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母语，爱并失落着(二): 2008年; 《母语,爱并失落着(一)》刊发后,在读者中引起强烈反响。记者采访了教育专家吕型伟、于漪,科学家张友尚。就高考中母语类竞赛未获加分、母语受冷落的话题,专家们高见似夏雨雨人,良言如春风风人。从中可以感受到,不管他们的事业属于"人文科学"还是"自然科学"的范畴,对母语的热爱与重视是他们所共有的;他们的事业有成,也与之息息相关。; 吕型伟于漪张友尚; 关键词：母语教育事业有成雨人母语文化风人

天花粉胰蛋白酶抑制剂类似物基因的克隆及在大肠杆菌和酵母中的表达: 1992年; 天花粉胰蛋白酶抑制剂类似物((Ala-6)-TTI)基因克隆到载体pWR590-1进行表达.表达的融合蛋白,经部分纯化后用溴化氰裂解,裂解物还原后以固相胰蛋白酶作为介体进行二硫键重组,并用此固相酶亲和层析.纯化的(Ala-6)-TTI,其抑制活性与天然抑制剂相当,在HPLC C18柱上的峰形位置以及氨基酸组成分析结果与人工合成的(Ala-6)-TTI一致.上述基因通过点突变使其读框与酵母分泌型表达载体pVT102U/α相一致,然后进行克隆并转化酵母宿主菌S-78.培养物的上清液具有明显的胰蛋白酶抑制活性,表达产物经固相胰蛋白酶亲和层析及HPLC纯化后,测定其氨基酸序列,证实(Ala-6)-TTI已正确表达.比较大肠杆菌与酵母的表达体系,后者具有更大的优越性,得率高于2mg/L,表达产物无需再进行二硫键重组.; 陈小明钱岳伟戚正武; 关键词：蛋白酶抑制剂天花粉 DNA

RNA干扰抑制胶质瘤U251细胞系EphB4基因表达及对细胞生长的影响: 目的研究酪氨酸激酶受体EphB4基因在胶质瘤U251细胞中的表达及其功能特性,寻找诊断、治疗胶质瘤的新方法和途径,并为判断恶性胶质瘤预后提供有用指标。方法①RT-PCR检测U251细胞中EphB4和EphA2基因的表达情...; 董万利张艳荣胡锦金由辛; 文献传递

hApoE7转基因小鼠纯合子的培育和鉴定被引量：3: 2004年; 目的　载脂蛋白E (apoE)是血浆中参与脂质代谢的重要蛋白质 ,并且与迟发型早老性痴呆 (AD)相关。为从整体水平研究人突变ApoE基因剂量与效应的关系 ,我们拟培育C57BL 6 hApoE7纯合子转基因小鼠。方法　将经Southern杂交鉴定为阳性的F1代小鼠进行互配 ,仔代经PCR初筛 ,再行Southern杂交鉴定 ,杂交结果经扫描定量分析以确定hApoE7基因整合的拷贝数 ,纯合子小鼠的拷贝数为杂合子的两倍。经此法鉴定的纯合子小鼠与正常C57BL 6小鼠进行侧交以进行进一步的鉴定。结果　Southern杂交鉴定出F1代转基因小鼠 6只 ,F2代转基因小鼠 7只 ,其中纯合子 3只。将所得到的纯合子小鼠与正常的C57BL 6小鼠交配 ,仔代鼠经PCR鉴定结果全部为阳性。结论　通过培育C57BL 6 hApoE7纯合子转基因小鼠 ,发现人ApoE7基因在转基因小鼠体内可以稳定遗传 ,转基因的遗传特征符合常染色体单位点整合。; 张丽春杨鹏蒋效松薛越强琦祖和; 关键词：载脂蛋白E 转基因小鼠纯合子 AD

MiR-181c对人脑胶质瘤细胞增殖及凋亡的作用被引量：2: 2008年; 目的观察miR-181c对人脑胶质瘤细胞增殖及凋亡的影响,进一步探讨miR-181c的生物学功能。方法化学合成miR-181c,脂质体转染U251细胞。应用cck-8法和流式细胞术检测细胞的增殖和凋亡。结果miR-181c上调后对U251细胞具有抑制作用,且呈明显的剂量依赖性,而对照组无明显抑制作用。结论化学合成的miR-181c在人脑胶质瘤细胞增殖和凋亡过程中发挥重要作用,可能成为胶质瘤基因治疗的新靶点。; 刘书芳胡锦董万利柏燕燕金由辛; 关键词：胶质瘤细胞凋亡

线粒体与细胞凋亡: ＜正＞细胞凋亡是一种基本的生物学现象。在细胞生长、发育以及对外界物理化学刺激作出反应的过程中有着重要的作用。细胞凋亡与线粒体的完整性密切有关。线粒体的跨膜电位、线粒体通透性转变通道的形成与通透性的改变、细胞色素c从内膜上...; 林其谁; 文献传递

RNA干扰介导的胶质瘤细胞IGF-1R基因下调诱导肿瘤细胞凋亡被引量：6: 2006年; 目的应用RNA干扰(RNAi)技术介导胶质瘤C6细胞株胰岛素生长因子1受体(IGF1R)基因下调诱导C6细胞凋亡的研究。方法体外化学合成靶向IGF1R基因的小干扰RNA(siRNA),脂质体法将siRNA以不同浓度梯度转染C6细胞,设非特异的siRNA阳性对照组和未转染siRNA的阴性对照组:同时使用绿色荧光素标记的小干扰RNA(FITCsiRNA)转染细胞,荧光显微镜下观察siRNA转染效率;RT-PCR法半定量检测siRNA对IGF1R基因表达的抑制作用;流式细胞术检测siRNA诱导细胞凋亡作用。结果荧光显微镜下荧光素标记的siRNA转染组可见细胞质内清晰的绿色荧光,脂质体OligofectamineTM2000的转染效率接近100%;化学合成的siRNA明显抑制IGF1RmRNA的表达,各特异性siRNA不同浓度转染组IGF1RmRNA表达水平可下调约10%～80%,流式细胞术检测细胞凋亡率转染组为22.47%±3.15%,与阳性对照组2.3%±0.9%和阴性对照组1.14%±0.79%比较有明显提高,而阳性、阴性对照组相比无明显差异。结论化学合成的靶向IGF1R的siRNA可以明显下调IGF1R基因的表达,胶质瘤细胞凋亡率明显上升,为进一步进行胶质瘤的基因治疗研究奠定基础。; 胡锦王元元董万利蒋觉安金由辛; 关键词：小干扰RNA 胰岛素样生长因子-1受体胶质瘤细胞凋亡

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中国科学院上海生命科学研究院分子生物学国家重点实验室