公共文化服务平台

北京标凯科技有限公司: 作品数：16 被引量：23H指数：3; 相关作者：陈清轩唐启慧李卫元姚乌兰张旭晨更多>>; 相关机构：北京中亚国瑞生物经济研究所中国疾病预防控制中心病毒中国疾病控制中心更多>>; 发文基金：国家科技支撑计划“十一五”国家科技支撑计划国家自然科学基金更多>>; 相关领域：生物学医药卫生农业科学自动化与计算机技术更多>>

合作机构

流感病毒H3N2血凝素基因和神经氨酸酶基因在真核酵母菌中的表达: 2010年; 目的克隆、表达和鉴定流感病毒H3N2血凝素基因(hemagglutinin,HA)和神经氨酸酶基因(neuramidinase,NA)序列,为制备抗体和基因工程疫苗打下基础。方法在成功克隆流感病毒H3N2全长HA、NA基因并测序的基础上,将部分基因序列克隆到表达载体pMET A上,构建了重组表达质粒pMET A/HA(52 bp～1 549 bp)、pMET A/NA(121 bp～1 260 bp),电转化真核酵母菌pMAD16,甲醇诱导表达,利用Ni2+亲和层析柱对重组蛋白进行纯化,并用Western Blotting和ELISA方法检测其抗原性。结果重组蛋白在酵母菌中可以高效表达,SDS-PAGE显示蛋白表达后形成了二聚体,蛋白纯度占总蛋白的95%以上,ELISA和Western Blotting实验证实,重组蛋白具有良好的抗原性。结论本研究成功克隆和表达了流感病毒H3N2 HA、NA基因序列,为流感病毒H3N2诊断试剂和疫苗开发等进一步研究奠定了基础。; 李梓张烨唐启慧陈禹宝于在江辛丽陈永坤陈清轩舒跃龙; 关键词：血凝素神经氨酸酶酵母菌

禽流感病毒H9N2血凝素基因和神经氨酸酶因在大肠杆菌中的表达: 2010年; 克隆、表达和鉴定禽流感病毒H9N2 HA,NA基因序列,为制备抗体和基因工程疫苗打下基础。在成功克隆禽流感病毒H9N2全长HA、NA基因并测序的基础上,将部分基因序列克隆到表达载体pET32a(+)上,全基因序列克隆到表达载体pGEX4T-1上,构建了重组表达质粒pET32a(+)/HA(截短)、pET32a(+)/NA(截短)、pGEX4T-1/HA、pGEX4T-1/NA,转化大肠杆菌BL21/rosetta,IPTG诱导表达,利用Ni2+亲和层析柱和GSTrap4B亲和层析柱对重组蛋白进行纯化,并用Western Blotting和ELISA方法检测其抗原性。结果重组蛋白在大肠杆菌中可以高效表达,SDS-PAGE显示其相对分子质量与预计大小一致。ELISA和Western Blotting实验证实,重组蛋白具有良好的抗原性。本研究成功克隆和表达了禽流感病毒H9N2 HA、NA基因序列。为禽流感病毒H9N2诊断试剂和疫苗的开发等进一步的研究奠定了基础。; 张烨于在江辛丽陈永坤唐启慧陈禹保陈清轩舒跃龙; 关键词：血凝素神经氨酸酶克隆表达

乙型肝炎核心抗原酶联免疫定量测定HBV-DNA试剂盒: 本发明公开了一种乙型肝炎核心抗原酶联免疫定量测定HBV-DNA试剂盒及其制备方法，属于分子生物学与免疫学诊断试剂领域。该试剂盒包括：(1)荧光定量HBV-DNA血清标准品6支，(2)HBV表面抗体(HBsAb)多抗预包被...; 陈禹保; 文献传递

体检信息系统与HIS收费接口的分析和设计被引量：8: 2011年; 体检中心作为医院信息化建设的一部分,HIS(Hospital Information System)要求利用体检信息系统对体检者参检项目进行费用审核和控制,即在两系统软件间开发无缝数据接口实现收费信息共享。本文介绍接口的实现目标和开发方式,探讨体检与HIS收费业务差异,分析接口难点,对比三种接口方案的优劣,最后详细给出可行的收费接口设计方案。; 李明彩白帆李卫元; 关键词：体检信息系统 HIS 异构系统集成数据交换

我国生物试剂产业发展战略思考: 2008年; 现代生物技术已经成为一个新的经济增长点，其增长速度大致在25％～30％，是整个经济增长平均数的8～10倍，成为21世纪的主流经济——生物经济。在发达国家一个显著的特点就是：这些国家的生物科技支撑产业技术很发达并形成强大的规模产业。生物支撑技术产业应包括生物试剂、生物仪器、生物软件、模式实验动物及生物人才五个方面。下面主要就生物支撑技术产业之一——生物试剂作一论述。; 陈禹保张传山张旭晨姚乌兰; 关键词：经济增长点现代生物技术生物经济

禽流感病毒H5N1血凝素基因和神经氨酸酶基因在真核酵母菌中的表达被引量：2: 2011年; 目的克隆、表达和鉴定禽流感病毒H5N1血凝素基因(hemagglutinin,HA)和神经氨酸酶基因(neuramidinase,NA)序列,为制备抗体和基因工程疫苗打下基础。方法在成功克隆禽流感病毒H5N1全长HA、NA基因并测序的基础上,将部分基因序列克隆到表达载体pMET A上,构建了重组表达质粒pMET A/HA(49～1 587 bp)、pMET A/NA(121～1 200 bp),电转化真核酵母菌pMAD16,甲醇诱导表达,利用Ni2+亲和层析柱对重组蛋白进行纯化,并用Western Blotting和ELISA方法检测其抗原性。结果重组蛋白在酵母菌中可以高效表达,SDS-PAGE显示蛋白表达后形成了二聚体,蛋白纯度占总蛋白的95%以上,ELISA和Western Blotting实验证实,重组蛋白具有良好的抗原性。结论本研究成功克隆和表达了禽流感病毒H5N1 HA、NA基因序列,为禽流感病毒H5N1诊断试剂和疫苗的开发等进一步的研究提供了依据。; 邹淑梅于在江张烨辛丽陈永坤陈禹保陈清轩舒跃龙; 关键词：血凝素神经氨酸酶

Sanger测序反应优化剂及其制备方法和用途: 本发明公开了一种Sanger测序反应优化剂，该优化剂包括甜菜碱(Betaine)、二硫苏糖醇(DTT)、DMSO和BSA；其配比为：2.7～5mol/L Betaine、3～10mmol/LDTT、3％～8％DMSO、3...; 陈禹保黄捷勤; 文献传递

肺炎支原体P1蛋白羧基端基因片段在大肠杆菌中的表达及应用研究被引量：1: 2010年; 目的：克隆、表达和鉴定肺炎支原体（Mycoplasma pneumoniae,MP）P1蛋白羧基端基因序列,为制备抗体和基因工程疫苗打下基础。方法在成功克隆肺炎支原体P1蛋白羧基端基因片段并测序的基础上,将基因序列克隆到表达载体pET32a（＋）上,构建了重组表达质粒pET32a（＋）/P1（3520~4563bp）,转化大肠杆rosetta,IPTG诱导表达,利用Ni2＋亲和层析柱对重组蛋白进行纯化,并用ELISA和Western blotting方法检测其抗原性。重组蛋白免疫小鼠,制备单克隆抗体。结果重组蛋白在大肠杆菌中可以高效表达,SDS-PAGE显示其相对分子质量与预计大小一致,蛋白质纯度达95%以上。ELISA和Western blotting实验证实,重组蛋白具有良好的抗原性。并成功获得两株高效价单克隆抗体。结论：本研究成功克隆和表达了肺炎支原体P1蛋白羧基端基因序列,制备了抗肺炎支原体P1蛋白单克隆抗体,为肺炎支原体诊断试剂和疫苗的开发等进一步的研究奠定了基础。; 黄劲松黄捷勤唐启慧陈禹保; 关键词：肺炎支原体 P1蛋白克隆表达单克隆抗体

肺炎支原体黏附蛋白P1羧基末端的原核表达及纯化: 2011年; 目的原核表达并纯化肺炎支原体(Mycoplasma pneumoniae,MP)黏附蛋白P1羧基末端。方法提取MP FH型基因组DNA,以其为模板,PCR扩增P1羧基末端基因,插入原核表达载体pET-32a(+),构建重组表达质粒,转化E.coli Rosetta,IPTG诱导表达。表达的重组蛋白经镍离子亲和层析纯化后,进行SDS-PAGE、Western blot和ELISA鉴定。结果重组表达质粒pET-32a-MP-P1C经PCR、双酶切及测序证明构建正确;表达的重组蛋白相对分子质量约55 900,以可溶性形式表达,表达量占菌体总蛋白的47%;纯化的重组蛋白纯度达94%以上,浓度为3.77 mg/ml,可与支原体肺炎患者血清特异性反应,经3 000倍稀释后,仍可与支原体肺炎患者血清发生阳性反应。结论原核表达并纯化了MP黏附蛋白P1羧基末端,为进一步研究MP的致病机制及研发诊断试剂和基因疫苗奠定了基础。; 刘志强王栋陈禹保; 关键词：肺炎支原体黏附蛋白原核细胞基因表达

烟草富含甘氨酸RNA结合蛋白在大肠杆菌中的表达被引量：4: 2010年; 目的:克隆烟草富含甘氨酸RNA结合蛋白基因(glycine-rich RNA-binding protein,GRRBPs)并进行原核表达,为制备抗体和研究烟草抗逆性分子机理打下基础。方法:从总RNA中反转录扩增并克隆烟草富含甘氨酸RNA结合蛋白NtRGP-1a和NtRGP-3全长cDNA,将cDNA序列克隆到表达载体pGEX4T-1上,构建了重组表达质粒pGEX4T-1/NtRGP-1a、pGEX4T-1/NtRGP-3,转化大肠杆菌rosetta,IPTG诱导表达,GSTrap 4B亲和层析柱对重组蛋白进行纯化。结果:重组蛋白在大肠杆菌中可以高效表达,SDS-PAGE显示其相对分子质量与预计大小一致,蛋白纯度占总蛋白的95%以上。结论:成功克隆和表达了烟草富含甘氨酸RNA结合蛋白NtRGP-1a和NtRGP-3基因序列,为制备抗体和烟草抗逆性分子机理等进一步的研究奠定了基础。; 卢秀萍陈学军刘勇唐启慧陈禹保李文正; 关键词：烟草克隆表达

北京标凯科技有限公司

合作机构

文献类型

领域

主题

机构

作者

传媒

年份

用户反馈

北京标凯科技有限公司

合作机构

文献类型

领域

主题

机构

作者

传媒

年份

用户登录

用户反馈