南方医科大学基础医学院基因工程研究所
- 作品数：360 被引量：1,068H指数：14
- 相关作者：郑文岭宋艳斌彭翼飞冯春琼丁大鹏更多>>
- 相关机构：上海大学生命科学学院上海大学生命科学学院生物电子学研究所暨南大学医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金广东省自然科学基金广东省医学科学技术研究基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学自动化与计算机技术文化科学更多>>
- 采用哺乳动物细胞表面展示技术构建全长人源抗肾癌抗体基因库被引量：8
- 2010年
- 目的采用哺乳动物细胞表面展示技术构建全长人源抗肾癌抗体基因库。方法分离肾癌患者的外周血淋巴细胞(PBMC),提取PBMC的总RNA,采用RT-PCR的方法扩增抗体全长Kappa型轻链(LCκ)和重链可变区(VH)基因,分别插入载体pDGB-HC-TM,电击转化感受态大肠杆菌TOPO10,构建轻、重链抗体基因库,然后将轻、重链抗体基因库联合转染293T细胞,流式细胞仪分析全长人源抗体在293T细胞表面的表达。结果成功构建IgG1-Kappa型抗肾癌抗体基因库,随机挑选的克隆经DNA序列分析显示轻、重链库的序列正确性达90%(9/10)和80%(8/10),流式细胞仪分析显示来自轻、重链库的上述克隆各有7个可检测到相应基因在293T细胞表面的表达,可表达抗体库库容量高达7.5×1010。结论 IgG1-Kappa型抗肾癌抗体基因库转染293T细胞后能够在细胞表面表达全长人源抗体,抗体的多样性为下一步筛选特异性抗体奠定良好的基础。
- 陈振瑞李长征贺微周烨张哲欢刘叔文谭万龙周辰
- 关键词：肾癌流式细胞仪
- 环介导等温扩增技术及其在病原微生物检测中的应用被引量：3
- 2013年
- 环介导等温扩增(LAMP)技术是近年发展起来的一项新的快速核酸恒温扩增技术,具有高效、快速、特异、易检测、易操作等特点,自面世以来被科学家认为是能替代常规PCR的一项扩增技术,非常适用于现场检测和基层检测。本文就LAMP技术的原理、特点、进展及其在病原微生物检测中的应用进行了简要的概述。
- 肖维威周琳华郑文岭马文丽
- 关键词：环介导等温扩增病原体
- 柴胡皂苷a对体外培养大鼠海马星形胶质细胞激活的抑制作用
- 目的:研究柴胡皂苷a(saikosapmlin a,SSa)对体外培养大鼠海马星形胶质细胞激活的干预作用,为癫痫的中医药防治提供实验依据。方法:首先分离剥取SD大鼠(1～3d)大脑海马,体外培养海马星形胶质细胞,经纯化鉴...
- 谢炜林佳张作文周烨鲍勇
- 关键词：癫痫海马星形胶质细胞谷氨酸柴胡皂苷A
- 文献传递
- 阿尔茨海默病相关基因的生物信息学分析被引量：3
- 2012年
- 目的通过生物信息学方法探讨阿尔茨海默病的发病相关基因，为阿尔茨海默病的基础研究和临床治疗提供新思路。方法从基因芯片公共数据库GEO中下载阿尔茨海默病相关基因芯片数据，利用String、KEGG、Panther等在线分析软件对差异表达基因进行生物信息学分析。结果在34个差异表达基因所编码的蛋白中，有25个蛋白与其他蛋白存在相互作用关系；相互作用过程中涉及多种生物学通路，与多个生物学过程和分子功能相关。结论阿尔茨海默病是多种基因相互作用的结果，其中与钙离子信号相关基因关系较为密切。
- 李长征王慧吕蔚然周烨
- 关键词：阿尔茨海默病基因芯片生物信息学
- 研究型教学法在生物化学教学中的应用被引量：8
- 2010年
- 研究型教学是培养创造性人才的有效教学模式。结合南方医科大学生物化学课程教学改革实践及自身体会,对如何开展研究型教学、其重要性以及当前所存在的问题进行探讨。
- 周珏宇马文丽李凌
- 关键词：生物化学教学改革研究型教学
- PinX1基因真核表达载体的构建及其对乳腺癌MCF-7细胞增殖的抑制作用
- 2013年
- 探讨了PinX1基因在乳腺癌MCF-7细胞生长和细胞周期中的作用,初步探讨了该基因用于乳腺癌临床治疗的可行性.采用RT-PCR技术从293-T细胞中扩增PinX 1基因,将其克隆入真核表达载体pEGFP-C1中,再将重组质粒转染MCF-7细胞.通过real-time PCR检测PinX1基因的mRNA表达,用MTT法检测转染前后细胞生长曲线的变化,用流式细胞仪检测转染目的基因后细胞生长周期的改变.检测结果表明,PinX1基因已经在转染后MCF-7细胞的细胞核内稳定表达,乳腺癌细胞生长明显减缓(P<0.05),增殖变慢(P<0.05),细胞生长阻滞于G0/G1期,说明PinX1基因可抑制乳腺癌MCF-7细胞的生长和增殖.
- 胡宗梁桑华马文丽郑文岭
- 关键词：乳腺癌细胞增殖
- 蛋白质多肽文库构建中限制性显示技术的接头设计
- 2005年
- 为了探讨限制性显示(RD)技术在构建蛋白质多肽文库中灵活的接头设计,分别根据原核表达载体pET22b以及酵母表达载体pNMT-TOPO设计了三套接头,三套接头依次增加一个碱基以保证与之连接的片段总有可能表达正确的开放阅读框.然后以HIV-1B亚型代表株U26942全基因质粒DNA为对象,利用RD技术分别建立了相应的蛋白质多肽文库.从每个库中各随机挑选12个克隆进行测序分析并进行蛋白质表达预测.结果从原核表达文库中获得了一个可以表达HIVPol多肽的克隆,SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)结果显示该克隆在细菌BL21(DE3)中有较高的表达,蛋白质印迹为阳性,与理论预测相符.这些结果提示,RD技术是一种建立基因组随机多肽文库的新方法,该方法灵活的接头设计可以满足不同的表达载体需求.
- 马文丽刘佳李凌张宝师永霞郑文岭
- 柴胡皂苷α对实验性癫痫大鼠模型的干预作用被引量：21
- 2007年
- 目的研究柴胡皂苷α对实验性癫痫大鼠痫性发作的影响。方法采用戊四氮诱导大鼠急性痫性发作来制作癫痫模型,通过记录大鼠痫性发作的潜伏期和强直性惊厥发生率的变化,研究柴胡皂苷a对戊四氮致痫大鼠的抗癫痫作用。结果柴胡皂苷α可显著性延长戊四氮诱发的大鼠痫性发作的潜伏期(P<0.01),降低大鼠强直性惊厥发生率(P<0.05)。结论柴胡皂苷α具有抑制戊四氮致痫大鼠痫性发作的作用。
- 李长征谢炜鲍勇周烨
- 关键词：癫痫戊四氮
- 基于IgG检测为模型的玻璃介质定量蛋白质芯片的研制及评价
- 2008年
- 为研制高通量定量检测的蛋白质芯片,以人血清IgG为研究模型,选择戊二醛基修饰的玻片为载体,蛋白质样品溶解于20%甘油的PBS,由机械手将浓度为0.5g/L人IgG单克隆抗体点样在玻片上,人血清白蛋白为阴性对照,以1%的BSA为封闭液对蛋白质芯片进行封闭,并经相应处理,构建用于定量检测人血清IgG蛋白质芯片.先以不同浓度IgG标准品为待测样品,建立蛋白质芯片方法和ELISA方法的标准曲线,两条标准曲线的R2值分别为0.996和0.994(P<0.01).两种方法的检测人IgG结果有很好的相关性(R2=0.9937,P<0.01),其敏感性均在15.625μg/L.用两种方法分别检测10例人血清IgG,结果显示两种方法的检测的IgG浓度有很好的一致性,以玻片为载体的蛋白质芯片可用于微量生物样品的定量检测.
- 费嘉马文丽吴清华郑文岭
- 关键词：蛋白质芯片免疫球蛋白G酶联免疫吸附试验
- miR-30a表达载体构建、病毒包装和表达活性的检测被引量：1
- 2014年
- 目的构建携带miR-30a的慢病毒表达载体，为研究miR-30a在慢性粒细胞白血病中的作用机制及对伊马替尼耐药性的影响奠定基础。方法提取人骨髓细胞基因组DNA，扩增miR．30a的前体序列，克隆到plVTHM慢病毒表达载体上，测序鉴定。重组载体进行病毒包装，感染K562细胞，测定病毒滴度。感染的K562细胞用流式细胞仪分选带有绿色荧光的GFP阳性的细胞，对分选的细胞用实时荧光定量PCR法检测miR-30a在细胞内的表达水平。最后用CCK-8法检测各组细胞的增殖情况。结果重组慢病毒表达载体测序完全正确；病毒滴度检测为6×106TU／mL；选用160μL 病毒液／1mL培养基感染K562细胞；感染的K562细胞中miR-30a的表达水平显著增强（P〈0．05）；过表达miR-30a后K562细胞增殖水平显著下降（P〈0．05）。结论成功构建了miR-30a慢病毒表达载体，并可在K562细胞中稳定表达，且miR-30a有抑制K562细胞增殖的作用。
- 刘玥帅春尹虹宋艳斌马文丽
- 关键词：慢病毒表达载体
