南京农业大学动物医学院动物医学系
- 作品数：6 被引量：58H指数：3
- 相关机构：扬州大学兽医学院动物医学系扬州大学兽医学院南京医科大学公共卫生学院流行病与卫生统计学系更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金江苏省自然科学基金江苏省医学重点人才培养基金更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生更多>>
- 肠道病毒71型VP1蛋白单克隆抗体的制备及初步鉴定
- 2013年
- 目的:制备肠道病毒71型(enterovirus 71,EV71)VP1外壳蛋白单克隆抗体。方法:利用重组纯化的EV71-VP1蛋白为抗原免疫BALB/c鼠,按常规杂交瘤技术进行细胞融合,对阳性杂交瘤细胞进行筛选及亚克隆,获得1株能稳定分泌抗EV71-VP1抗体的杂交瘤细胞株6F2B9,细胞体外扩大培养后的上清用Protein G柱纯化,超滤后用BCA法测其浓度,用免疫球蛋白亚类鉴定试剂盒鉴定单克隆抗体亚型,间接ELISA方法检测其效价和特异性,间接免疫荧光法检测其与EV71病毒的特异性结合能力。结果:本研究得到的抗EV71-VP1抗体DSE-136,纯化后浓度为1.9 g/L,免疫球蛋白亚类为IgG2b,轻链属于κ链;间接ELISA检测效价为1∶3.2×105;间接免疫荧光结果显示其可与EV71病毒特异性结合。结论:成功制备出1个效价高、特异性好的抗EV71-VP1单克隆抗体DSE-136,为VP1抗原诊断、疫苗研发及其效果评价奠定了基础。
- 包林张黎曾晓燕郭喜玲史凤娟黄明明梁淑仪汪华焦永军
- 关键词：肠道病毒71型VP1蛋白单克隆抗体
- 荣昌猪盲肠微生物消化粗纤维的体外试验研究被引量：14
- 1999年
- 将羧甲基纤维素(CMC)、稻草粉、稻草秆作底物,分别与5头空怀荣昌母猪的盲肠内容物上清液一起,进行体外液体或半流体培养,以灭菌的上清液培养作空白对照,观察荣昌猪盲肠微生物对粗纤维的消化能力.试验结果:CMC培养液中有还原糖产生,并在培养20～24h达到峰值;培养72h后,稻草粉、稻草秆液体和半流体培养,试验组干物质(DM)、酸性洗涤纤维(ADF)、纤维素(CL)消失率均高于空白对照组;半流体培养,稻草粉DM、ADF、CL净消失率和稻草秆DM净消失率都明显高于液体培养;两种培养状态下的稻草粉DM净消失率都高于稻草秆.结果表明:体外培养条件下,荣昌猪盲肠微生物有较强的消化粗纤维的能力;
- 胥清富孙镇平杨建生王金洛任明强
- 关键词：盲肠微生物荣昌猪体外试验
- 淫羊藿-蜂胶佐剂的免疫调节作用被引量：18
- 2000年
- 用微量全血 3H-Td R掺入法测定了淫羊藿 -蜂胶 (以下简称淫 -蜂 )佐剂对 4周龄和 8周龄小鼠外周血中 T淋巴细胞转化率的影响。结果 :4周龄小鼠 T淋巴细胞转化率 ,淫 -蜂佐剂 ( YF)组显著高于阴性对照( C)组、淫 -蜂 /环磷酰胺 ( YF/ Cy)组和环磷酰胺 ( Cy)组 ( P <0 .0 5) ;YF/ Cy组略低于 C组 ,但此 2组均显著高于 Cy组 ( P <0 .0 5)。对于 8周龄小鼠 ,除 YF组与 Cy组之间表现出明显差异 ( P <0 .0 5)外 ,其他各组间均无显著差异 ( P >0 .0 5)。表明 :淫 -蜂佐剂不仅能提高外周血 T淋巴细胞的转化率 ,而且可对抗环磷酰胺对 T淋巴细胞活性的抑制作用 ,使受抑制的 T淋巴细胞转化活性基本恢复正常。上述作用在幼鼠中表现尤其明显。以间接 ELISA检测了淫 -蜂佐剂对家兔血清特异性抗体水平的影响。结果 :淫 -蜂佐剂抗原组兔血清特异性抗体水平显著高于无佐剂抗原组 ,抗体高水平维持的时间也更长 ;与油佐剂组相比 ,抗体产生的时间亦更早。说明淫 -蜂佐剂作为佐剂配合抗原应用 ,能提高抗原的免疫原性 。
- 刘家国胡元亮张宝康宋大鲁
- 关键词：免疫佐剂淫羊藿蜂胶
- 狂犬病的实验室诊断被引量：1
- 2012年
- 狂犬病是由弹状病毒科、狂犬病病毒属的嗜神经病毒引起的一种世界性的人兽共患病。一旦出现症状,病死率近100%。由于该病无特征性大体病变,因而建立敏感、快速、准确的实验室诊断方法对狂犬病的防控工作至关重要。实验室诊断通常需要采集来自中枢神经的脑组织样本。通过病理组织学染色观察内基小体(Negri)是一种经典的实验室诊断方法,但是由于方法敏感性低,易受样本自溶的干扰,而已趋向于淘汰。抗原检测技术中首推的是荧光抗体试验(FAT):丙酮固定的脑组织切片在用荧光抗体染色后,可在荧光显微镜下观察是否有病毒包涵体或者病毒颗粒。此外,随着胶体金免疫层析法(GICA)在病原及小分子物质检测领域的快速发展,近年还出现了该技术用于狂犬病抗原检测的研究,且取得了较好效果。此外,小鼠颅内接种(MIT)和细胞培养分离(CIT)除了可用于狂犬病病毒培养外,还可单独作为诊断手段,或者配合FAT进行病原诊断。新鲜材料得到的单份阴性结果往往需要进行以MIT和CIT来进行再确认。此外巢式逆转录-聚合酶链式反应(NestedRT-PCR)可通过检测狂犬病病毒核酸来诊断病原,并进行分型。狂犬病的血清学试验在抗原诊断方面价值不大,多用于动物体内保护性抗体的检测。血清学试验中,荧光抗体中和试验(FAVN)及快速荧光抑制灶试验(RFFIT)是国际贸易规定的病毒中和试验。酶联免疫吸附试验(ELISA)也是一种快速、灵敏的血清学抗体检测方法,且如今已有包被狂犬病病毒G蛋白的间接ELISA试剂盒销售。
- 姚真蓝黄国庆
- 关键词：狂犬病组织病理学血清学诊断抗原检测
- 狂犬病的实验室诊断
- 2013年
- 狂犬病是由弹状病毒科、狂犬病病毒属的嗜神经病毒引起的一种世界性的人兽共患病。一旦出现症状，病死率近100％。由于该病无特征性大体病变，因而建立敏感、快速、准确的实验室诊断方法对狂犬病的防控工作至关重要。实验室诊断通常需要采集来自中枢神经的脑组织样本。通过病理组织学染色观察内基小体（Negri）是一种经典的实验室诊断方法，但是由于方法敏感性低，易受样本自溶的干扰，而已趋向于淘汰。抗原检测技术中首推的是荧光抗体试验（FAT）：丙酮固定的脑组织切片在用荧光抗体染色后，可在荧光显微镜下观察是否有病毒包涵体或者病毒颗粒。
- 姚真蓝
- 关键词：狂犬病病毒荧光抗体试验弹状病毒中枢神经人兽共患病
- PCR方法鉴别肉骨粉中的动物成份种类被引量：25
- 2004年
- 为防范疯牛病传入我国,有必要鉴别肉骨粉中动物成份的种类。针对牛、羊、猪和鸡四种动物的特异性核苷酸序列,分别选用和设计了四对特异性引物,用试剂盒提取四种动物的肉骨粉或者处理过的肉组织中的DNA,然后进行PCR扩增,所扩增的目的片断大小分别为271bp、199bp、196bp、148bp,运用PCR技术建立了鉴定这四种动物源性成分的方法。结果分别扩增出四种动物的特异性条带,证明该PCR方法具有很高的特异性和敏感性,而且成本低廉,简便易行,因此可以作为鉴别肉骨粉种类的常规方法。
- 李林徐江涛张永强王志亮
- 关键词：PCR方法肉骨粉牛海绵状脑病人畜共患病
