河北医科大学实验动物学部河北省实验动物实验室
- 作品数:5 被引量:5H指数:1
- 相关机构:华中科技大学同济医学院更多>>
- 相关领域:生物学医药卫生文化科学更多>>
- 人RAFF转基因斑马鱼的构建及早期免疫基因表达检测
- <正>目的:建立人BAFF转基因斑马鱼模型,探讨其在自身免疫性疾病发病中的作用。材料和方法:RT-PCR法由人淋巴瘤细胞克隆了人BAFF基因全长855bp蛋白编码区域,构建表达人BAFF重组质粒Tol2-hBAFF,体外...
- 张力周昕谢英刘超徐增年刘树锋
- 文献传递
- Baff转基因斑马鱼的构建及相关基因表达检测被引量:1
- 2013年
- 通过RT-PCR法由斑马鱼脾脏克隆B细胞刺激因子baff基因,构建过表达斑马鱼baff且携带有绿色荧光标记蛋白的重组质粒pIRES2-GFP-baff;胚胎显微注射获得转基因斑马鱼胚胎;通过GFP荧光标记跟踪并筛选转基因阳性鱼;Western blot法鉴定Baff-GFP融合蛋白表达情况;qPCR检测baff,GFP及baff下游相关基因bcl-2,il-4mR-NA表达情况。结果表明细胞、胚胎及幼鱼baff和GFP均高表达,baff下游基因bcl-2激活和il-4基因抑制表达。通过胚胎显微注射法可成功获得过表达baff的转基因斑马鱼,此研究为建立红斑狼疮转基因斑马鱼模型及高通量筛选Baff拮抗剂奠定了基础。
- 张力谢英周昕徐增年刘树锋
- 关键词:斑马鱼红斑狼疮BAFFBCL-2IL-4
- 我校动物实验公共服务平台建设工艺布局的探讨
- 目前世界各国对实验动物方面的重视日益加强。通过邮件及电话等多种形式对国内外多个名校院所的科研人员进行了简要调查,其中包括美国哈佛医学院、德国海德堡大学、日本东京大学以及国内的几家院校和公司,认为完善和规范的实验动物平台已...
- 苏利波刘超谢英伍美张焕铃徐增年刘树锋
- 关键词:动物实验公共服务平台
- 四环素诱导肝脏特异表达绿色荧光蛋白转基因斑马鱼模型建立被引量:4
- 2015年
- 目的探索tet-on四环素诱导表达系统在斑马鱼体内应用策略与技术路线,构建四环素诱导肝脏特异表达绿色荧光蛋白的转基因斑马鱼,为条件型功能基因研究及组织特异转基因斑马鱼疾病模型的建立奠定基础。方法构建肝脏特异启动子fabp10启动rt TA蛋白表达的重组质粒pfabp10-rt TA,联合p TRE-Tight-BI-Ac GFP1质粒转染He La细胞后给予doxycycline诱导,Western blot法验证;pfabp10-rt TA联合p TRE-Tight-BI-Ac GFP1质粒注射斑马鱼1-细胞期受精卵后,30μg/m L doxycycline诱导,荧光筛选稳定整合个体。结果共转染pfabp10-rt TA与p TRE-Tight-BI-Ac GFP1的He La细胞经1μg/m L浓度doxycycline诱导培养液诱导,GFP表达量显著高于不加doxycycline培养液对照组;筛选获得的稳定整合斑马鱼幼鱼,在浓度为30μg/m L doxycycline条件下,肝脏明显有绿色荧光表达,对照组幼鱼肝脏位置未有明显绿色荧光。结论 Tet-On四环素诱导表达系统可用于建立四环素调控斑马鱼肝脏特异表达外源基因;利用该技术可建立诱导肝脏表达GFP建立转基因斑马鱼品系,为建立条件型转基因斑马鱼疾病模型、探索肝脏器官发生发育等研究提供良好的模式动物工具。
- 张力刘超周昕谢英刘树锋徐增年
- 关键词:斑马鱼肝脏绿色荧光蛋白
- 人BAFF转基因斑马鱼的构建及早期免疫基因表达检测
- <正>目的:建立人BAFF转基因斑马鱼模型,探讨其在自身免疫性疾病发病中的作用。材料和方法:RT-PCR法由人淋巴瘤细胞克隆了人BAFF基因全长855bp蛋白编码区域,构建表达人BAFF重组质粒Tol2-hBAFF,体外...
- 张力周昕谢英刘超徐增年刘树锋
- 文献传递