辽宁师范大学生命科学学院海洋生物功能基因及蛋白质组学研究所
- 作品数：34 被引量：86H指数：6
- 相关作者：芦静张艳戴鹏刘慧玲乔旭更多>>
- 相关机构：大连医科大学药学院药理教研室大连医科大学药学院大连大学生物工程学院更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生农业科学更多>>
- 日本七鳃鳗(Lampetra japonica)Lyb基因的克隆与分析被引量：4
- 2008年
- 采用RT-PCR和RACE技术,从日本七鳃鳗(Lampetra japonica)口腔腺、肝脏中分离获得了3条Y-box基因序列,分别命名为Lyb1、Lyb2和Lyb3,生物信息学分析其编码的蛋白质序列长度分别为331、181和171个氨基酸残基。采用DNAMAN软件,将七鳃鳗的3个Y-box蛋白氨基酸序列蛋蛋蛋、蛋马蛋、蛋蛋、蛋蛋蛋和小鼠Y-box蛋白进行同源性分析,结果显示他们共有一个保守的冷休克结构域,其中包含两个RNA结合基序RNP-1和RNP-2,表明获得的Lyb基因属于Y-box基因家族成员。此外,从Swiss-Prot下载了经实验验证过的Y-box蛋白序列数据,结合实验克隆得到的Lyb基因所编码的氨基酸序列构建系统发育树,发现Y-box基因在有颌类出现以前只有一种类型,有颌类出现以后,Y-box基因分化成YB1、YB2和CSDA三种类型。
- 金萍张玮玮黄惠芳马飞
- 关键词：系统发育分析
- 以整合素为作用靶点的精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸模体毒素研究进展被引量：4
- 2009年
- 整合素为一类αβ异源二聚体膜蛋白,调节细胞外基质与胞内细胞骨架间的相互作用。精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸(RGD)序列为整合素的结合位点,存在于多种重要的细胞外基质蛋白中。整合素与RGD序列结合可调节多种细胞生理活动,RGD模体还存在于来自蛇毒和其他物种来源的多种毒素蛋白中,这些RGD模体毒素能够特异性抑制整合素与细胞外基质的结合,从而成为整合素的强效拮抗剂。本文对整合素的结构与功能、去整合素作为整合素拮抗剂的结构特征做一综述,并对整合素和以RGD为模体结构作为潜在药物靶点的应用加以讨论。
- 张艳王继红刘欣李庆伟
- 关键词：整合素毒素
- 日本七鳃鳗口腔腺分泌蛋白BGSP-2的序列进化分析、基因克隆及诱导表达
- 2011年
- 从实验构建的七鳃鳗口腔腺cDNA文库中获取BGSP-2(buccal gland secretion protein)基因片段,并对其进行生物信息学分析.RT-PCR扩增,已获得日本七鳃鳗口腔腺BGSP-2蛋白的全序列cDNA,将目的基因与pET23b载体连接,进一步转化至Rosetta表达菌株中,筛选阳性克隆,对包涵体进行变性、复性与纯化.结果显示已成功获得成分均一的活性蛋白.
- 李庆伟薛壮白洁于水燕吴毓刘欣
- 关键词：七鳃鳗CDNA文库
- 日本七鳃鳗(Lampetra japonica)VLRB的克隆表达及单克隆抗体制备被引量：3
- 2012年
- 七鳃鳗(Lampetra japonica)和盲鳗(Hyperotreti)作为现存的无颌类脊椎动物的代表,其适应性免疫系统中的受体分子与哺乳动物的抗原受体分子不同,这种独特的受体分子称为可变淋巴细胞受体VLRs(Variable lym-phocyte receptors)。目前VLRs分为3类,分别是VLRA、VLRB、VLRC,而VLRB由七鳃鳗类B淋巴细胞产生,是其体液免疫中主要成分,与IgM结构和功能类似。文章对日本七鳃鳗VLRB基因保守的C末端进行克隆、原核表达和重组蛋白纯化后,免疫Balb/c小鼠,通过细胞融合及间接酶联免疫吸附实验(Enzyme-linked immu-nosorbent assay,ELISA)筛选技术得到针对VLRB保守区的单克隆抗体细胞株。将杂交瘤细胞接种小鼠腹腔得到大量的单抗腹水,经Protein G亲和纯化后的单抗进行ELISA与Western blotting检测。经ELISA检测抗体效价为1:40000。Western blotting结果显示该单克隆抗体能够特异的检测重组VLRB蛋白及七鳃鳗血清中分泌型VLRB。流式细胞实验证明该单抗能特异识别七鳃鳗类淋巴细胞表面表达的膜型VLRB。VLRB单克隆抗体的成功制备和建株,为研究日本七鳃鳗基于VLR的适应性免疫系统提供了重要的工具。
- 吴芬芳马宁陈立勇苏鹏李庆伟
- 关键词：七鳃鳗单克隆抗体
- CD9与免疫细胞、免疫因子相互作用及其功能的研究被引量：1
- 2010年
- CD9是Tetraspanins家族成员之一,属于白细胞分化抗原中的一种,它参与细胞黏附、运动、激活和分化等.近年有研究表明:CD9在激活T细胞、作为B细胞分子标记物以及诱导DC和MHC分子对抗原的提呈等方面都发挥着重要的作用.值得一提的是CD9在适应性免疫系统的作用可能追溯到原始的无颌类脊椎动物.对CD9与免疫细胞以及免疫因子的相互作用进行简要综述,为进一步理解和深入研究CD9在适应性免疫系统中所扮演的角色提供参考.
- 李庆伟苏鹏刘晓忠吴芬芳刘欣
- 关键词：CD9免疫细胞免疫因子相互作用
- 抗增殖蛋白研究进展被引量：8
- 2010年
- 抗增殖蛋白作为一种高度保守的蛋白广泛分布于细菌、原虫、酵母等多种生物细胞中,主要定位于细胞膜、线粒体内膜、细胞核中,参与细胞增殖、分化、衰老、凋亡等多种生物学进程。由于抗增殖蛋白结构进化上的保守性和功能的多样性,正逐渐引起广泛的关注。该文正是基于抗增殖蛋白重要的生物学意义,通过对其基因结构和功能的分析,系统地阐述了它在生物体中发挥的重要作用,并对其应用前景作以展望。
- 陈操刘欣孙晶李庆伟
- 关键词：生物学功能
- 日本七鳃鳗Lj-RGD3缺失突变体Lj-113人工合成序列的基因克隆与蛋白表达被引量：3
- 2011年
- 目的获得突变体Lj-113的基因重组蛋白,为其与野生型活性比较打下物质基础。方法对日本七鳃鳗RGD缺失突变体Lj-113进行基因全序列人工合成,并以NdeI与HindIII为酶切位点构建于pET23b载体上,获得阳性基因重组质粒pET23b-Lj113。CaC l2法将重组质粒转化入大肠杆菌BL21表达菌中,对其进行终浓度为1 mmol/L的IPTG诱导表达,并对表达蛋白进行组氨酸亲和层析纯化蛋白。结果成功获得七鳃鳗RGD缺失突变体的基因重组蛋白的可溶性表达。结论人工合成基因序列可通过分子克隆方法获得其蛋白的表达。
- 张亚前李庆伟吕莉刘欣王继红
- 关键词：七鳃鳗缺失突变体基因克隆蛋白表达
- RGD毒素肽研究进展
- RGD毒素肽是某些有毒生物唾液腺分泌物中特有的以RGD(Arg-Gly-Asp)序列为特征性模体(motif)的小分子量蛋白.其可凭借蛋白质一级结构上特有的RGD分子序列而成为细胞外基质(ECM)与细胞整合素(integ...
- 王继红吴毓韩晓曦李庆伟
- 关键词：整合素血小板聚集血管新生
- 文献传递
- 日本七鳃鳗CD9分子的基因克隆、表达以及免疫学活性研究
- D9分子是4次跨膜蛋白超家族的成员,目前研究证明,该分子在细胞粘附和机体免疫应答中发挥着重要的作用。作为无颌类脊椎动物的代表之一,日本七鳃鳗因其独特的进化地位而受到人们关注,成为脊椎动物免疫系统起源与进化研究的新型模式生...
- 苏鹏吴芬芳刘欣李庆伟
- 可变淋巴受体起源与功能演化研究
- 本文主要利用Uniprot在线软件，根据VLRs的基本结构，在已知所有物种基因组数据库中寻找VLRs的踪迹。同时，将这些由不同物种基因组数据库中找到的，与VLRs具有相同结构的分子命名为VLRs-like分子，并且对不同...
- 韩英伦刘欣李庆伟
- 关键词：基因组数据库七鳃鳗
- 文献传递
