福州大学生物科学与工程学院福建省海洋酶工程重点实验室
- 作品数：27 被引量：61H指数：5
- 相关作者：郑邦晓黄小云余湘萍靳晓罗丹更多>>
- 相关机构：天津科技大学生物工程学院天津科技大学生物工程学院工业发酵微生物教育部重点实验室天津科技大学化工与材料学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金福建省自然科学基金天津市应用基础与前沿技术研究计划更多>>
- 相关领域：生物学轻工技术与工程理学农业科学更多>>
- 海洋来源褐藻胶裂解酶分离纯化及酶学性质研究被引量：5
- 2018年
- 以假交替单胞菌(Pseudoalteromonas sp.zb7-4)发酵制备褐藻胶裂解酶粗酶液,采用弱阴离子DEAE交换层析分离褐藻胶裂解酶,分析纯化褐藻胶裂解酶Alg L的酶学特性.结果表明:Alg L的表观分子质量约为32 ku,比活力为(208.26±5.87)U·mg-1;其最适反应pH为7.0,在pH为6.0~10.0范围内稳定性较好,保温1 h仍能保持80%以上的相对酶活力;最适反应温度50℃,在40℃保温30 min,其残余酶活力高于80%;Cu2+、Cr3+、Co2+、Ba2+、Sr2+、Hg2+对该酶具有不同程度的抑制作用,Hg2+抑制作用最为明显;该酶具有较好的盐耐受性,在3 mol·L-1Na Cl反应体系中保温2 h,仍残余66%酶活力.动力学参数Km、Vmax、Kcat测定表明,该酶对聚古罗糖醛酸钠(PG)亲和力较高,为偏好聚甘露糖醛酸钠(PM)裂解作用的双功能酶.
- 韩伟许鑫琦叶秀云林娟
- 关键词：褐藻胶裂解酶假交替单胞菌纯化酶学性质
- 温泉来源地芽孢杆菌耐热α-淀粉酶基因的克隆表达及酶学性质研究被引量：2
- 2018年
- 以Geobacillus sp.WQJ-1基因组DNA为模板,利用PCR扩增获得成熟α-淀粉酶基因amy WQJ,构建重组质粒p ET-28a(+)-amy WQJ,转化大肠杆菌BL21(DE3)诱导表达.用镍柱亲和层析对粗酶液进行分离纯化,获得相对分子质量约为59 ku的重组酶r Amy WQJ.研究表明,该酶最适pH值为6.0,具有较好pH稳定性,最适温度为70℃;Ca^(2+)能提高该酶的热稳定性;Hg^(2+)、EDTA、SDS、Cr3+、Mn^(2+)、Cu^(2+)和Pb^(2+)对该酶活力具有不同程度的抑制作用,而Co^(2+)、Na+和β-Mercaptoethanol则具有促进作用.以可溶性淀粉为底物,该酶动力学参数Km为6.62 mg·m L-1,vmax为2 197.80μmol·(mg·min)-1;降解最适作用底物木薯淀粉的终产物为寡聚糖.
- 林云林娟王国增林梦丹叶秀云
- 关键词：Α-淀粉酶酶学性质
- 乳酸对东方肉座菌β-葡萄糖苷酶的抑制动力学被引量：1
- 2017年
- 为探讨糖化共发酵同步进行的过程中发酵产物对纤维素酶活力的影响,研究了乳酸对纤维素酶组分中β-葡萄糖苷酶(BG)活力的影响.结果显示:乳酸对BG活力有不同程度的抑制,该作用具有显著的浓度效应,其半抑制浓度IC_(50)=0.19mol/L;乳酸对BG的抑制类型是可逆的竞争性抑制,抑制常数K_I=0.149mol/L.应用底物反应动力学方法研究酶抑制动力学,建立了抑制动力学模型,发现乳酸对BG的影响是缓慢可逆失活的过程,底物对其有明显的保护作用,测得其正向速率常数k_(+0)为0.4L/(mol·min),逆向速率常数k-0为0.056min^(-1).该结果为纤维素糖化共发酵进程调控提供了理论依据.
- 许鑫琦郎斌邬小兵林娟陈清西
- 关键词：Β-葡萄糖苷酶乳酸抑制动力学发酵产物
- 齿毛菌原生质体的制备与转化被引量：1
- 2019年
- 探究菌龄、稳渗剂种类、溶壁酶质量浓度、酶解温度、酶解时间和再生培养基对齿毛菌原生质体制备及再生的影响,并利用PEG介导原生质体转化.结果表明:以0.6 mol·L^(-1)甘露醇为稳渗剂,20 mg·m L^(-1)溶壁酶于30℃酶解48 h菌龄的菌丝3 h,所得原生质体形成数最多,为1×108个·m L^(-1);所得原生质体在0.8 mol·L^(-1)蔗糖为稳渗剂的2号培养基中再生率最高,为0.1%; PEG介导原生质体转化,经潮霉素B抗性平板筛选获得2个转化子.实验建立的齿毛菌原生质体制备及转化体系,为其遗传操作及分子生物学研究奠定基础.
- 王正娟苏柳如叶秀云林娟杨捷
- 关键词：原生质体
- Alkalibacterium sp. SL3中α-半乳糖苷酶基因的克隆、表达和性质研究被引量：3
- 2019年
- 以大布苏盐碱湖分离菌Alkalibacterium sp. SL3的DNA为模板,利用PCR扩增α-半乳糖苷酶基因(gal SL3),构建重组质粒pET-22b-gal SL3,转化至大肠杆菌BL21(DE3)诱导表达重组酶(r Gal SL3).通过镍柱亲和层析分离纯化重组酶,并对纯化的重组酶进行性质研究.研究表明,纯酶r Gal SL3最适pH值为5.5,最适温度为55℃;该酶在pH值5.0～10.0保持90%以上的剩余酶活,在50℃有非常好的热稳定性.在0～1.5 mol·L^(-1)NaCl溶液中该酶的酶活基本不受影响,在3.0 mol·L^(-1)NaCl溶液中有很好的稳定性. Pb^(2+)、Ca^(2+)、Co^(2+)、Li^+、Na^+、K^+、Triton-100和β-mercaptoethanol等对重组酶的活性有明显的促进作用.该酶水解对硝基苯基-α-D-吡喃葡萄糖苷的Km、vmax和kcat分别为(2.64±0.02)μmol·m L^(-1)、(454.55±0.59)μmol·(mg·min)^(-1)和(347.73±1.27) s^(-1).重组酶可水解蜜二糖和棉籽糖,不能水解瓜尔豆胶.
- 邱聪花罗蒙林娟叶秀云王国增
- 关键词：Α-半乳糖苷酶基因克隆性质分析
- 地衣芽胞杆菌α-淀粉酶酸性pH稳定性提升突变体的生化特征
- 2017年
- 地衣芽胞杆菌α-淀粉酶(Bacillus licheniformisα-amylase,BLA)的pH稳定性在提升发酵生产过程特别是后提取工段的操作稳定性,提高产品得率,弱化酶成品贮存条件和延长货架期等方面具有重要价值。该研究对1株能够合成更好pH稳定性BLA的地衣芽胞杆菌B186 1-1的BLA进行了分子克隆、序列分析及性质研究,与模式菌株ATCC14580来源的BLA氨基酸序列相比发现,有4个位点的差异,包括:N4K、R134L、E243D和S320A。进一步克隆表达与纯化了该菌株的BLA,重组酶在80℃、pH 6.0~7.5下显示最高活性;在pH 5.0下放置1 h,该酶保留80%以上酶活力,而来源于菌株ATCC14580的BLA在此相同条件下仅保留约10%酶活力;通过3D结构模拟分析显示BLA中的差异性碱基与其pH稳定性存在相关关系。
- 罗丹靳晓牛丹丹谢银珠林娟叶秀云
- 关键词：高温Α-淀粉酶天然突变体酶学性质
- 齿毛菌高产漆酶的分子调控机制研究
- 漆酶(Laccase,EC1.10.3.2)是蓝色多铜氧化酶家族的成员之一.其作用底物广泛,在印染废水降解、生物漂白、生物修复、食品加工、抗生素降解等方面有巨大应用价值.然而,漆酶存在产酶周期长、产酶量低,稳定性差等缺点...
- 王正娟林娟叶秀云杨捷
- 关键词：漆酶RNA-SEQ
- 不同条件下乳清蛋白水解物乳化性的变化及机理分析
- 2023年
- 在pH8.5、37℃、酶与底物质量比0.5%的条件下用胰蛋白酶水解乳清分离蛋白(WPI)5 h制备水解物(WPH)。通过控制环境条件,即添加不同盐(NaCl、KCl、CaCl_(2)、MgCl_(2)),改变离子强度(0.1 mol/L和1 mol/L),pH值(3~7)以及热处理来调控O/W界面处肽的组成。采用质谱法鉴定肽的组成,激光衍射法测量乳液的粒度分布及STEP技术测定乳液的稳定性,从而评估界面处肽的组成特性及相互作用对WPH乳化性的影响。结果表明,pH3时,因离子强度增大而引起的电荷屏蔽作用导致WPH乳液发生显著聚集,而pH7时离子强度对WPH乳化性的影响不显著,热处理则显著降低了其乳化性。此外,在WPH等电点(pH4)时,热处理显著提高了WPH的乳化性,尤其是添加CaCl_(2)的样品组。综合不同pH条件下析出肽的组成及乳化性分析,研究发现来自β-Lg的肽段f(41~60)、f(71~91)、f(78~101)对WPH的乳化特性有重要贡献。
- 黄雯婷茅宇虹蔡珍玲陈兰李仁宽叶秀云
- 关键词：乳化性PH值
- 超声提取-气相色谱-质谱法同时测定尼龙等食品接触材料中5种酰胺类物质被引量：5
- 2020年
- 对超声提取法从尼龙等食品接触材料中分离出5种酸胺类物质(丙烯酰胺、甲基丙烯酰胺、己内酰胺、油酸酰胺和硬脂酰胺)的条件进行了优化。预先将所分析的材料洗净晾干,剪成0.5cm×0.5cm的小块,并混匀。取此样品1.00g,用甲醇先后提取2次,每次加甲醇25mL,于25℃超声提取30min。将提取后过滤所得滤液合并,在45℃吹氮至近干。残渣用甲醇溶解并定容至50.0mL。取此溶液1.0mL,用0.22μm滤膜过滤,取其滤液按仪器工作条件进行气相色谱-质谱分析。选用Agilent HP5-MS色谱柱及在60~270℃区间按程序升温模式进行色谱分离,并按5种酰胺化合物的保留时间进行质谱测定。上述5种酰胺的质量浓度均在5~100mg·L^-1内与其对应的峰面积呈线性关系。测得其检出限(3S/N)为0.08~1.0mg·L^-1。以空白样品为基体,加入5种酰胺的混合标准溶液进行回收试验,测得回收率为90.2%~104%,测定值的相对标准偏差(n=6)为0.78%~1.7%。按本方法分析了4件实样,结果仅在尼龙炊具中检测到已内酰胺,质量分数为10mg·kg^-1,小于欧盟规定的迁移限量(15mg·kg^-1)。
- 郭娟娟唐熙陈丽娟程振李小晶
- 关键词：尼龙食品接触材料
- 整体柱固定化胰蛋白酶反应器的设计及其在水解β-乳球蛋白中的应用
- 2021年
- 分别采用2.1、6.0μm的大孔有机整体柱为载体,制备固定化胰蛋白酶反应器(MITRs),比较不同方案对固定化得率及酶比活的影响.相较于氰基硼酸,以2-甲基吡啶硼烷为还原剂的固定化方案虽提高了酶的比活,但导致固载量减少了32%~50%.此外,孔径大小对酶的比活无显著影响.MITRs可有效水解β-乳球蛋白,且水解效率随着循环流速的增加而提高.其中使用2.1μm-MITR的水解产物主要为相对分子质量小于3 ku的小肽.在18次重复实用过程中,6.0μm-MITR表现出更高的稳定性,具有较高的重复利用性.
- 茅宇虹李仁宽叶秀云
- 关键词：胰蛋白酶Β-乳球蛋白整体柱固定化
