重庆医科大学检验医学院临床检验诊断学省部共建教育部重点实验室
- 作品数：536 被引量：1,625H指数：17
- 相关作者：陈淑惠曹唯希刘成桂王箭金丹婷更多>>
- 相关机构：重庆医科大学附属第一医院临床学院温州医学院检验医学院浙江省医学遗传学重点实验室温州医学院检验医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金重庆市自然科学基金重庆市教委科研基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学理学自动化与计算机技术更多>>
- β-TrCP-OD-HA重组腺病毒对白血病K562细胞凋亡的影响被引量：3
- 2010年
- 目的研究癌蛋白Bcr-Abl被泛素-蛋白酶体系统靶向降解的可能性及诱导白血病K562细胞凋亡的作用。方法含有Bcr-Abl融合蛋白N端寡聚化区(OD)的重组腺病毒Ad5β-TrCP-OD-HA特异性结合Bcr-Abl融合蛋白的N端寡聚化区(OD),通过感染将嵌合泛素连接酶β-TrCP运送到靶细胞K562细胞,同时,β-TrCP基因突变的重组腺病毒Ad5△F-TrCP-OD-HA和仅含绿色荧光蛋白基因的重组腺病毒Ad5GFP,分别作为对照。感染后,Western blot检测Bcr-Abl融合蛋白的表达;倒置显微镜、光镜和电镜观察细胞形态学变化。结果成功建立携β-TrCP-OD-HA、△F-TrCP-OD-HA的重组腺病毒的K562细胞株,重组腺病毒感染K562细胞后,Ad5β-TrCP-OD-HA组的Bcr-Abl融合蛋白含量下降,与Ad5β-TrCP-OD-HA组、Ad5GFP组及对照组相比,差异具有统计学意义(P<0.05);倒置显微镜可见Ad5β-TrCP-OD-HA作用后细胞体积变小、形态不规则;光镜下发现胞体变小,细胞质空泡,细胞核出现碎裂和凋亡小体;电镜观察到出现了典型的细胞凋亡的超微结构。结论重组腺病毒介导的β-TrCP-OD-HA在白血病K562细胞内能够降低Bcr-Abl融合蛋白含量,并且诱导K562细胞发生了凋亡。
- 罗红伟田文君季茂胜刘钉宾王小飞黄宗干冯文莉
- 关键词：泛素连接酶K562细胞细胞凋亡
- 血清比较蛋白质组学在SARS及并发症中的应用被引量：1
- 2008年
- 蛋白质组学技术是研究疾病相关蛋白质的重要手段。血清以其在临床疾病研究中的独特性、重要性成为研究者最为感兴趣的研究材料之一,寻找疾病血清中特异蛋白质的比较蛋白质组学,以此发现血清中的特异标志物是蛋白质组学研究的新思路。本文就血清比较蛋白质组学技术在SARS及并发症中的应用作一综述。
- 蒋洪彦李雪华翁亚光王世鑫
- 关键词：蛋白质组学血清SARS生物标志物
- Apg-2对H2O2诱导的BaF3-P210细胞损伤的影响被引量：2
- 2010年
- 目的探讨Apg-2对H2O2诱导的Bcr/Abl阳性BaF3-P210细胞损伤的影响。方法以H2O2诱导的pMIGR1空载体感染细胞BaF3-MIGR1和稳定表达Bcr/Abl的BaF3-P210细胞为损伤模型,Western blot和RT-PCR检测H2O2损伤后2组细胞Apg-2表达;建立过表达Apg-2的BaF3-MIGR1细胞(BaF3-MIGR1-Apg2)和BaF3-P210细胞(BaF3-P210-Apg2)H2O2诱导的损伤模型,Western blot检测磷酸化组蛋白(γ-H2AX)的表达,免疫荧光法检测γ-H2AX焦点数。结果 H2O2作用后的BaF3-MIGR1和BaF3-P210细胞的Apg-2蛋白和mRNA水平表达均升高(P<0.05)。H2O2作用BaF3-MIGR1和BaF3-MIGR1-Apg2细胞后其γ-H2AX蛋白表达升高,γ-H2AX焦点数亦增加;BaF3-P210和BaF3-P210-Apg2细胞H2O2损伤后γ-H2AX蛋白表达和焦点数均无明显变化。结论 Apg-2可减少H2O2诱导的BaF3-P210细胞γ-H2AX表达,从而可能降低其细胞损伤。
- 李春莉刘钉宾袁颖彭智陶崑史梦黄宗干冯文莉
- 关键词：细胞损伤
- MiR-4719通过靶向调控ARHGAP36抑制人乳腺癌细胞的迁移和和侵袭
- 2021年
- 目的检测miR-4719在乳腺癌组织和细胞中的表达,研究其对乳腺癌细胞侵袭迁移的影响及其分子机制。方法采用实时荧光定量PCR检测30对人乳腺癌组织和癌旁组织,乳腺癌细胞株(BT549和MDA-MB-231)以及正常乳腺上皮细胞(MCF-10A)中miR-4719和ARHGAP36的表达水平。生物信息手段分析miR-4719对乳腺癌患者生存率的影响,并预测miR-4719的潜在靶基因。将miR-4719模拟物,靶向ARHGAP36的shRNA、ARHGAP36过表达质粒分别转染乳腺癌细胞。Western blot和免疫组化实验检测ARHGAP36的蛋白水平;细胞划痕实验和Transwell实验检测癌细胞的迁移和侵袭能力;双荧光素酶报告实验验证miR-4719与ARHGAP36的mRNA 3'-非翻译区(3'-UTR)直接结合。结果与癌旁组织、正常乳腺上皮细胞相比,miR-4719和ARHGAP36分别在乳腺癌组织(P<0.001)和乳腺癌细胞(P<0.01)中显著降低和增高。miR-4719低表达与乳腺癌患者不良预后密切相关(P<0.01)。过表达miR-4719或敲低ARHGAP36可明显抑制乳腺癌细胞的侵袭和迁移(P<0.01)。乳腺癌组织中miR-4719和ARHGAP36表达水平呈负相关(P<0.01),双荧光素酶报告实验显示miR-4719可靶向调控ARHGAP36的表达(P<0.01),向癌细胞外源性导入miR-4719可明显抑制ARHGAP36的表达(P<0.01)。此外,过表达ARHGAP36可逆转miR-4719模拟物对癌细胞迁移和侵袭能力的抑制作用(P<0.01)。结论乳腺癌组织和癌细胞中miR-4719的丧失,导致靶基因ARHGAP36的异常高表达,促进了人乳腺癌细胞的迁移和侵袭。
- 李侨邱宇翔金婷柳满然侯懿烜
- 关键词：乳腺肿瘤迁移
- 补体在缺血再灌注损伤中的作用及机制被引量：2
- 2007年
- 补体系统在缺血再灌注时通过多种途径被激活,形成大量的活化片段。这些片段在缺血再灌注损伤中发挥着重要作用,它们通过直接作用和对白细胞与内皮细胞的间接作用造成组织器官损伤。目前抗补体的药物虽较多,但真正用于临床的十分有限。笔者现就缺血再灌注时补体的激活途径,活化补体成分引起损伤的作用机制及防治研究进展综述如下。
- 谭兵张德纯汪正清
- 关键词：补体补体激活缺血再灌注损伤
- Isothermal MTB Test对分枝杆菌临床分离株的快速鉴定被引量：1
- 2015年
- 目的:探讨Isothermal MTB Test(ISO-MTB)对分枝杆菌临床分离株的快速鉴定。方法:将93例已鉴定的分枝杆菌临床分离株纳入ISO-MTB检测,以罗氏培养为金标准分析其结核分枝杆菌(MTB)检测性能,并与结核菌荧光PCR检测法相比较;以测序为金标准分析其非结核分枝杆菌(NTM)检测性能。结果:除4例样本被测为混合菌株,剩余89例样本被用于ISOMTB性能评价:MTB检测的敏感性、特异性、kappa值分别为98.11%、97.22%、0.95,经配对Fisher确切概率法分析,差异无统计学意义(P>0.05),且与结核菌荧光PCR检测法结果完全一致;NTM中鸟型分枝杆菌复合群检测的敏感性、特异性、一致率均为100.00%。结论:ISO-MTB简单、快速,对分枝杆菌的检测性能良好,且可提示混合感染,有望成为分枝杆菌鉴定的临床应用新方法。
- 刘旻雁陈晋白冰苏敏李山
- 关键词：结核分枝杆菌核酸扩增技术
- 大黄素三甲氧基衍生物合成及体外抗肿瘤活性试验被引量：4
- 2010年
- 目的:以天然存在的大黄素为原料合成了甲基化衍生物三甲氧基大黄素,并进行体外抗肿瘤活性的研究。方法:利用硫酸二甲酯/丙酮甲基化组合合成目标化合物1,3,8-三甲氧基-6-甲基蒽醌;通过常规方法,对其理化性质进行鉴定。采用HPLC及ESI-MS对其结构进行表征;通过MTT比色法与流式细胞术检测其对K562细胞增殖及细胞周期分布的影响。结果:三甲氧基大黄素为淡黄色粉末,mp:226～227℃,溶于氯仿等有机溶剂。其结构经HPLC及ESI-MS检测得到确证;浓度依赖性地抑制K562细胞的增殖,并使G0/G1期的细胞比例增加。结论:以大黄素为原料,成功合成了其新的衍生物。三甲氧基大黄素具有抑制K562细胞增殖及阻滞细胞周期由G0/G1期向S期移行的抗肿瘤活性。
- 金丹婷钟梁刘北忠袁佩刘畅王翀王春光朱丹吴燕
- 关键词：大黄素抗肿瘤活性
- 在体外模拟的骨微环境中下调BMP9对人乳腺癌SK-BR-3细胞增殖、迁移的影响及其可能机制被引量：1
- 2013年
- 探讨在体外模拟的乳腺癌骨转移微环境中,采用RNAi技术下调骨形态发生蛋白9(bone morphogenetic protein 9,BMP9)基因对人乳腺癌SK-BR-3细胞增殖、迁移的影响及可能机制。用Transwell小室将空白组SK-BR-3细胞、感染腺病毒AdRFP的对照组SK-BR-3/RFP细胞、感染腺病毒AdsiBMP9的实验组SK-BR-3/siBMP9细胞分别与人骨髓基质HS-5细胞间接共培养后,MTT增殖实验、划痕愈合实验、Transwell迁移实验分别检测下调BMP9对SK-BR-3细胞增殖、迁移的影响;RT-PCR和Western blot法检测相关因子的变化。结果显示,在共培养体系中,SK-BR-3/siBMP9组的BMP9显著低于对照组(P<0.05);下调BMP9可有效促进SK-BR-3/siBMP9细胞增殖(P<0.05),SK-BR-3/siBMP9细胞的划痕愈合率、穿膜细胞数也明显升高(P<0.05);SK-BR-3/siBMP9组血管内皮细胞生长因子(VEGF)、结缔组织生长因子(CTGF)mRNA和蛋白表达均显著上调(P<0.05),且Western blot结果显示p-AKT显著上调(P<0.05)。综上,在骨转移微环境中,干扰BMP9表达可促进人乳腺癌SK-BR-3细胞增殖及迁移,其作用机制可能与上调VEGF、CTGF表达有关,且这个过程可能涉及PI3K/AKT通路的激活。
- 陈莹莹王维刘月红万绍恒张志慧王婷王晋蜀张彦
- 关键词：乳腺肿瘤共培养
- 结核菌H37Ra皮内接种对小鼠巨噬细胞的激活效应被引量：4
- 2006年
- 目的探讨小鼠皮内接种结核菌H37Ra后,腹腔MΦ是否被免疫激活以及激活后氮氧化物的产生、抗结核细胞因子的表达,从而了解H37Ra的免疫应答过程及对MΦ的抗菌免疫作用。方法用H37Ra、BCG皮内免疫小鼠后第30、60天,分别采用Griess法、化学法、ELISA法检测小鼠腹腔MΦ在受到、未受到IFN-γ刺激后NO、H2O2的产生以及IL-12、TNF-α的表达水平。结果①H37Ra免疫小鼠后能显著诱导MΦ分泌表达IL-12、TNF-α,与BCG皮内接种组、未免疫组比较,其差异均有统计学意义(P<0.05);也能诱导MΦ产生NO、H2O2,与未免疫组比较具有统计学意义(P<0.05),与BCG皮内接种组比较,无明显差异;②IFN-γ对巨噬细胞氮氧化物的产生、细胞因子的表达具增强效应。结论H37Ra皮内接种小鼠后能诱导巨噬细胞活化并产生较强的激活效应,且该效应略优于BCG。
- 陶昆卢贤瑜
- 关键词：H37RA巨噬细胞氮氧化物
- 血栓弹力图在重度血小板减少者中的应用被引量：28
- 2011年
- 目的研究重度血小板减少患者血栓弹力图指标与出血的关系。方法根据临床诊断将108例血小板小于20×109/L的患者分为出血组和不出血组,并对他们的血小板计数及血栓弹力图检测结果差异进行统计学分析。结果重度血小板减少时,两组患者的性别、年龄、血小板减少类型、凝血象(凝血酶原时间、活化部分凝血酶原时间、凝血酶时间、纤维蛋白原)及血栓弹力图参数中的反应时间、凝固时间、血凝块聚合速度、凝血综合指数、LY30(反映纤溶活性)差异无统计学意义(P>0.05),但出血组的血小板及血栓弹力图参数中的血栓最大幅度(MA)值明显低于不出血组(P<0.01),采用Logistic回归以及ROC曲线分析得到出血=1.253-0.13血小板-0.042 MA,界值点取-1.478 5时,灵敏度、特异度分别为0.667、0.833,且大于该值的患者有93.3%的可能会出血。结论血栓弹力图指标中的MA值在预测重度血小板减少患者的出血倾向时有重要作用。
- 左艳娄世锋张颖何於娟
- 关键词：血栓弹力图血小板减少出血
