首都医科大学附属北京佑安医院北京市肝病研究所
- 作品数：189 被引量：508H指数：11
- 相关作者：王爽谢棒祥许坚吉庞丽君王安娜更多>>
- 相关机构：北京大学医学部基础医学院北京大学医学部北京大学医学部基础医学院生物化学与分子生物学系更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金北京市自然科学基金北京市卫生系统高层次卫生技术人才培养项目更多>>
- 相关领域：医药卫生文化科学生物学文学更多>>
- AGR2蛋白在前列腺癌组织中的表达及意义被引量：4
- 2012年
- 目的探讨AGR2蛋白在前列腺癌组织中的表达及意义。方法利用Real-time RT-PCR、RT-PCR和免疫组织化学方法检测AGR2在不同的细胞系以及前列腺癌组织中的表达。结果 AGR2的表达与前列腺癌的进展呈正相关。结论 AGR2蛋白可作为前列腺癌进展诊断的候选分子标志物。
- 谢棒祥朴正福陈德喜周建光
- 关键词：前列腺肿瘤聚合酶链反应
- 原发性肝癌患者血浆循环游离线粒体DNA定量分析及其诊断意义被引量：1
- 2015年
- 目的分析血浆循环游离线粒体DNA（CCF mt DNA）水平与原发性肝癌（HCC）的相关性,探讨其作为HCC标志物的可行性。方法收集HCC患者及体检健康者的血浆标本各60例,提取全基因组DNA;实时荧光定量PCR分析线粒体CoⅡ一段保守且与核基因组无同源的序列;构建含该靶序列的已知浓度的质粒作为标准品,系列稀释后定量检测CCF mt DNA的含量;独立样本t检验分析HCC患者与体检健康者CCF mt DNA水平的差异;ROC曲线分析CCF mt DNA诊断HCC的效能。结果HCC患者CCF mt DNA水平[（0.591±0.014）×106拷贝/m L]显著高于健康对照组[（0.364±0.012）×106拷贝/m L],差异有统计学意义（t=12.27,P〈0.05）;ROC曲线结果显示,以0.470×106拷贝/m L为cut off值,CCF mt DNA诊断HCC的敏感性为83.3%,特异性为88.3%;ROC曲线下面积（AUCROC）=0.916,95%CI：0.864-0.968,P〈0.05。结论 HCC患者CCF mt DNA水平升高,且诊断HCC的敏感性、特异性较高,可能作为肿瘤标志物用于HCC诊断。
- 乔录新王贲士陈德喜石英郭洪亮
- 关键词：肝癌血浆实时荧光定量聚合酶链反应
- 干扰素抗乙肝病毒治疗40周年(1976-2016)回顾与展望
- 郑荣领
- AFP截断体真核表达载体的构建及表达被引量：3
- 2015年
- 原发性肝癌在全球的发病率逐年增长，是严重威胁人类健康的恶性肿瘤之一。AFP具有多种生物学功能，参与调控肝癌的发生发展，在肝癌高危人群的筛查和肿瘤患者术后的随访中具有重要的应用价值。AFP的相对分子质量为70000，全长为590个氨基酸，含有1个寡糖组成的糖基。
- 王珊珊庞丽君陈德喜李刚
- 关键词：真核表达载体AFP原发性肝癌肝癌高危人群相对分子质量生物学功能
- TP53BP2/ASPP2通过p53非依赖性方式激活mTOR通路抑制HepG2人肝癌细胞自噬被引量：4
- 2019年
- 目的研究肿瘤蛋白p53结合蛋白2/p53凋亡刺激蛋白2(TP53BP2/ASPP2)对HepG2人肝癌细胞自噬的调节作用和机制。方法通过腺病毒、慢病毒感染HepG2细胞上调或下调细胞中ASPP2的表达,HepG2细胞继续在不含胎牛血清的培养基中培养24 h,通过Western blot法检测自噬相关蛋白微管相关蛋白1轻链3(LC3)、beclin1、P62、自噬相关基因5(ATG5)、ATG7和哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)通路相关蛋白mTOR、磷酸化的mTOR(p-mTOR)、真核转录起始因子4E结合蛋白1(4EBP1)、磷酸化的4EBP1(p-4EBP1)、核糖体蛋白S6、磷酸化的S6(p-S6)、核糖体S6激酶B1(RPS6KB1/p70S6K)、磷酸化的p70S6K(p-p70S6K)的蛋白表达,荧光显微镜检测细胞表达的绿色荧光蛋白-微管相关蛋白1轻链3(GFP-LC3)融合蛋白。同时,使用慢病毒感染不表达p53的Hep3B细胞,敲低细胞中的ASPP2水平,Western blot法检测Hep3B细胞ASPP2和mTOR通路相关蛋白mTOR、p-mTOR、4EBP1、p-4EBP1、S6、p-S6、RPS6KB1/p70S6K、p-p70S6K的蛋白表达。结果当ASPP2的表达上调时,mTOR复合物1(mTORC1)通路被激活,并且自噬相关蛋白的表达和自噬体的数量减少。在下调ASPP2表达后,mTORC1通路受到抑制,自噬相关蛋白的表达水平和自噬体的数量增加。在p53表达沉默的Hep3B细胞中,当ASPP2下调后,mTORC1途径仍然受到抑制。结论ASPP2以p53非依赖性方式激活mTOR通路抑制HepG2人肝癌细胞自噬。
- 许萍时红林焦彦陈德喜时红波
- 关键词：自噬P53
- 基于微滴数字PCR技术建立HBV共价闭合环状DNA的检测方法被引量：1
- 2021年
- 目的建立一种用于检测HBV共价闭合环状DNA(cccDNA)的微滴数字PCR(ddPCR)方法。方法构建HBV cccDNA标准品,利用HBV cccDNA和松弛环状DNA(rcDNA)在结构上存在的差异,设计HBV cccDNA引物和探针,通过扩增HBV质粒得到HBV cccDNA标准品,把梯度稀释后的标准品作为HBV cccDNA检测的模板,建立ddPCR检测方法,并分析此方法的检出限和重复性;收集2017年6月—2020年10月在首都医科大学附属北京佑安医院就诊的20例临床患者的肝组织样本,均诊断为HBV感染,提取样本的DNA,利用质粒安全性ATP依赖的DNA酶(PSAD)进行酶切,得到HBV cccDNA模板,对ddPCR检测方法进行临床样本的评价,并与实时荧光定量PCR(qPCR)检测方法作对比。计数资料两组间比较采用χ^(2)检验。结果建立了基于ddPCR的HBV cccDNA检测方法,梯度稀释的HBV cccDNA标准品均能准确检出,检出限为1拷贝/μl,其中1×10^(3)、1×10^(2)、1×10^(1)拷贝/μl标准品的变异系数分别为4.41%、3.98%、5.09%;检测20例临床HBV患者样本的HBV cccDNA,ddPCR检测方法能检出17例,阳性率为85%,qPCR检测方法能检出11例,阳性率为55%,两组比较差异有统计学意义(χ^(2)=4.286,P=0.038)。结论建立的ddPCR检测HBV cccDNA方法具有较低的检出限和较好的重复性,为进一步的临床检测提供了有效的工具。
- 田原徐玲范子豪曹亚玲张向颖陈煜段钟平任锋
- 关键词：乙型肝炎病毒
- 可溶化羊膜制备方法的建立及其应用
- 2014年
- 目的探讨建立可溶化羊膜的制备方法及其对细胞增殖的影响。方法从胎盘分离完整的羊膜,用物理化学方法去除细胞成分,形成多种形式的可溶化羊膜,制备包被培养皿,进行细胞培养并分析其增殖活性。结果羊膜可加工成液体、膜状及颗粒状的可溶化羊膜。用液体状的羊膜细胞外基质液制备不同浓度的包被培养皿,可进行间充质干细胞的培养。羊膜液包被培养皿比传统的生物材料包被培养皿细胞增殖活性明显增强,且增殖活性与包被浓度明显相关(P均<0.05)。结论去除细胞的可溶化羊膜可作为医学研究领域中重要的生物材料。
- 朴正福张海燕任锋谢棒祥樱川宣男加茂功陈德喜李宁
- 关键词：羊膜细胞外基质生物材料
- 细胞外组蛋白在酸吸入性急性肺损伤发病中的作用研究
- 目的研究细胞外组蛋白是否是盐酸吸入性ALI发病过程中的重要炎症介质,是否可作为干预的靶标。方法选取5个浓度的盐酸来研究吸入盐酸与血浆组蛋白水平的相关性;选取吸入盐酸后共6个时间点观察组蛋白的变化规律;采用抗组蛋白中和抗体...
- 张雁林毛丽君李树强陈明郭利霞赵赞梅关里赵金垣温韬
- 关键词：急性肺损伤中和抗体
- 文献传递
- 黄芪多糖对肝癌Hep G2.215细胞的抑制作用及其机制研究
- 2022年
- 目的探讨黄芪多糖对肝癌Hep G2.215细胞体外增殖的抑制作用及其作用机制。方法CCK-8法测定不同浓度黄芪多糖作用于Hep G2.215细胞48 h、72 h后对其增殖影响;平板细胞克隆实验测定不同浓度黄芪多糖对Hep G2.215细胞克隆生长的影响;流式细胞术检测黄芪多糖对Hep G2.215细胞周期和凋亡的影响。结果CCK-8检测结果显示,当黄芪多糖给药浓度达1000 μg/ml时,对Hep G2.215细胞生长具有抑制作用,且与对照组相比差异有统计学意义(P<0.05)。平板细胞克隆实验表明,低浓度(100 μg/ml)的黄芪多糖对Hep G2.215细胞克隆形成具有抑制作用,与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。流式细胞术检测结果显示,G2/M期细胞比例与对照组相比呈下降趋势(P<0.05),经过黄芪多糖处理的Hep G2.215细胞,细胞凋亡率高于对照组(P<0.05)。结论黄芪多糖对肝癌Hep G2.215细胞生长具有抑制作用,其机制可能是通过阻滞Hep G2.215细胞进入G2/M期,激活了细胞凋亡系统,从而诱导细胞凋亡。
- 产柳佳杨舒雯闫亚冬王文敬李榕陈静李伟华赵立春
- 关键词：黄芪多糖CCK-8细胞克隆肝癌
- 慢性肝病患者拉米夫定耐药毒株突变模式特征分析被引量：8
- 2017年
- 目的 探讨拉米夫定（LAM）耐药毒株突变模式及HBV S基因相关变异在不同疾病进展慢性肝病患者中的特征.方法 收集LAM耐药慢性肝病患者的血液标本,获得相应的HBV RT基因核苷酸序列,分析耐药突变位点、药物耐受和耐药相关HBV S基因变异特点及组间差异.结果 本研究纳入慢性乙型肝炎（CHB）患者47例,乙肝肝硬化（LC）和乙肝相关肝细胞癌（HCC）患者16例.M204I单点突变与L180M＋M204I/V为LAM耐药的慢性肝病患者最常见突变形式（35/63,55.56％）.LC/HCC组对三种以上核苷（酸）类似物同时耐药人数高于CHB组（62.50％ vs 34.04％,P =0.046）.LC/HCC组在HBV-S区检测到与免疫逃逸相关的HBsAg突变位点数多于CHB组（62.50％ vs 31.91％,P=0.031）,I126T/V与G145A（LCC/HCC,60％）、I126S/T与S117T（CHB,46.67％）为HBsAg逃逸突变的最常见形式.两组患者均检测到RT区变异伴随HBsAg终止密码子的突变（rtA181T/sW172＊和rtM204I/sW196＊）.结论 不同疾病进展慢性肝病患者LAM耐药毒株突变及相关HBV S基因变异特征存在差异,LC/HCC患者多重耐药和免疫逃逸毒株比例高于CHB患者.
- 欧阳雅博李庆魏飞力张玉林黄雁翔宋晨朝郭向华谢放王珊珊陈德喜
- 关键词：乙型慢性肝病拉米夫定耐药突变
