东南大学医学院发育与疾病相关基因教育部重点实验室 作品数:30 被引量:106 H指数:6 相关作者: 张建琼 赵春杰 孙杭 窦非 吕雯雯 更多>> 相关机构: 南京农业大学动物科技学院 佳木斯大学医学院 江苏大学基础医学与医学技术学院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 国家杰出青年科学基金 国家重点基础研究发展计划 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 农业科学 更多>>
抗果蝇Trio蛋白抗体的制备及鉴定 2008年 目的:制备兔抗果蝇Trio蛋白的抗体。方法:以RT-PCR扩增Trio的1 173 bp的基因片段并克隆入pET28a(+)和pGEX-4T-1(His)6C表达载体中,表达并纯化Trio-His、Trio-GST融合蛋白。用纯化的Trio-His融合蛋白免疫家兔产生抗Trio的抗体,用Trio-GST亲和层析法进行纯化并采用Western blot法检测抗体生物学活性。结果:表达的Trio-His蛋白以包涵体的形式存在,用His亲和层析法分离纯化后得到较纯的Trio-His融合蛋白,以纯化的Trio-His免疫家兔制备的兔抗Trio的抗体,经Western blot分析显示该抗体可与果蝇S2细胞Trio特异性结合。结论:获得具有良好特异性的兔抗Trio抗体,为进一步研究Trio的功能奠定了基础。 缪峰 吕雯雯 丁洁 袁榴娣关键词:原核表达 抗体制备 Ct值与浓度对数在HBV核酸定量检测室内质控中的作用 被引量:4 2010年 目的评价Ct值和浓度对数两种参数对临床HBV核酸定量检测室内质控结果分析的影响。方法分别以室内质控品Ct值和浓度对数的均值(x-)和标准差(s)绘制Levery-Jennings质控图。以12S为"告警"规则,13S为失控规则。结果以Ct值为参数分析质控结果时未发现失控;而以质控品浓度对数为参数分析质控结果时出现一个批次的失控结果。结论以质控品浓度对数为参数分析室内质控,较Ct值更为敏感,可以更好地保证临床核酸定量检测质量。 陈克平 徐百泉 李丽关键词:室内质控 CT值 人Tau蛋白截短片段转基因果蝇的构建 阿尔茨海默病(AD)是一种神经退行性病变,其主要神经病理特征包括:神经细胞内的神经元纤维缠结(NFT);神经细胞外的淀粉样斑块,又称老年斑(SP);大量神经细胞的凋亡、丧失等。本文为了能够在在体水平研究Tau蛋白的毒性机... 耿俊华 窦非关键词:阿尔茨海默病 发病机制 蛋白基因 动物实验 胃癌细胞系MKN中HLA-Ⅰ类分子表达降低的机制研究 被引量:2 2006年 目的:探讨胃癌细胞系MKN中HLA-Ⅰ类抗原表达水平异常的分子机制。方法:以胃癌细胞系BGC823、MGC803和SGC7901为对照,利用流式细胞仪检测细胞表面HLA-Ⅰ类复合物的表达情况,W estern b lot检测HLA-Ⅰ类分子重链及轻链表达情况,半定量RT-PCR检测HLA-Ⅰ类分子重链、轻链和抗原加工分子mRNA水平的表达情况,并利用HLA基因区域的微卫星序列检测MKN细胞HLA基因在DNA水平的完整性。结果:胃癌细胞系MKN表面HLA-Ⅰ类复合物表达降低,重链A及B/C位点蛋白无表达而轻链表达无异常。在mRNA水平,胃癌细胞系MKN存在重链A、B、C各位点和抗原加工分子TAP1、LMP2、Tapasin、PA28β的表达缺失。微卫星DNA扩增结果初步显示,MKN细胞无HLA基因区域DNA的大片段丢失。结论:胃癌细胞系MKN HLA-Ⅰ类分子复合物表达降低可能是由HLA-Ⅰ类分子重链及其加工分子在转录水平改变而引起的。 沈宇清 张建琼 夏梅 缪凤琴 单祥年 谢维关键词:胃癌 微卫星序列 膜结合鸟苷酸激酶蛋白质家族的结构与功能 2001年 MAGUKs蛋白家族成员位于细胞表面 ,通过其PDZ、SH3 、GK结构域调节离子通道受体的聚集 ,构建细胞骨架 ,参与信号转导 ,调控细胞周期进程 。 朱克毅 万永奇 谢维关键词:PDZ结构域 丹参酮ⅡA对高糖培养的大鼠血管平滑肌细胞p38MAPK信号通路的影响 被引量:11 2008年 目的:观察丹参酮ⅡA对高糖诱导的血管平滑肌细胞增殖的影响,分析该作用与氧化应激以及丝裂原活化蛋白激酶p38(p38 mitogen-activated protein kinases,p38 MAPK)信号通路的关系。方法:取第3代原代培养的大鼠血管平滑肌细胞建立高糖诱导细胞增殖模型,实验分为正常对照组、高糖组和丹参酮ⅡA组,BrdU掺入法测定血管平滑肌细胞的DNA合成水平;黄嘌呤氧化酶法、硫代巴比妥酸法分别测定细胞培养上清中超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)含量;免疫印迹法(Western blot)检测磷酸化p38 MAPK蛋白表达。结果:高糖诱导的血管平滑肌细胞呈快速增殖状态,在10~25mmol·L^-1间增殖效应呈剂量依赖性;丹参酮ⅡA能抑制高糖诱导的血管平滑肌细胞增殖,提高高糖培养的细胞中SOD水平,降低MDA含量,减少P-p38MAPK蛋白的表达。结论:丹参酮ⅡA抑制高糖诱导的血管平滑肌细胞增殖,这可能与其能减少血管平滑肌细胞中的氧自由基,抑制p38MAPK信号通路有关。 陆璐 李新荣 邓湘蕾关键词:高糖 血管平滑肌细胞 丝裂原活化蛋白激酶P38 铜中毒引起的秀丽线虫世代间可传递的缺陷 被引量:19 2007年 为了研究铜中毒引起的多重生物学毒性是否具有世代间的可传递性,利用秀丽线虫的寿命、体长、后代数目、繁殖速度、运动行为和行为可塑性等参数系统性地分析了铜的多重生物学毒性及其可能的可传递特性。铜中毒导致动物寿命缩短,生长发育受到抑制,出现产卵器发育畸形,世代时间延长,后代数目降低,运动行为也发生缺陷。这些多重缺陷具有浓度依赖性。此外,铜中毒引起的这种多重生物学毒性和行为毒性是可以传递给后代的,而且,后代中一些特定的缺陷比当代更加严重,如运动行为与行为可塑性等。依据这种可传递特性可将铜中毒所导致的多重缺陷分为4个类型。结果表明,秀丽线虫铜中毒引起的多重生物学缺陷很大程度上是可以传递给后代的。 汪洋 王大勇关键词:发育生物学 铜中毒 可传递性 表型 秀丽线虫 肝癌细胞中HLA I类重链基因表达与启动子区域甲基化的相关性 被引量:2 2007年 目的:研究肝癌细胞株中DNA甲基化与HLAI类分子异常表达的相关性。方法:应用MSP技术对相关细胞系的HLA I类分子重链A、B、C位点启动子区域CpG岛的甲基化状态进行分析,Real-time PCR检测HLAI类分子重链mRNA水平的表达情况,Western blot检测RNA干扰后HLAI类分子重链表达情况。结果:在8株肝癌细胞系中HLA I类分子重链A、C位点启动子区域CpG岛存在甲基化;将启动子区域的DNA甲基化与相关基因表达数据相比较显示二者没有关联性;在RNA干扰DNA甲基化转移酶3a或3b的肝癌细胞系SMMC7721中,比较基因干扰前后HLA I类分子重链蛋白表达无显著变化。结论:在研究的肝癌细胞系中DNA甲基化没有参与调控肝癌中HLA I类分子的异常表达。 杨晋 张建琼 沈宇清 缪凤琴 夏梅 叶覃 许联红 谢维关键词:HLA DNA甲基化 甲基化特异性 分子伴侣作为阿尔兹海默病治疗靶标的研究进展 被引量:5 2011年 目前多种用于阿尔兹海默病(Alzheimer disease,AD)治疗的药物效果欠佳,提示虽然我们对AD的病理机制有了较好的了解,但是在治疗靶点的选择上还有待进一步的探索。近年来的研究表明分子伴侣是一个非常值得尝试的AD治疗靶标,热休克蛋白90的抑制剂具有用于AD治疗的潜在可能性。我们拟就分子伴侣在AD中的神经元保护机制、分子伴侣与淀粉样小肽前体蛋白及Tau蛋白的相互调控进行综述和探讨,以期评估分子伴侣作为AD治疗药物靶标的可行性。 邱玉华 窦非关键词:阿尔兹海默病 分子伴侣 HSP90抑制剂 翻译后修饰 DNMT3B基因启动子C46359T多态性与食管癌易感性的关联分析 被引量:4 2008年 目的:探讨DNMT3B基因启动子C46359T单核苷酸多态性与江苏汉族人群食管癌易感性的关系。方法:提取195例食管癌患者及189例健康体检人员外周血基因组DNA,采用PCR—RFLP结合DNA测序技术检测DNMT3B基因启动子C46359T单核苷酸多态性。结果:正常对照DNMT3BC46359T等位基因TT/CT基因型频率为98.9%/1.1%,病例组为97.9%/2.1%,在对照组与病例组中均未检测到DNMT3B 46359 CC基因型。携带DNMT3B 46359 CT等位基因的个体与对照组相比,其患食管癌的易感性未见明显升高(P=0.43,OR=1.96,95%CI:0.35—10.82)。对比江苏汉族人群和英国、美国白种人群,DNMT3B C66359T单核苷酸多态性频率分布有明显差异(P〈0.01)。结论:DNMT3B基因CA6359T多态性可能不适合作为中国汉族人群食管癌易感性的一个独立风险因素,此位点多态性的分布在不同人种间有显著差异。 刘东声 张淑红 胡嘉波 张凤 赵主江 樊红关键词:DNA甲基转移酶3B 食管癌 单核苷酸多态性