞之间排布零散无规律,细胞内组织液流出,此方法蛋白质提取率最高,可达到30.86%.
- 张中堂徐倩林倩如刘晓攀赵永慧王熙史辰娟盘赛昆
- 关键词：条浒苔破壁蛋白质提取率湿法超微粉碎酶解法
- 海洋低温α-淀粉酶酶解豌豆淀粉及其生物活性被引量：3
- 2016年
- 豌豆淀粉是一种广泛用于食品加工的重要的食品原料,采用研制的新型海洋低温α-淀粉酶,结合单因素试验和正交试验优化了α-淀粉酶酶解豌豆淀粉的工艺参数,并对酶解产物的生物活性进行了研究。结果表明,低温α-淀粉酶酶解豌豆淀粉工艺条件为加酶量35 U/g,时间165 min,温度35℃,豌豆淀粉浓度4%,pH6.5。经高效液相色谱(HPLC)分析,酶解产物中麦芽三糖、麦芽四糖和麦芽五糖的总和达到65.88%。酶解产物对羟自由基和DPPH自由基均有清除作用,对DPPH自由基的清除效果好于对羟自由基的清除效果。为豌豆淀粉的深入加工提供了参考。
- 吕明生王淑军焦豫良房耀维刘姝薛晔敏
- 关键词：豌豆淀粉酶解羟自由基DPPH自由基
