北京师范大学生命科学学院细胞增殖及调控生物学实验室
- 作品数：138 被引量：412H指数：10
- 相关作者：柳惠图肖雪媛丁勤学张伟曾灵芳更多>>
- 相关机构：首都医科大学附属北京友谊医院北京热带医学研究所中国科学院动物研究所北京大学人民医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划北京市自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生文化科学机械工程更多>>
- 三尖杉酯碱对L-1210细胞超微结构影响的研究
- 用0．2μg／ml三尖杉酯碱(Harringtonine, HT)处理L-1210细胞0h、2h、6h、12h、 24h,3％戊二醛预固定,3％的琼脂包埋,1％的锇酸固定系列乙醇脱水,Epon812包埋,超薄切片经醋酸铀...
- 梁素华陈力王永潮
- 文献传递
- 采用蛋白质组学技术筛选与肺腺癌转移相关的标志蛋白被引量：4
- 2007年
- 本文应用表面增强基质辅助激光解析离子化-飞行时间质谱(SELDI-TOF-MS)对一系列转移能力递增的肺腺癌细胞CL1-0,CL1-2,CL1-3 CL1--5和CL1-5F4进行蛋白质谱检测。采用H4和WCX2两种具有表面修饰的蛋白芯片筛选差异蛋白,Biomarker Wizard软件分析结果显示H4和WCX2芯片共捕获到32个差异蛋白,其中15个蛋白在细胞随着转移能力增强而逐渐表达降低,相反17个蛋白则随着细胞转移能力的增强表达逐渐升高。在上述筛选到的32个差异蛋白中有2个蛋白可被两种芯片共同捕获。上述研究结果将为揭示肺癌发生和转移的分子机理提供有价值的实验数据。
- 田甜郝佳徐安健肖雪媛何大澄
- 关键词：肺腺癌标志分子SELDI-TOF-MS
- Autotaxin多克隆抗体的制备被引量：1
- 2008年
- 目的:表达和纯化带多聚组氨酸(6×His)标签的Autotaxin(58-157位氨基酸)融合蛋白,制备抗Autotaxin的多克隆抗体。方法:构建pET-21 c-Autotaxin(58-157)重组表达质粒,转入BL21大肠杆菌,IPTG诱导蛋白表达,经镍离子金属螯合树脂纯化后,用纯化的蛋白免疫家兔,制备抗Autotax-in的多克隆抗体。ELISA检测抗体效价,Western blot检测抗体特异性,并用于免疫组化实验。结果:在大肠杆菌中高表达Autotaxin(58-157)-His6融合蛋白,经亲和纯化后免疫家兔,获得了特异性的抗Autotaxin抗血清。结论:成功构建pET-21 c-Autotaxin(58-157)表达质粒,原核表达获得高纯度的目的蛋白,制备出高效价的特异性抗Autotaxin多克隆抗体。
- 李颂姜望舒邱洋张俊杰
- 关键词：AUTOTAXIN原核表达多克隆抗体
- 利用自身免疫病人血清鉴定新的中心体蛋白质组分
- 2006年
- 与其他亚细胞结构相比,中心体由于其分离和纯化方面的困难使其蛋白质组学研究一直处于滞后状态.通过免疫荧光证明特异性识别中心体的6名自身免疫病人的自发抗血清被用来鉴定它们相应的抗原即中心体蛋白.利用细胞全蛋白的Western blot检测血清后,从Western blot膜上每条单独条带上洗脱结合的抗体,并确定产生中心体特异性荧光染色的抗体洗脱来源.通过免疫沉淀获得并通过质谱鉴定该抗体相应的抗原蛋白,共鉴定出6种中心体蛋白,包括2种已知的中心体蛋白和4种未知定位或未见中心体定位报道的蛋白.这些蛋白涉及细胞周期调控、信号转导通路、分子伴侣和代谢酶类,反映了中心体功能的多样性.
- 夏梁李艳杨栋王丽敏贺芳周春媛李永哲曾长青何大澄
- 关键词：中心体免疫荧光免疫沉淀质谱
- 利用RNAi沉默技术对水稻OsHAD1基因的功能分析被引量：2
- 2013年
- 生物信息学分析推测了水稻OsHAD1基因属于HAD(haloacid dehalogenase)超级家族水解酶.为研究其功能,本实验设计构建了OsHAD1-RNAi载体,通过农杆菌介导的方法转化水稻,成功获得了转基因植株.结果表明,转基因植株与野生型(日本晴)相比,转基因植株从T0代到T2代结实率均有20%～50%的降低;实时荧光定量PCR分析显示,T2代独立转基因植株中OsHAD1基因的表达量均有50%以上的下调;花粉染色结果显示,转基因植株花粉染色异常,败育率高,平均败育率达71.19%;石蜡切片结果显示,转基因植株花粉形状不规则,在花粉囊中排列松散,并且植株表现出明显的雄性不育.因此,推测OsHAD1基因参与水稻的生殖发育.
- 任鹏飞高少培牛向丽侯佩唐维余进德刘永胜
- 关键词：水稻雄性不育实时荧光定量PCRRNAI
- 泛素-蛋白水解酶系统在小鼠精子体外获能,顶体反应及体外穿卵中作用的研究
- 泛素蛋向水解酶复合体通路(UPP)是细胞内 ATP依赖性、非溶酶体途径的蛋白降解通路,在细胞周期调控、MHC-I类抗原的呈递等重要生理过程中发挥作用。UPP通路也参与生殖细胞发生及生殖系统中一些重要生理过程。本文通过三种...
- 王红梅宋长城于晖石伟先李存玺王永潮陈大元
- 文献传递
- 蛋白质芯片技术标准化平台的建立被引量：5
- 2008年
- 近年来SELDI-TOF-MS被广泛应用于疾病标志物的筛选。并正在成为可能为进一步差异或动态蛋白质组研究提供可靠线索的重要工具。它具有快速、简单、敏感、样本用量极少等优点,尤其适合从大量样本中直接筛选差异蛋白。但由于SELDI技术本身具有较强的操作依赖性,因此建立一个标准化的检测程序是至关重要的。本文采用不同种类的蛋白芯片对血清样本存储时间、冻融次数、芯片和基质的类型,激光强度和平行性等指标进行检测和分析,建立一套能提供最多差异指标的规范化标准程序。上述结果为建立和完善SEL-DI蛋白芯片技术的检测规程奠定理论基础,并提供有重要价值的实验数据。
- 何大澄肖雪媛戴嵩纬王小敏刘丽云王矩菱
- 关键词：SELDI蛋白芯片技术疾病标志物激光强度
- HL－60细胞分化对动粒蛋白及其基因表达的影响被引量：1
- 1995年
- 以人早幼粒白血病细胞ＨＬ－６０为实验材料，用终浓度１μｍｏｌ·Ｌ－１甲酸（ＲＡ）和二甲亚砜（ＤＭＳＯ）分别连续处理细胞６ｄ后，可使ＨＬ－６０细胞按粒系途径定向成熟分化，即表现出核分叶，具有ＮＢＴ还原能力的正常粒细胞的形态和功能特征。利用ＡＣＡ间接免疫荧光方法，观察到在终未分化的细胞核中荧光斑点强度要明显弱于对照细胞。用ＲＮＡＮｏｒｔｈｅｒｎ和斑点杂交方法研究发现，在ＨＬ－６０细胞诱导分化过程中，Ｉｄ，ＣｙｃｌｉｎＢ１基因表达很快受到明显抑制，在终末分化的细胞中已基本被关闭；ＣＥＮＰ－Ｂ基因表达水平也明显降低，但表达变化过程与Ｉｄ和ＣｙｃｌｉｎＢ１基因有所差异。
- 孙红王永潮
- 关键词：细胞分化动粒蛋白基因表达白血病HL-60细胞
- PKA抑制剂对HeLa细胞S期进程的影响及其分子机理
- 以同步化的HeLa细胞为实验材料,研究了 PKA抑制剂对HeLa细胞S期进程的影响及其作用的分子机理。用TdR双阻断法,获得了同步化的S期细胞,以3H-TdR掺入实验进行检测, 分别确定了G1／S交界点,S期起点,S期峰...
- 孙霞柳惠图童迎凯王端顺
- 文献传递
- 人结直肠癌组织CDK4基因和蛋白表达及其临床意义被引量：4
- 2000年
- 目的 探讨人结直肠癌组织CDK4mRNA转录和蛋白表达水平及其临床意义。方法 通过Northernblot和Westernblot方法 ,分析 30例人结直肠癌和其相应正常粘膜组织中 ,CDK4基因mRNA转录和蛋白表达水平。结果 40 %的结直肠癌组织中CDK4mRNA转录水平增高 ,5 3 3%的癌组织蛋白表达水平增高。其表达情况与肿瘤分化程度有关 ,表达水平越高 ,分化程度越低 ,二者比较差异有显著性 (χ2 =13 0 5 ,P =0 0 2 3;χ2 =13 89,P =0 0 0 9)。结论 CDK4可能是结直肠癌的原癌基因 ,在肿瘤发生过程中起一定作用。可做为结肠癌基因治疗的理论依据。
- 叶颖江祝学光王永潮桑建利顾晋曲军于永祥王杉
- 关键词：结肠肿瘤直肠肿瘤CDK4基因
