中国人民解放军第一军医大学基础部全军休克微循环重点实验室
- 作品数：107 被引量：1,068H指数：19
- 相关作者：金春华王静珍赵桂玲邓鹏刘靖华更多>>
- 相关机构：中山大学中山医学院病理生理学教研室中山大学中山医学院南京师范大学生命科学学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家杰出青年科学基金国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 一种从琼脂糖凝胶上回收DNA的高效、快捷、经济的方法
- 2000年
- 目前在国内分子生物学实验室所采用的多种从琼脂糖凝胶上回收DNA的方法普遍存在着各种问题。本文介绍一种新的从琼脂糖凝胶上分离和提取DNA简易装置。实验表明用这种装置回收DNA具有高效、快捷和经济的优点,非常适合在国内实验室普及推广。
- 姜勇刘杰陈伟明
- 关键词：琼脂糖凝胶DNA回收方法
- 用T7噬菌体展示筛选系统筛选与p38相结合的蛋白被引量：13
- 2003年
- 目的用T7噬菌体筛选系统筛选与重要信号分子p38 MAPK结合的蛋白。方法以p38 MAPK为靶蛋白,分别用不同的介质(ELISA平板和Ni-NTA亲和树脂)筛选T7人肝和人肺cDNA文库。结果选择86个第4轮筛选后的洗脱噬菌体单个噬斑克隆,经EDTA处理后利用特异性PCR引物扩增插入片断,回收PCR产物并进行测序,将所得到的序列用BLAST软件搜索GenBank中的同源序列,得到了46个编码蛋白的序列。结论T7噬菌体展示筛选系统筛选新的结合蛋白简单、快速、有效。
- 李志杰刘靖华龚小卫秦清和黄浩邓鹏王静珍孙学刚赵善超刘亚伟赵克森姜勇
- 关键词：P38结合蛋白靶蛋白
- p38丝裂原活化蛋白激酶在不同细胞内定位的研究被引量：8
- 2000年
- 用共聚焦显微镜对不同原代培养细胞的p38丝裂原活化蛋白激酶(mitogen -activatedproteinkinase,MAPK)进行定位 ,以探讨 p38激活后入核在不同的细胞中是否具有普遍性。发现与单核细胞相似 ,未受刺激静止的心肌细胞、平滑肌细胞和内皮细胞的 p38荧光强度呈弥散性分布;脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)刺激后 ,细胞核区荧光强度均明显增加 ,胞浆荧光强度均降低。RAW细胞对LPS诱导p38移位入核的敏感性较其它细胞高 ;在上述4种细胞LPS刺激引起的p38的移位入核速度也不相同。这表明 p38蛋白激酶移位入核依赖于其磷酸化激活 ,且在多种细胞具有普遍性;但在不同细胞LPS诱导 p38移位入核的速度和敏感性有一定差别。
- 张琳姜勇
- 关键词：P38丝裂原活化蛋白激酶细胞内定位信号转导
- 血管通透性的调节和游离微血管技术在其研究中的应用被引量：9
- 2005年
- 王述昀赵克森
- 关键词：毛细血管通透性信号转导
- LPS对人脐静脉内皮细胞的F-actin和VE-cadherin细胞定位和结构的影响被引量：1
- 2001年
- 宋力黄巧冰
- 关键词：脂多糖LPS脐静脉内皮细胞F-ACTINVE-CADHERIN细胞定位
- 超氧化物歧化酶与休克研究新进展被引量：2
- 2004年
- 金建秋赵克森
- 关键词：超氧化物歧化酶休克SOD氧自由基血管反应性
- 钙依赖粘附素生理功能研究进展被引量：5
- 2000年
- 钙依赖粘附素是细胞之间粘附连接的重要组成分子 ,在发育及成年机体的组织结构中起着重要作用。钙依赖粘附素细胞外段决定其结合的特异性 ,其胞浆尾段与胞浆相关蛋白及细胞骨架的相互作用和联系对完整的生理性粘附也必不可少。粘附连接的调节涉及到钙依赖粘附素的量和质变化 ;此外 ,钙依赖粘附素 连环素复合体参与信号转导过程 ,并影响组织的结构和功能。
- 闫文生姜勇
- 关键词：信号传递
- 人His-AWP1融合蛋白表达载体的构建及其在原核生物的表达被引量：7
- 2003年
- 目的 获取人His-AWP1融合蛋白,为下阶段深入研究AWP1的结构、功能及筛取与其相互作用的蛋白打下基础 方法 应用逆转录聚合酶链反府(RT-PCR)法从人ECV304内皮细胞系中克隆AWP1 cDNA,并将其重组于能表达6个组氨酸残基的原核表达质粒DET-14b中。经酶节、序列鉴定,选择正确重组克隆,将其质粒转化大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导表达,用Ni2+-NTA His柱纯化和SDS-PAGE分离蛋门。结果克隆到一个627 bp的AWP1 cDNA片段.重组质粒目的DNA测序正确.纯化出了一个分子量约为38 kD的融合蛋白。结论用基因工程方法在原核细胞表达并成功纯化出His-AWP融合蛋白。
- 莫永炎曹永宽刘亚伟龚小卫姜勇
- 关键词：ECV304细胞
- 定心方对大鼠心肌缺血再灌注损伤时p38丝裂原活化蛋白激酶和肿瘤坏死因子α的影响被引量：18
- 2004年
- 目的:探讨定心方防治大鼠心肌缺血再灌注损伤的作用机制。方法:60只SD大鼠随机分为5组:假手术组、模型组、肿瘤坏死因子α(tumornecrosisfactor-α,TNF-α)抗体组、定心方小剂量组和定心方大剂量组,每组12只。利用结扎、放松左冠状动脉的方法制作大鼠心肌缺血再灌注损伤模型。用放射自显影激酶活性测定心肌中p38丝裂原激活蛋白激酶(p38mitogen-activatedproteinkinases,p38MAPK)活性。用2,4二硝基苯肼显色法测定血清乳酸脱氢酶(lactatedehydrogenase,LDH)活性。用免疫酶联吸附法(ELISA)检测心肌内TNF-α含量。结果:定心方大、小剂量组均能不同程度地提高再灌注后平均动脉压(meanarterialpressure,MAP),减少血清LDH的活性。MI/R模型组大鼠心肌中TNF-α的含量(pg/g)显著高于假手术组(1120±111和165±16;t=23.483,P<0.01);与模型组相比,TNF-α抗体组、定心方大、小剂量组均能显著降低心肌中TNF-α含量,分别为312±25,515±54,843±86;差异有显著性意义(t=18.341,23.142,5.554,P均<0.01)。MI/R模型组大鼠心肌中p38MAPK活性(nkat/g)显著高于假手术组(90.01±2.88和16.67±0;t=44.00,P<0.01);TNF-α抗体组心肌中p38MAPK活性(93.35±2.55)与模型组无显著性差异(t=0.866,P>0.05);定心方大。
- 赵晓山贾钰华姜勇罗仁秦清和
- 关键词：定心方心肌缺血再灌注损伤P38丝裂原活化蛋白激酶肿瘤坏死因子Α
- p38MAPK在LPS诱导的小鼠肺组织诱导性一氧化氮合酶(iNOS)表达中的作用
- 2001年
- 阚文宏闫文生黄巧冰姜勇赵克森
- 关键词：内毒素休克肺组织诱导性一氧化氮合酶INOSP38MAPK小鼠
