上海交通大学医学院医学检验重点实验室
- 作品数：15 被引量：61H指数：5
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- 以合成肽为抗原检测人巨细胞病毒抗体的ELISA方法的建立及评价
- 人巨细胞病毒(human cytomegalovirus,HCMV)，是人类先天性病毒感染的最常见病原体之一，可引起多种不同的感染综合征，在免疫功能受损者中可引起严重的感染，甚或致死。既往HCMV感染的血清学检测多采用以...
- 秦逸秋孙立山周文达刘长河沈春琳甄子刚
- 关键词：合成肽抗原检测巨细胞病毒抗体
- 文献传递
- 精子肽的固相合成及其在免疫性不孕诊断中的应用研究被引量：4
- 2008年
- 目的合成特异性精子肽,并对其抗原性进行初步评价,从而探讨检测抗精子抗体的ELISA试剂盒制备。方法应用固相多肽合成技术,以Fmoc基团保护的氨基酸为原料,合成特异性精子肽。以高效液相色谱(HPLC)技术鉴定纯化,并用ELISA检测其抗原性。结果成功合成了所需肽段,HPLC结果显示纯度达95%以上。该合成肽包被的ELISA试剂盒检测抗精子抗体的结果,与商品化试剂盒相比较符合率达90.6%。结论固相多肽合成技术可用于合成高纯度特异性的精子肽,且所合成肽段具有良好的抗原活性,包板建立的ELISA方法可以用于免疫性不孕中抗精子抗体的检测。
- 郭海艳周文达
- 关键词：固相多肽合成免疫性不孕抗精子抗体酶联免疫吸附试验
- 检测肌红蛋白的半定量金免疫层析法的研究被引量：6
- 2007年
- 目的建立一种半定量检测人血清肌红蛋白的金免疫层析方法,用于急性心肌梗死的快速检测。方法一株抗人肌红蛋白单克隆抗体标记胶体金,另一株抗人肌红蛋白单克隆抗体包被膜作为检测线,兔抗鼠IgG抗体包被膜作为对照线,建立半定量金免疫层析测定方法。结果本法测定结果分为3个半定量判定区段：〈70、70-150和〉150μg/L;与化学发光免疫测定对照检测83份血清标本,符合性良好。结论金免疫层析测定法具有半定量的特点,方法简便、快速、准确,适用于急性心肌梗死的早期检测。
- 郑佐娅曹丹如陈悦卢仁泉刘德琮朱晴晖陶义训
- 关键词：肌红蛋白金免疫层析法半定量测定
- 标记免疫测定技术的研究进展被引量：3
- 2006年
- 卢仁泉郑佐娅
- 关键词：免疫测定
- 尿微量白蛋白半定量金免疫层析试条的研制和临床评价被引量：5
- 2007年
- 目的 建立一种半定量检测人尿液中的微量白蛋白（mAlb）的金免疫层析方法。方法 应用一株抗人白蛋白单克隆抗体与胶体金结合，组成胶体金结合物试剂；白蛋白包被在硝酸纤维素膜上，而制成竞争法的试剂条，同时用一定浓度的羊抗鼠IgG抗体作为参比线。结果 该法经人白蛋白标准液测定，结果判定可分为〈20、20-50、50-200和〉200mg／L4个半定量区段；137例经散射免疫浊度法定量测定白蛋白浓度的临床尿标本用于该法的对比测定，结果符合性良好。结论 该法具有半定量的特点，结果可靠，适用于糖尿病、高血压等并发肾病的早期诊断。方法简便、快速，特别适合中、小医院和门诊部使用。
- 卢仁泉宗英郑佐娅
- 关键词：微量白蛋白金免疫层析法半定量测定
- 以合成肽为抗原检测人巨细胞病毒抗体的酶联免疫吸附试验的建立及评价被引量：4
- 2008年
- 目的以合成多肽为抗原建立用于人巨细胞病毒(HCMV)抗体检测的间接酶联免疫吸附试验(ELISA)。方法以固相多肽合成技术合成了HCMV 7个抗原性肽段,并对其抗原性进行了初步评价,选择高抗体反应的肽段为抗原,建立检测HCMV特异性抗体的间接ELISA。结果7个肽段中,抗体反应性较高肽段有4个;以合成多肽为抗原的间接ELISA对HCMV IgG抗体检测的敏感性和特异性分别为90.9%和100.0%,对于IgM抗体检测的敏感性和特异性分为90.0%和100.0%;与国外试剂盒测定结果有良好的符合性;该方法的精密度及稳定性良好。结论合成的HCMV多肽片段可作为抗原用于HCMV的检测,以此多肽为抗原建立的间接ELISA可用于临床HCMV特异性抗体的检测。
- 秦逸秋孙立山周文达刘长河沈春琳甄子刚
- 关键词：人巨细胞病毒合成肽酶联免疫吸附试验
- 血清肌红蛋白光激化学发光免疫测定法的建立被引量：15
- 2006年
- 目的采用光激化学发光免疫测定技术（LICI）建立定量检测肌红蛋白（Mb）的方法。方法使用针对Mb不同表位的2株单克隆抗体，一株包被发光微粒，另一株进行生物素化，与包被有链霉亲合素的感光微粒共同构成检测试剂，优化检测条件并评价检测性能。结果该方法的灵敏度为1．36ng／ml，在33．8～1521．0ng／ml的范围内线性良好。批内和日间变异系数分别为3．05％～4．41％和5．80％～6．56％。在血红蛋白浓度〈2．6g／L，总胆红素浓度〈342μmol／L、三酰甘油浓度〈11．3mmol／L时的干扰率无临床意义。与Roche Elecsys电化学发光法有较好的相关性（r=0．9971）。结论血清MbLICI的建立有助于进一步对检测试剂盒的研制。
- 马宏伟赵卫国潘柏申
- 关键词：肌红蛋白化学发光微粒免疫测定
- 亲和层析法分离纯化人心肌肌钙蛋白Ⅰ被引量：4
- 2007年
- 目的从人心肌组织提取纯化心肌肌钙蛋白Ⅰ(cTnI)。方法采用离子交换层析和疏水层析从兔骨骼肌中提纯肌钙蛋白C(TnC),制备连接有TnC的亲和层析介质,通过亲和层析法从人心肌组织中直接提纯cTnI。纯化的cTnI采用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和免疫印迹法进行鉴定。结果从10 g人心肌组织中共提纯2.44 mg cTnI,SDS-PAGE图上显示为单一条带,表观相对分子质量约为29000。免疫印迹法结果表明cTnI单克隆抗体能够特异性识别提纯的cTnI,纯化的cTnI SDS-PAGE和免疫印迹法结果均与商品化cTnI结果一致。结论具有免疫活性的天然cTnI的获取有助于急性心肌梗死诊断试剂盒的研制。
- 马宏伟赵卫国潘柏申
- 关键词：纯化
- cTnI-linker-TnC融合蛋白基因的构建、表达及鉴定被引量：2
- 2007年
- 目的重组及表达人cTnI-linker-TnC融合蛋白。方法应用PCR技术从人心脏cDNA文库分别扩增出cTnI和TnC基因,通过引物设计在两者之间加上19个中性氨基酸残基TS-(G4S)3-AC的linker编码序列,克隆PCR产物,并构建pET28a-cTnI-linker-TnC表达质粒,转化入大肠杆菌表达菌株BL21(DE3)中,用异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(IPTG)诱导目的蛋白的表达,NTA树脂亲和层析纯化后检测其纯度和免疫反应性。结果成功构建了cTnI-linker-TnC融合蛋白的基因,并在大肠杆菌中实现可溶性高表达,在摇瓶中的表达量为21 mg/L,经一步NTA树脂亲和层析纯化,获得条带单一的目的蛋白,采用进口全自动免疫检测系统鉴定证实,目的蛋白有较高的免疫反应性。结论采用原核表达方法可以获得具有高纯度和高免疫反应活性的cTnI-linker-TnC融合蛋白。
- 张明明洪理泉卢仁泉郑佐娅
- 关键词：融合蛋白
- 血清心肌肌钙蛋白Ⅰ光激化学发光免疫测定法的建立被引量：8
- 2007年
- 目的采用光激化学发光免疫测定法(LICLIA)建立血清心肌肌钙蛋白I(cTnI)的定量检测方法。方法使用2株特异性的cTnI单克隆抗体,一株包被发光微粒,另一株进行生物素化,与包被有链霉亲合素的感光微粒共同构成检测试剂,优化检测条件并评价检测性能。结果方法的分析灵敏度为0.05 ng/mL,在1.10～29.36 ng/mL范围内线性良好。批内和日间变异系数(CV)分别为4.89%～5.93%和6.76%～8.96%。cTnI浓度为161 ng/mL时方法无Hook效应。与Biocheck cTnI酶联免疫吸附试验(ELISA)具有较好的相关性(r=0.964)。结论血清cTnI的LICLIA定量检测方法的建立有助于急性心肌梗死诊断试剂盒的研制。
- 马宏伟赵卫国潘柏申
- 关键词：化学发光免疫测定心肌梗死
