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长春生物制品研究所有限责任公司: 作品数：427 被引量：615H指数：10; 相关作者：郭立君宋宗明赵小琳赵大鹏刘辉更多>>; 相关机构：中国食品药品检定研究院吉林大学吉林农业大学更多>>; 发文基金：吉林省科技发展计划基金国家科技重大专项国家自然科学基金更多>>; 相关领域：医药卫生生物学农业科学经济管理更多>>

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一种森林脑炎病毒IgM抗体检测试剂盒及其应用: 本发明涉及一种森林脑炎病毒IgM抗体检测试剂盒及其应用，所述试剂盒包括酶标森林脑炎病毒森张株E蛋白的单克隆抗体试剂，所述的酶标森林脑炎病毒森张株E蛋白的单克隆抗体试剂中采用含有维生素C和乙二醇的稀释液作为稳定剂。本发明的...; 常军亮邹勇孙宏亮曹玉峰张秀霞唐剑光吴月韩慧利李雨桐严永男; 文献传递

登革病毒Ban18HK20株非结构蛋白氨基酸定点突变对病毒增殖及毒力的影响: 2023年; 目的探讨非结构蛋白氨基酸突变(NS1-G53D、NS3-E250V)对登革病毒(Dengue virus,DENV)4型Ban18HK20株增殖及毒力的影响。方法通过与DENV减毒株(PDK53)进行序列比对,确定Ban18HK20株突变位点;采用同源重组技术构建点突变质粒pSPTM-Ban18HK20(G53D)、pSPTM-Ban18HK20(E250V)、pSPTM-Ban18HK20(G53D+E250V),酶切及基因测序鉴定点突变质粒;体外转录获得病毒RNA,电转染Vero细胞拯救获得点突变病毒;通过蚀斑试验、间接免疫荧光试验、病毒全基因组测序、生长动力学试验、CCK-8试验和小鼠神经毒力试验对点突变病毒进行生物学特性鉴定。结果酶切及测序证实点突变质粒构建正确。免疫荧光试验及病毒测序结果显示病毒拯救成功。点突变病毒比母本病毒蚀斑小。Ban18HK20(G53D)、Ban18HK20(E250V)、Ban18HK20(G53D+E250V)的病毒滴度第4天达峰值,分别为7.67、7.84、7.78 LgPFU/mL;母本病毒第5天达峰值,为7.68 LgPFU/mL。Ban18HK20(G53D)感染的BHK21细胞增殖活力与母本病毒感染的细胞相比显著增高(P=0.003 6);Ban18HK20(G53D)、Ban18HK20(G53D+E250V)感染的C6/36细胞增殖活力与母本病毒感染的细胞相比显著增高(P <0.000 1)。点突变病毒与母本病毒对4周龄BALB/c小鼠均无神经毒力;点突变病毒Ban18HK20(E250V)(LD50=8.51 PFU)、Ban18HK20(G53D+E250V)(LD50=0.69 PFU)对3日龄BALB/c乳鼠的神经毒力低于母本病毒(LD50=0.69 PFU);等量病毒经脑内注射后,点突变病毒Ban18HK20(G53D+E250V)对裸鼠的存活率(60%)高于母本病毒(0)。点突变病毒遗传稳定,在Vero细胞上传至第10代未出现回复突变。结论非结构蛋白NS1-G53D氨基酸突变减弱了Ban18HK20株对C6/36和BHK21细胞的毒性,双点联合突变可减弱Ban18HK20株在裸鼠体内的神经毒力。本研究为DENV毒力位点研究及疫苗研发奠定了基础。; 李明房恩岳刘晓辉李玉华; 关键词：登革病毒定点突变病毒毒力非结构蛋白

甲型肝炎病毒L-A-1株在人胚肺二倍体细胞2BS株上的遗传稳定性被引量：1: 2021年; 目的探讨甲型肝炎病毒(hepatitis A virus,HAV)L-A-1株在人胚肺二倍体细胞2BS株(简称2BS细胞)上的遗传稳定性。方法将HAV L-A-1株在2BS细胞上连续传代培养至32代,取23、24、26、28和32代次病毒,检测抗原含量和病毒滴度。RT-PCR扩增各代病毒HAV1~HAV7基因序列片段,采用DNAMAN软件进行拼接,得到全基因组核苷酸序列,分析不同代次病毒基因组核苷酸和氨基酸同源性;并与GenBank中登录的国内外主要HAV毒株进行同源性分析,同时比对VP1和VP3区氨基酸序列。各代次病毒液经腹腔免疫ICR小鼠,0.5 m L/只,于免疫后28 d,经心脏采血,分离血清,ELISA法检测血清抗体效价。结果HAV L-A-1株23、24、26、28和32代次病毒抗原含量在10240~20480 EU/mL之间,病毒滴度为7.00~7.50 lgCCID50/mL。不同代次HAV L-A-1株病毒全基因组核苷酸和氨基酸序列同源性均为100%;与国内外主要HAV毒株的核苷酸序列同源性为91.40%~99.70%,氨基酸序列同源性为98.20%~99.69%,与L-A-1参考株(AF314208)核苷酸和氨基酸序列同源性最高,分别为99.70%和99.69%;与国内外主要HAV毒株VP1区有5处氨基酸不一致,VP3区有2处氨基酸不一致,与L-A-1参考株(AF314208)和H2减毒株(H2K25株)VP1和VP3区氨基酸序列完全一致。不同代次病毒液免疫ICR小鼠后阳转率均为100%,血清抗体效价在684.69~997.84 mIU/mL之间,各代病毒间差异无统计学意义(P>0.05)。结论HAV L-A-1株在2BS细胞上连续传代后,具有良好的遗传稳定性。; 徐艳玲李昊堃王艺博夏青娟岳立广刘令九; 关键词：甲型肝炎病毒

我国大豆田蓟马研究现状被引量：9: 2017年; 大豆田蓟马原属次要害虫,近年来逐渐上升为主要害虫。现已知2亚目3科12属21种,少数种类为捕食性;大部分为植食性,且寄主植物范围广泛。植食性蓟马不仅在大豆上取食或产卵为害,还能传播植物病毒,栖花的蓟马是大豆不育系的传粉媒介之一。从大豆出苗到结荚期均有发生,尤以苗期为害严重。在大豆田节肢动物群落中,植食性蓟马的优势度较高;在不同生育期,蓟马空间分布型有所差异。有害蓟马综合治理应采取以农业防治为基础,物理防治和生物防治为主,化学防治为辅的综合治理策略。总结大豆田蓟马种类、生物生态学特性及防治方法方面的研究现状,可为大豆田有害蓟马综合治理提供参考。; 高宇刘延超史树森崔娟熊晋峰; 关键词：大豆害虫

卡介菌多糖核酸治疗过敏性鼻炎合并哮喘的临床疗效被引量：1: 2011年; 目的观察卡介菌多糖核酸对过敏性鼻炎合并哮喘的临床治疗效果。方法将98例2001年初～2009年初在吉林市中心医院耳鼻喉科就诊的过敏性鼻炎合并哮喘患者随机分为治疗1组、治疗2组及对照组,3组均给予相同的过敏哮喘基础治疗,治疗1组再经肌肉注射卡介菌多糖核酸(BCG polysaccharide and nucleic acid,BCG-PSN)注射液,疗程3个月;治疗2组再经肌肉注射BCG-PSN,疗程6个月;对照组只进行基础治疗,不给予BCG-PSN。观察疗程结束后1年内3组患者过敏性鼻炎及哮喘的发作情况,根据哮喘的发作次数及程度判断疗效。结果疗程结束后0～6个月内,治疗1组和治疗2组的过敏性鼻炎及哮喘的临床症状明显好转,显效率和总有效率均明显高于对照组(P<0.05或P<0.01);疗程结束后7～12个月,治疗2组的显效率和总有效率均明显高于对照组(P均<0.05)。BCG-PSN治疗中未见明显不良反应。结论BCG-PSN治疗过敏性鼻炎合并哮喘疗效确切,安全可靠,远期疗效与疗程有关。; 王敏何巍王伟善周欣; 关键词：卡介菌多糖核酸过敏性鼻炎哮喘

假病毒发展现状及其在包膜病毒研究中的应用被引量：1: 2023年; 假病毒(pseudovirus)是一种被人为删除关键毒力基因、截短病毒基因3’端的长末端重复序列且丧失致病力的缺陷型病毒。假病毒核衣壳部分与野生型病毒一致,但包膜蛋白可替换为高传染性、高致病性病毒的包膜蛋白。因此,可通过更换假病毒的包膜蛋白,使其能替代各种野生型高致病性病毒在生物安全等级2级或1级条件下进行烈性病毒相关研究和疫苗研发。现就假病毒的发展现状及其在不同包膜病毒研究中的应用作一概述。; 石博文(综述)常军亮(审校); 关键词：假病毒包膜病毒

单克隆抗体糖基化修饰的研究现状及进展被引量：4: 2020年; 糖基化是经酶定向控制下,在蛋白质或脂质特定位点附加寡糖链的共翻译和翻译后重要的修饰过程,发生于高尔基体和内质网。糖基化修饰是单克隆抗体药物结构形成、功能发挥及药代动力学等生物学特性的重要影响因素。糖型通过影响单克隆抗体的结构而对药物的半衰期、效应功能等产生影响。在特定的细胞表达系统中,不同的细胞培养工艺参数对糖基化异质性产生影响。本文就糖型结构异质性对抗体效应功能的影响、细胞培养条件对抗体糖基化的作用以及糖基化研究技术的现状作一综述。; 刘晓宇(综述)常军亮刘玉林(审校); 关键词：单克隆抗体糖基化

重组人白细胞介素-1受体拮抗剂生物学活性检测方法的建立及验证被引量：2: 2021年; 目的建立重组人白细胞介素-1受体拮抗剂(interleukin-1 receptor antagonist,IL-1Ra)生物学活性检测方法,并对方法进行验证。方法根据IL-1Ra阻断IL-1β杀伤人黑色素瘤细胞A375.S2的能力评价IL-1Ra的生物学活性,结果用标准品进行校正。对方法的样品起始浓度(8、10、12、14μg/mL)和IL-1β终浓度(2、4、6 ng/mL)进行优化,并验证方法的专属性、准确度、线性范围、中间精密度、耐用性。用建立的方法检测本公司在研产品3批原液和3批成品的生物学活性。结果确定该方法的样品起始浓度为8μg/mL,IL-1β终浓度为4 ng/mL。IL-1Ra原液缓冲液成分及成品中辅料成分对检测结果无影响;线性范围为6~13μg/mL,相关系数R2为0.9921;准确度验证线性回归方程的斜率为0.9758;不同试验人员于不同时间对1批原液、1批成品检测结果的几何变异系数(geometric coefficient of variation,GCV)分别为13.895%和8.670%,均<20%;不同细胞代次、不同细胞密度下相对效价测定值的GCV为5.595%,<20%。用建立的方法检测3批原液和3批成品的结果较稳定。结论成功建立了重组人IL-1Ra生物学活性检测方法,该方法准确度高,精密度好,耐用性强,检测结果稳定可靠,可用于产品的生物学活性评价和质量控制。; 俞露王莹张宇刘莹刘景会刘玉林; 关键词：人黑色素瘤细胞生物学活性细胞增殖

冰点下降法测定注射用胸腺肽的渗透压被引量：3: 2013年; 目的采用冰点下降法测定注射用胸腺肽的渗透压,并观察其稳定性。方法用制备的0.9%NaCl和5%葡萄糖标准溶液对渗透压摩尔测定仪进行标定后,连续测定5次注射用胸腺肽的渗透压,计算变异系数(CV),验证该方法的精密度;取20批注射用胸腺肽,每瓶分别用500 ml和125 ml 0.9%NaCl溶液及5%葡萄糖溶液稀释,测定其渗透压;将注射用胸腺肽分别置(6±2)℃放置12个月,(25±2)℃放置6个月,分别于不同时间取样,稀释后测定渗透压,观察其长期和加速稳定性。结果 5次测得的注射用胸腺肽渗透压的变异系数为0.401%。20批注射用胸腺肽的渗透压在287～347 mOsmol/kg之间,以不同体积的0.9%NaCl和5%葡萄糖稀释样品后测得的渗透压的变异系数均较小,表明样品的渗透压批间差异较小;在稀释液量相同的条件下,5%葡萄糖试验组的渗透压显著高于0.9%NaCl组(P均<0.001)。注射用胸腺肽分别于(6±2)℃下放置12个月和(25±2)℃、相对湿度(60±10)%的条件下放置6个月,其渗透压均无显著变化。结论冰点下降法操作简便、快速,精密度高,可用于注射用胸腺肽渗透压的检测。; 张金岩邱野李帅姜崴蔡岩司杨乐闫素志杨琳; 关键词：胸腺肽渗透压

重组戊型肝炎病毒抗原ELISA检测方法的建立被引量：4: 2011年; 目的建立重组戊型肝炎病毒(Hepatitis E virus,HEV)抗原双抗体夹心ELISA定量检测方法,用于HE疫苗中HEV抗原含量的检测。方法以重组HEV病毒样颗粒作为免疫原,免疫母鸡,制备抗HEV-IgY多克隆抗体,纯化后作为包被抗体,HRP标记的抗HEV单克隆抗体作为检测抗体,建立HEV抗原双抗体夹心ELISA定量检测方法,并对其进行验证。用建立的方法检测3批HE疫苗成品的HEV抗原含量,计算HEV抗原对氢氧化铝的吸附率。结果建立的ELISA方法线性范围为2～128 ng/ml,最低定量限为2 ng/ml;该方法检测冻干甲肝减毒活疫苗、重组人白介素-2(IL-2)、乙型肝炎表面抗原(HBsAg)、人血白蛋白、小牛血清及健康人血清均无交叉反应;该方法检测3个浓度的HEV抗原内部参考品的回收率在95.13%～104.50%之间,试验内及试验间变异系数均<15%;包被抗HEV-IgY的酶标板于37℃放置5 d,其检测HEV抗原内部参考品的A450值及敏感性均未发生显著变化;3批HE疫苗成品中HEV抗原对氢氧化铝的吸附率均大于95%,符合相关质控要求。结论已成功建立了HEV抗原双抗体夹心ELISA定量检测方法,可用于HEV抗原含量的检测。; 陈子杨吴业红张健锋常军亮时成波贾媛郭立君李春晖; 关键词：肝炎病毒戊型病毒样颗粒 IGY 酶联免疫吸附测定

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