四川万可泰生物技术有限责任公司
- 作品数：19 被引量：19H指数：4
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- 相关机构：四川大学湖北医药学院四川农业大学更多>>
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- 相关领域：医药卫生农业科学更多>>
- 特异性抗幽门螺杆菌卵黄抗体的制备及其抗菌作用研究
- 目的：研究幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,Hp)全菌抗原及重组Hp特异抗原IB免疫产蛋母鸡产生特异性IgY抗体(IgY-Hp、IgY-IB)的免疫程序和制备方法,测定其抑制幽门螺杆菌生长和抑制幽门螺杆...
- 祝捷杨靖周永君潘兴杨廷敏曹随忠王保宁
- 关键词：幽门螺杆菌抗菌作用
- 幽门螺杆菌双基因多表位重组原核表达工程菌的构建及其表达特性的研究被引量：3
- 2013年
- 目的构建含幽门螺杆菌尿素酶保守基因序列ureI和ureB的双基因(简称IB)多表位原核表达质粒以及原核表达工程菌,并研究其微生物学特性。方法通过生物信息学方法从ureI和ureB基因中筛选T细胞和B细胞优势表位基因序列,人工合成所选择的表位基因序列并构建原核重组表达质粒pET28a(+)/IB。经限制性内切酶(EcoR I,Xho I)鉴定及DNA测序鉴定后,将重组质粒导入大肠杆菌BL21(DE3)。该工程菌经IPTG诱导后,用SDS-PAGE检测重组蛋白(rIB)的表达情况,用Western blot检测rIB的免疫反应性。结果构建的双基因多表位基因序列与所设计的一致;工程菌经IPTG诱导后做SDS-PAGE电泳显示,在28kD左右有一条明显蛋白条带,Western blot结果显示在28kD左右出现特异反应条带。结论成功构建含ureI和ureB双基因序列的原核表达质粒pET28a(+)/IB及工程菌,该工程菌表达的重组蛋白rIB能被抗幽门螺杆菌悉尼株(H.pylori SS1)的特异抗体所识别,表明该新重组蛋白与幽门螺杆菌有高度相关性。
- 杨靖潘兴欧琴周法庭李建春祝捷周永君李明远王保宁
- 关键词：幽门螺杆菌多表位原核表达
- 两株抗幽门螺杆菌特异性卵黄抗体的制备及性能被引量：2
- 2015年
- 目的分别制备抗幽门螺杆菌(H.pylori)全菌(SS1株)和尿素酶I和尿素酶B的重组蛋白(r IB)的特异性卵黄抗体(Ig Y),纯化后研究其体外抑菌效果。方法分别以超声破碎SS1菌液和r IB为抗原免疫来杭鸡,用水稀释法和硫酸铵沉淀法纯化获得相应特异性Ig Y(SS1-Ig Y、IB-Ig Y)。将特异性Ig Y与SS1混合作用后共培养检测其抑菌效果,快速脲酶试验检测其抗尿素酶作用。结果成功制备2种特异性Ig Y:SS1-Ig Y和IB-Ig Y,效价超过1∶12 800,纯度超过80%。SS1-Ig Y和IB-Ig Y均有体外抗尿素酶活性和抑菌作用。结论 SS1-Ig Y和IB-Ig Y均具有在体外抑制H.pylori尿素酶活性和抑制H.pylori生长的作用。
- 杨廷敏杨靖王保宁潘兴李建春祝捷周永君李明远曹随忠
- 关键词：幽门螺杆菌卵黄抗体来杭鸡尿素酶
- 幽门螺杆菌BIB原核表达工程菌的构建及微生物学特性分析被引量：4
- 2013年
- 目的构建融合了幽门螺杆菌尿素膜通道蛋白(Ure I)、尿素酶B亚单位(Ure B)的表位基因及霍乱毒素B亚单位(CTB)的原核表达质粒pET28a(+)/ct B/ure I-B(简称BIB)及其原核表达工程菌,并研究其生物学特性。方法参考基因库中ure I、ure B、ct B的基因序列,合成不含信号肽的ct B基因及ure I、ure B优势表位基因,串联融合,形成多靶点重组ct B/ure I-B基因(简称BIB基因),并构建pET28a(+)/BIB原核表达质粒,经限制性内切酶Nco I、Xho I酶切以及DNA测序鉴定正确后,将重组质粒导入大肠杆菌BL21(DE3)中,构建含BIB基因的原核表达工程菌。经乳糖诱导后,SDS-PAGE电泳检测重组蛋白(rBIB),Western blot及肌注BALB/c小鼠实验检测rBIB的免疫反应性和免疫原型。结果构建的原核表达质粒pET28a(+)/BIB,经双酶切和测序分析显示,构建的BIB基因与设计序列100%一致。乳糖诱导后,SDS-PAGE电泳显示在33kD左右出现一条明显蛋白条带,Western blot检测在33kD左右出现特异反应条带,肌注免疫BALB/c小鼠产生了较高的抗体水平。结论成功构建了pET28a(+)/BIB原核表达质粒及BIB原核表达工程菌,该工程菌可表达重组蛋白rBIB,且该重组蛋白具有良好的免疫反应性及免疫原性。
- 潘兴肖继红杨靖王保宁李健春周法庭祝捷周永君李婉宜李明远
- 关键词：幽门螺杆菌URECTB
- 一种防治幽门螺杆菌的含分子内佐剂的重组基因、蛋白及生物制品
- 本发明公开了一种防治幽门螺杆菌的含分子内佐剂的重组基因、蛋白及生物制品。所述多靶点重组基因包括具有SEQIDNO:2所示氨基酸序列的多靶点融合多肽、具有SEQIDNO:1所示的核苷酸序列的编码多靶点融合多肽的多靶点重组基...
- 潘兴祝洁周永君高礼珍
- 文献传递
- 重组幽门螺杆菌多靶点疫苗工程菌高密度发酵工艺研究
- 目的：建立重组幽门螺杆菌多靶点疫苗工程菌BIB的高密度发酵工艺.方法：以摇瓶发酵结果为基础,放大工艺至50L发酵罐中,对影响目的蛋白收率的因素如发酵培养基、工作种子接种量、诱导剂浓度、诱导起始时间、诱导持续时间、诱导剂添...
- 潘兴杨靖李健春祝捷周永君王保宁
- 关键词：幽门螺杆菌疫苗工程菌高密度发酵
- 一种带靶心的医用针眼贴
- 本实用新型公开了一种带靶心的医用针眼贴，包括医用胶布、第一隔离纸、第二隔离纸和吸水垫，所述吸水垫的中部设置有靶心区域，所述吸水垫粘贴在所述医用胶布的中部，所述医用胶布的两端分别与所述第一隔离纸的一端和所述第二隔离纸的一端...
- 张勇周永君
- 文献传递
- 清幽口服液及其制备方法
- 本发明公开了一种清幽口服液及其制备方法，解决了解决现有抗幽门螺杆菌特异性IgY直接用于治疗Hp感染的效果并不是十分显著的问题。本发明包括：卵黄抗体，以及与该卵黄抗体等体积混合的硫糖铝溶液；所述硫糖铝的质量终浓度为10％～...
- 张勇王勇祝洁周永君
- 文献传递
- 幽门螺杆菌活菌的定量测定、药敏测定试剂盒及测定方法
- 本发明公开了幽门螺杆菌活菌的定量测定、药敏测定试剂盒及测定方法，该方法采用活的幽门螺杆菌作为待测样本，利用活的幽门螺杆菌能够产生尿素酶这一特性，借助幽门螺杆菌菌落计数标准方法（CFU/ml，即每ml菌液中的细菌个体数量，...
- 祝洁周永君张勇
- 文献传递
- 幽门螺杆菌多靶点疫苗工程菌BIB发酵及纯化工艺研究被引量：1
- 2014年
- 目的初步建立重组幽门螺杆菌多靶点疫苗工程菌（BIB）的高密度发酵及其蛋白纯化工艺。方法以摇瓶发酵结果为基础,放大工艺至50L发酵罐中,对影响目的蛋白收率的因素如发酵培养基、工作种子接种量、诱导剂浓度、诱导起始时间、诱导持续时间及诱导剂添加方式等进行优化验证;并利用rBIB蛋白高等电点特性（pI=9.05）,在pH 7.0-7.5的磷酸盐缓冲液中目的蛋白带正电荷,采用阳离子交换层析进行纯化,对阳离子交换层析填料及纯化缓冲液的pH进行优化。结果经高密度发酵后BIB菌体产量为70g/L,蛋白表达量为32%;rBIB蛋白经阳离子交换层析纯化后其纯度为91.8%。结论该工艺的初步建立为深入研究rBIB蛋白性质及其规模化生产奠定了基础。
- 潘兴王保宁杨靖李健春祝捷周永君王红仁李明远李婉宜
- 关键词：幽门螺杆菌疫苗高密度发酵尿素酶B亚单位
