广西大学动物科学技术学院动物繁殖研究所
- 作品数：394 被引量：1,136H指数：14
- 相关作者：谭世俭阳年生王献伟陈玉陈东峰更多>>
- 相关机构：吉林大学畜牧兽医学院广西医科大学第三附属医院云南农业大学动物科学技术学院更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划国家自然科学基金广西壮族自治区科技攻关计划更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生轻工技术与工程更多>>
- 食蟹猴阴茎电刺激采精及精液特征的初步研究被引量：12
- 2004年
- 采用阴茎电刺激采精法对食蟹猴进行采精,电刺激参数设为电压从32～56V,频率25～30Hz范围调整,波宽固定为10ms,电刺激时间1～10s,在非麻醉情况下成功采精,采精量为(0.20±0.16)mL。在采精过程中没有发现阴茎损伤。对食蟹猴精液特征进行研究,结果发现精子的活力为(88.37±9.33)%,精子密度为(2169.79±1922.38)×106个/mL。扫描电子显微镜观察,精子的形态特点是头部的长径比较短而显两端较钝圆的卵圆形,长(6.58±0.28)μm,宽(4.12±0.20)μm;尾部中段长(13.47±0.36)μm,主段和末段长(67.08±1.52)μm。平均死活精子率9.1%,平均精子畸形率为13.1%,平均精子顶体异常率为3.3%。
- 黎宗强卢克焕谢莉萍卢晟盛陈敏黄剑锋梁锦宁
- 关键词：食蟹猴电刺激采精
- 广西本地猪体外受精研究初步被引量：6
- 2000年
- 文国艺
- 关键词：本地猪体外受精
- 哺乳动物腔前卵泡的研究进展被引量：8
- 2004年
- 潘红平石德顺冯贵雪梁明振蒙超衡黎宗强文国艺
- 关键词：哺乳动物腔前卵泡添加物
- 细胞松弛素B(CB)对水牛卵母细胞玻璃化冷冻保存的影响被引量：7
- 2008年
- 研究主要探讨冷冻前细胞松弛素B(CB)预处理水牛MⅡ期卵母细胞对其冷冻效果的影响。以水牛MⅡ期的卵母细胞为材料,通过玻璃毛细管(GMP)和玻璃化冷冻液EDS33(16.5%EG+16.5%DMSO+Sucrose)对水牛MⅡ期的卵母细胞进行两步法玻璃化冷冻保存,即卵母细胞首先放入预平衡液(7.5%EG+7.5%DMSO+Sucrose)中平衡3 min,然后再移入玻璃化冷冻液中30 s后装管直接投入液氮。冷冻前卵母细胞随机分为2组,一组用7.5μg/mL CB预处理30 min,另一组未用CB预处理作对照组,然后都冷冻保存。解冻是在蔗糖浓度逐渐降低的解冻液中进行的。解冻后存活的卵母细胞进行孤雌激活,以分裂率和囊胚发育率作为评定卵母细胞冷冻效果的指标。结果发现,GMP组和GMP+CB组卵母细胞解冻后的存活率(88.89%、94.20%)和培养后发育到囊胚的比率(8.82%、14.55%)差异均不显著(P>0.05),但GMP组和GMP+CB组存活卵母细胞激活后的分裂率差异显著(32.69%、55.56%,P<0.05),所以细胞松弛素B预处理可以提高GMP冷冻卵母细胞的发育能力。
- 卞桂华陈自洪杨娟陆凤花石德顺
- 关键词：卵母细胞囊胚玻璃化冷冻
- 供体核种类对水牛核移植效果的影响被引量：20
- 2004年
- 采用电融合法和直接注射法进行核移植,以比较不同来源和不同类型水牛供体细胞的核移植效果。当用电融合法进行核移植时,成体耳部成纤维细胞的融合率(46.0%)、卵裂率(53.9%)和囊胚发育率(10.9%),均显著低于胎儿成纤维细胞(64.5%,70.1%和21.6%)、胎儿皮肤细胞(71.5%,70.8%和22.1%)以及卵巢颗粒细胞(88.2%,79.1%和25.5%);后三种细胞间的卵裂率和囊胚发育率无显著差异,但卵巢颗粒细胞的融合率显著高于胎儿成纤维细胞和胎儿皮肤细胞(P<0.05)。当用直接注射法进行核移植时,胎儿皮肤细胞注核后的存活率(78.2%)、卵裂率(41.6%)均显著低于成体耳部成纤维细胞(88.6%和57.4%)和胎儿成纤维细胞(85.8%和65.0%)。胎儿成纤维细胞注核后的卵裂率和囊胚发育率(23.3%)均显著高于胎儿皮肤细胞(10.1%)和成体耳部成纤维细胞(12.0%)。结果表明:(1)采用直接注核法进行核移植时,胎儿成纤维细胞作为核供体较为合适,而采用电融合法进行核移植时,用颗粒细胞作核供体更为适宜;(2)胎儿成纤维细胞的核移植效果好于成体成纤维细胞。
- 杨素芳石德顺韩杰韦英明韦精卫陆凤花牛向丽
- 关键词：水牛卵母细胞核移植卵巢颗粒细胞胎儿成纤维细胞
- BRL饲细胞及血清浓度对体外小鼠精原干细胞的影响被引量：2
- 2004年
- 分别以大鼠肝细胞(BRL)或小鼠胚胎成纤维细胞(STO)为饲养层,采用含5%、10%及20%胎牛血清的培养液,培养6日龄小鼠生精上皮细胞,研究饲养层和血清浓度对精原干细胞生物学行为的影响。结果表明:在培养的第1周内,2个及4个连成串的精原细胞合胞体数量明显增加,同时大多数精原细胞逐渐退化。培养1周后,大多数精原细胞经短暂的存活及分裂活动后退化消失,培养体系中仅保留下少量单个及由细胞间桥相连的双个及4个成串或成团的A型精原细胞。这些细胞在随后的培养过程中,不表现明显的分裂活动,呈圆球形,表达碱性磷酸酶。不同条件培养体系中的精原细胞及精原干细胞的生物学行为无明显不同,培养20～30d时均有少量精原干细胞存活。这说明BRL细胞能用作饲养层促进精原干细胞存活,但对其更新性增殖没有明显作用;培养液中高浓度胎牛血清对精原干细胞存活和增殖无明显影响,但能促进睾丸体细胞增殖。
- 李莲军卢晟盛黎宗强杨小淦韦英明卢克焕
- 关键词：精原干细胞胎牛血清体外培养
- 不同方法提取猪和牛卵母细胞和早期胚胎total RNA的比较被引量：1
- 2010年
- 研究以猪和牛GV期的卵母细胞和8细胞期胚胎作为研究对象,分别用QIAGENRNeasy Micro Kit、无根RNAPrep Micro kit和华舜快速RNA(微量)提取试剂盒提取其中的totalRNA,通过对total RNA的浓度和纯度的分析比较,找出较适宜的提取方法。结果显示,QIA-GEN RNeasy Micro Kit能更有效地从少量猪和牛卵母细胞和早期胚胎中提取高质量的totalRNA。
- 易康乐陈华海谢体三李纯锦李志才燕海峰石德顺周虚
- 关键词：卵母细胞早期胚胎总RNA
- 水牛体细胞核移植方法的研究被引量：6
- 2005年
- 探讨电融合参数对水牛体细胞核移植效果的影响.体外成熟培养22～24 h的水牛卵母细胞,在含有5 μg/mL细胞松弛素的操作液中进行去核,然后将经0.1 mg/L Aphidicolin (APD)处理1 d, 再用0.5% FBS培养2～9 d的水牛耳皮成纤维细胞或颗粒细胞注射到去核的卵母细胞卵周隙中,再经电融合形成重构胚.重构胚经5 μmol/L离子霉素激活处理5 min并在2 mmol/L的6-DMAP中培养3 h后,在含有颗粒细胞单层细胞的微滴中(30 μL)培养7～9 d,观察其卵裂和胚胎发育情况.当电融合的电场强度为1 500 V·μs/mm(电压100 V/mm×脉时15 μs)时,电脉冲3次,颗粒细胞核移植的融合率为74.18%,分裂率为71.82%,囊胚发育率为10%,融合率显著高于2次电脉冲(52.03%,P<0.05),卵裂率显著高于4次电脉冲(53.95%,P<0.05);当电脉冲次数为3次时,电场强度为2 000 V·μs/mm的分裂率(53.54%)显著低于1 500 V·μs/mm,2 500 V·μs/mm的融合率(62.0%)和分裂率(53.23%)均显著低于1 500 V·μs/mm(P<0.05).采用耳皮成纤维细胞作供核的融合率(59.75%)和分裂率(57.45%)均显著低于颗粒细胞.染色体组型分析显示,66.7%的核移植胚胎具有正常的供体细胞二倍体核型.将来自1头22岁的摩拉公牛耳皮成纤维细胞的2枚冻胚移植给受体母牛,妊娠到215 d时发生流产.结果表明,高龄水牛的体细胞核移植胚胎能发育到妊娠晚期;水牛体细胞核移植的适宜电融合参数为100 V/mm,15μs,3次电脉冲;颗粒细胞的电融合核移植效果优于耳皮成纤维细胞.
- 陆凤花石德顺韦英明潘红平
- 关键词：颗粒细胞电脉冲水牛体细胞核移植电融合
- 哺乳动物雄性生殖系及其来源的干细胞系被引量：1
- 2006年
- 李莲军曹伍捌卢克焕
- 关键词：干细胞系哺乳动物生殖系雄性生殖细胞遗传信息
- 水牛腔前卵泡的分离方法被引量：10
- 2004年
- 为确定水牛腔前卵泡的有效分离方法 ,作者取用来自屠宰场 31头水牛的 6 1个卵巢 ,先用剪刀去掉髓质部 ,然后分别用梳刮法、剪碎法和显微分离法分离回收腔前卵泡。结果发现 ,使用梳刮法时 ,平均每个水牛卵巢回收所得的腔前卵泡数 (15 2 35± 4 4 81)明显高于剪碎法 (32 6 2± 14 81)和显微分离法 (8 95± 3 4 4 ) ,且其平均每个卵巢的处理时间 (39 0 5± 4 2 7min)明显少于剪碎法 (4 6 4 3± 4 15min)和显微分离法 (4 4 5 5± 7 82min)。梳刮法分离所得的腔前卵泡中 ,以原始卵泡最多 (占 4 1 2 5 % ) ,其次为初级卵泡 (占 38 79% ) ,而次级卵泡最少 (仅占 19 95 % )。用梳刮法获得的腔前卵泡在体外培养 72h后 ,存活率为 5 6 38% ,与剪碎法(4 8 91% )及显微分离法 (5 9 34% )没有显著差异。用梳刮法处理 10头黄牛的 2 0个卵巢 ,平均每个卵巢可分离获得 1195 2 0± 6 85 0 0个腔前卵泡 ,明显多于水牛的 15 2 35± 4 4 81个腔前卵泡。由此可见 。
- 潘红平冯贵雪石德顺
- 关键词：水牛卵巢腔前卵泡
