北京中医药大学基础医学院中医药抗病毒教育部重点实验室
- 作品数：41 被引量：394H指数：13
- 相关作者：范新生祈广见景珊更多>>
- 相关机构：宁夏医科大学基础医学院宁夏医科大学高等卫生职业技术学院海南医学院药学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划国家教育部博士点基金更多>>
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- 清热解毒中药对流感病毒感染细胞NF-κB转录活性及TNF-α mRNA水平的影响被引量：4
- 2009年
- 目的观察清热解毒中药毒热平、痰热清注射液对流感病毒亚甲型鼠肺适应株(FM1)感染人胚肾上皮细胞株HEK-293T细胞中报告基因NF-κB相对转录活性以及靶基因肿瘤坏死因子(TNF-α)mRNA的影响,探讨清热解毒中药抗流感病毒FM1的作用机制。方法采用四唑盐(MTT)比色法体外检测毒热平、痰热清及利巴韦林注射液对HEK-293T细胞增殖的影响。FM1感染HEK-293T细胞后,利用双荧光素酶顺式报告系统,以利巴韦林对照,检测不同药物组中报告基因NF-κB-Luc相对荧光素酶活性;RT-PCR方法检测各组细胞中TNF-αmRNA水平。结果MTT结果显示,毒热平、痰热清、利巴韦林各药物组不影响细胞正常增殖(P>0.05)。报告基因结果显示,与细胞对照组相比,流感病毒FM1组细胞NF-κB转录活性显著增高(P<0.01),与FM1病毒组相比,毒热平1、10、100 mg/L,痰热清1/300、1/200、1/100倍稀释药液,利巴韦林50 mg/L均可不同程度下调NF-κB的转录活性(P<0.01)。RT-PCR结果显示,与细胞对照组比较,FM1病毒组的TNF-αmRNA表达明显增高(P<0.05),各药物组与FM1病毒组相比,TNF-αmRNA表达量明显降低(P<0.01)。结论毒热平、痰热清治疗流感病毒的作用机制之一,可能是通过下调转录因子NF-κB的转录活性,从而影响下游靶基因TNF-α的表达,减少肺损伤和相应炎症反应。
- 牛旭艳顾立刚张春晶王甫
- 关键词：清热解毒中药转录因子NF-ΚB
- 毒热平注射液抗甲型流感病毒的作用研究被引量：11
- 2007年
- 目的观察毒热平注射液体内、外抗病毒作用。方法采用结晶紫染色法观察毒热平注射液不同加药方式对流感病毒亚甲型鼠肺适应株(FM1)的体外抑制作用及其时效关系;观察毒热平注射液对小鼠流感病毒性肺炎的抑制作用。结果毒热平注射液能明显阻止病毒吸附于细胞,并抑制细胞内病毒的复制增殖,在浓度≥0.18 g/L时有直接杀病毒作用。抗病毒效率在48 h达高峰,且随时间延长在浓度≥0.27 g/L时基本不变,而在低浓度时有下降趋势。毒热平注射液对小鼠流感病毒性肺炎有抑制作用。结论毒热平注射液具有明显的体外和体内抗流感病毒作用。
- 张艳丽顾立刚范新生李澎涛
- 关键词：毒热平注射液流感病毒抗病毒体外
- 毒热平注射液对流感病毒感染的巨噬细胞分泌NO的影响被引量：2
- 2010年
- 目的:研究毒热平注射液对流感病毒感染的小鼠腹腔巨噬细胞株Ana-1细胞分泌NO的影响。方法:用100TCID50流感病毒亚甲型鼠肺适应株A/FM/1/47(H1N1)感染小鼠腹腔巨噬细胞株Ana-1后换用6个不同浓度的含药维持液继续培养,分别于6、12、24和36小时收集细胞上清液,用Griess试剂法检测其释放NO的水平。同时提取1μg/ml药物组作用24小时后的细胞mRNA和核蛋白,利用RealTimePCR法和Westernblot技术,检测毒热平注射液对病毒感染前后巨噬细胞NF-κBp65mRNA及其蛋白表达水平的影响。结果:在药物作用的不同时间,60、30和10μg/ml各剂量组均能显著下调病毒感染巨噬细胞NO的分泌水平,且具有剂量依赖性;该药可明显下调病毒感染巨噬细胞NF-κBp65mRNA及其蛋白表达水平。结论:毒热平可通过下调细胞核因子-κB活性,抑制病毒感染巨噬细胞NO的分泌,发挥抗病毒感染作用。
- 张艳丽王宁萍顾立刚李澎涛
- 关键词：流感病毒巨噬细胞NF-ΚBNO
- 流感病毒FM1感染对小鼠肺损伤的作用机制及毒热平注射液的干预作用
- 目的：观察毒热平注射液对流感病毒FM1感染小鼠肺指数、肺匀浆中细胞因子TNF-α、IL-8、ICAM-1含量及mRNA转录水平的影响，探讨FM1感染对小鼠肺组织损伤的作用机制，以及毒热平注射液对FM1感染小鼠免疫功能的干...
- 顾立刚周芸景珊牛旭艳王甫张春晶
- 关键词：流感病毒FM1肺组织损伤毒热平注射液粘附分子
- 文献传递
- 黄芩苷对流感病毒FM1肺炎小鼠肺损伤的保护研究被引量：31
- 2011年
- 目的:研究黄芩苷对流感病毒FM1感染小鼠肺组织NO及氧化损伤的保护作用。方法:将96只ICR鼠随机分为正常对照组、模型组、利巴韦林组(100mg.kg-1.d-1),黄芩苷大剂量组(1 500mg.kg-1.d-1),黄芩苷中剂量组(750mg.kg-1.d-1)和黄芩苷小剂量组(375mg.kg-1.d-1),每组16只。用流感病毒亚甲型鼠肺适应株A/FM/1/47(H1N1)感染小鼠,建立小鼠流感病毒性肺炎的生物模型,用不同剂量黄芩苷溶液灌胃治疗后,观察小鼠肺指数、肺组织H-E染色切片病理形态变化,比色法检测肺组织匀浆总NO合成酶(NOS)、丙二醛(MDA)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)含量或活性。结果:黄芩苷中、小剂量组均能明显降低肺指数,减轻肺组织病变;显著下调肺匀浆总NO合成酶、丙二醛及上调谷胱甘肽过氧化物酶含量或活性(P<0.05,P<0.01)。结论:黄芩苷可通过抑制流感病毒性肺炎小鼠肺组织NO及过氧化物水平而发挥保护作用。
- 万巧凤顾立刚殷胜骏祈广见张舒李根茂葛东宇
- 关键词：黄芩苷流感病毒肺损伤NO合成酶谷胱甘肽过氧化物酶
- 毒热平注射液体外抗甲型流感病毒的作用研究被引量：4
- 2008年
- 目的:观察毒热平注射液体外抗流感病毒的作用。方法:采用结晶紫染色法测定毒热平注射液不同加药方式对流感病毒亚甲型鼠肺适应株(FM1)的体外抑制作用及其作用24、36、48、72h的抗病毒效率。结果:毒热平注射液能明显阻止病毒吸附于细胞,并抑制细胞内病毒的复制增殖,在高浓度(≥0.18mg/mL)时有直接杀病毒作用。抗病毒效率在48h达高峰,且随时间延长在高浓度(≥0.27mg/mL)时基本不变,而在低浓度时有下降趋势。结论:毒热平注射液具有明显的体外抗流感病毒作用。
- 张艳丽顾立刚曾郁敏李澎涛
- 关键词：流感病毒抗病毒体外
- 犀角地黄汤合银翘散含药血清抑制流感病毒感染大鼠肺泡巨噬细胞致炎物质的研究被引量：13
- 2010年
- 目的:研究犀角地黄汤合银翘散含药血清对甲型流感病毒鼠肺适应株(FM1)感染大鼠肺泡巨噬细胞(NR8383)后产生的致炎物质的影响。方法:运用中药血清药理学的方法制备等效剂量(13.8g/kg)的大鼠犀角地黄汤合银翘散含药血清。FM1感染NR8383细胞1h后,加入15%的犀角地黄汤合银翘散含药血清,同时设正常细胞和病毒对照组。药物作用后6、12、24h,ELISA检测细胞上清中炎症细胞因子TNF-α、MCP-1的含量,放免法检测细胞上清中炎性介质PGE2、PLA2、LTB4的含量;药物作用后8、24、36、48h,生化法检测细胞内自由基NO、iNOS含量;药物作用后24h,RealtimePCR检测细胞内TNF-α、MCP-1的mRNA水平。结果:犀角地黄汤合银翘散含药血清抑制了FM1感染NR8383细胞后TNF-α、MCP-1的转录和表达(P<0.05),抑制了NO、iNOS的产生(P<0.05),降低了PGE2、PLA2、LTB4、MDA的含量(P<0.05)。结论:犀角地黄汤合银翘散含药血清明显抑制了流感病毒感染后肺泡巨噬细胞内炎性细胞因子、炎性介质及自由基的产生,具有抗炎作用。
- 吴莹金叶智孟建吴珺于雪飞郝钰
- 关键词：含药血清流感病毒肺泡巨噬细胞
- 毒热平注射液对流感病毒性肺炎小鼠肺组织MMP-9及TIMP-1含量的影响被引量：5
- 2011年
- 目的观察毒热平注射液对流感病毒性肺炎小鼠肺组织中基质金属蛋白酶9(matrix metallopro-teinase-9,MMP-9)及基质金属蛋白酶抑制物1(tissue inhibitor of matrix metalloproteinase-1,TIMP-1)的影响。方法 66只ICR小鼠随机分为正常组、模型组、毒热平低剂量组(0.435mg/d)、中剂量组(0.870mg/d)、高剂量组(1.740mg/d)和利巴韦林对照组(对照组,2.500mg/d),每组11只。以经鼻吸入流感病毒亚洲甲型鼠肺适应株(FM1)复制小鼠流感病毒性肺炎模型。感染后当日开始腹腔注射给药,0.3mL/次,1次/天。5天后处死小鼠,计算肺指数;制作切片,光镜观察肺组织病理形态变化;采用ELISA双抗体夹心法测定肺组织匀浆液中MMP-9及TIMP-1含量。结果与正常组比较,模型组小鼠肺组织出现明显炎性病变,其肺指数、肺组织MMP-9及MMP-9/TIMP-1显著升高(P<0.01),而TIMP-1含量变化不明显(P>0.05);与模型组比较,毒热平低、中剂量组和对照组MMP-9降低(P<0.01),各剂量组和对照组TIMP-1升高(P<0.01),MMP-9/TIMP-1降低(P<0.01)。结论毒热平注射液可通过降低流感病毒性肺炎小鼠肺组织中MMP-9含量,提高TIMP-1含量,调节两者比值,从而减轻肺组织炎性损伤。
- 祁广见顾立刚彭桂英殷胜骏范新生
- 关键词：毒热平注射液基质金属蛋白酶抑制物
- 黄芩苷在流感病毒致肺纤维化早期进展中的作用机制被引量：15
- 2013年
- 目的探索黄芩苷在流感病毒感染致肺纤维化早期进展中的分子机制。方法制备甲型流感病毒性肺炎小鼠模型,用不同剂量黄芩苷溶液灌胃治疗后,观察肺指数、肺组织切片Masson染色观察纤维化程度;采用RT-PCR测定肺组织p38MARK mRNA表达,采用Western-blot测定肺组织磷酸化p38MAPK,磷酸化NF-κB-p65及TGF-β1蛋白表达。结果黄芩苷187.5、375 mg·kg-1剂量均能明显抑制肺指数及肺组织纤维蛋白的分泌;明显降低肺组织p38MAPK mRNA和蛋白表达(P<0.01);明显抑制磷酸化NF-κB-p65及TGF-β1蛋白表达(P<0.05)。结论黄芩苷抗流感病毒感染作用可能与其在肺炎致肺纤维化早期抑制纤维蛋白形成相关。
- 万巧凤顾立刚李根茂葛东宇
- 关键词：黄芩苷甲型流感病毒纤维化TGF-Β1
- 毒热平注射液对流感病毒FM1感染小鼠免疫功能的影响被引量：3
- 2009年
- 目的研究毒热平注射液对流感病毒FM1感染性肺炎小鼠肺指数、白细胞介素4(IL-4)、干扰素-γ(IFN-γ)基因转录水平、CD40L蛋白表达水平的影响,探讨其抗病毒的作用机制。方法以ICR小鼠(SPF级)作为研究对象。实验分为7组:毒热平注射液大、中、小剂量组及双黄连组、利巴韦林组、FM1感染模型组、正常组。流感病毒FM1感染小鼠造模连续7d后摘取肺组织,计算肺指数,采用RT-PCR法测定肺组织中INF-γmRNA、IL-4mRNA基因转录水平,采用Westernblot法检测肺组织中CD40L蛋白表达水平。结果FM1感染模型组的肺指数明显高于正常组(P<0.001),利巴韦林组、双黄连组及毒热平注射液大、中、小剂量组与FM1感染模型组比较,肺指数均明显降低(P<0.001或P<0.01),其中以毒热平中剂量组最好。毒热平注射液能降低FM1感染小鼠肺组织中IL-4mRNA基因转录(P<0.001),且与浓度成反向关系,但毒热平注射液组的IL-4mRNA基因转录水平明显高于利巴韦林组(P<0.001);毒热平注射液能增强FM1感染小鼠肺组织中IFN-γmRNA基因转录(P<0.001),且与浓度呈正向相关性,毒热平注射液大、中剂量组与利巴韦林组比较无统计学意义(P>0.05)。毒热平注射液能抑制FM1感染小鼠肺组织中CD40L蛋白表达(P<0.001),抑制效果与浓度呈正相关性,但毒热平注射液中、小剂量组CD40L蛋白表达水平显著高于正常组与利巴韦林组(P<0.05)。结论毒热平注射液体内能降低流感病毒FM1感染小鼠的肺指数,增强肺组织IFN-γmRNA基因转录,抑制IL-4mRNA基因转录,抑制流感病毒FM1感染小鼠肺组织CD40L蛋白的表达。
- 景姗顾立刚周芸李澎涛
- 关键词：毒热平注射液流感病毒FM1白细胞介素4干扰素-ΓCD40L
