北京沙东生物技术有限公司 作品数:22 被引量:14 H指数:2 相关作者: 杨世方 朱冰 崔俊生 韦鹏 郑向君 更多>> 相关机构: 河北医科大学第二医院 中国医学科学院肿瘤医院 中国科学院研究生院 更多>> 发文基金: 科技型中小企业技术创新基金 国家科技型中小企业技术创新基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 更多>>
重组变构人TNF相关促凋亡配体联合三氧化二砷诱导白血病耐药细胞株凋亡 被引量:2 2008年 本研究探讨重组变构人TNF相关促凋亡配体(recombinant mutant human TNF-related apoptosis-inducing ligand,rmhTRAIL)联合三氧化二砷(As2O3)对阿霉素诱导的人慢性髓系白血病红白血病变耐药细胞株K562/AO2(mdr-1+)的促凋亡作用。以亲本阿霉素敏感细胞株K562(mdr-1-)为对照,观察rmhTRAIL作用后细胞形态变化,采用MTT法测定rmhTRAIL、As2O3单药及联合作用后细胞增殖抑制率;碘化丙锭染色的流式细胞术(FACSCalibur)定量检测rmhTRAILL、As2O3单药及联合作用后sub-G1峰占检测细胞的百分比(sub-G1%)。结果表明:rmhTRAIL联合As2O3对K562/AO2和K562增殖的抑制作用优于单药,采用国内金(正均)氏公式判断rmhTRAIL和As2O3联合作用具有协同作用;流式细胞术定量检测sub-G1%显示,rmhTRAIL2 000ng/ml与As2O32μmol/L单独作用下K562/AO2组与K562组凋亡率分别为(34.93±0.10)%、(10.53±0.16)%(p<0.01);(5.95±0.07)%、(3.50±0.01)%(p<0.05),联合作用下细胞凋亡率分别为(50.95±0.91)%、(20.75±0.95)%(p<0.05),K562/AO2组凋亡效应强于K562组。结论:rmhTRAIL可诱导K562、K562/AO2细胞凋亡;rmhTRAIL联合凋亡诱导剂As2O3对白血病耐药细胞株K562/AO2和K562细胞株的凋亡具有协同作用;rmhTRAIL、As2O3对K562/AO2的促凋亡作用优于其亲本K562细胞。 王雅茹 温树鹏 王福旭 温丽 杨渤彦 杨敬慈 张学军 杨世方关键词:多药耐药基因-1 K562 CELL K562/AO2 CELL 三氧化二砷 HPV抗原融合蛋白疫苗组合物及其应用 本发明提供了包含免疫刺激多肽和突变的人乳头瘤病毒E7蛋白的融合蛋白。本发明还提供了编码该融合蛋白的基因,含有该基因的表达载体,包含该融合蛋白的药物组合物,用该融合蛋白治疗或预防人类乳头瘤病毒相关疾病的方法,以及该融合蛋白... 朱冰 杨世方 崔俊生文献传递 重组变构人肿瘤坏死因子相关的凋亡诱导配体对裸鼠移植非小细胞肺癌的治疗作用 2005年 目的观察新研制的重组变构人肿瘤坏死因子相关的凋亡诱导配体(TRAIL)(recombinantmutanthumanTRAIL,rmhTRAIL)的抗肿瘤作用进行评价。方法采用非小细胞肺癌NCI-H460裸鼠异种移植瘤模型,观察腹腔注射不同剂量(共分5组)的rmhTRAIL对裸鼠肿瘤生长抑制的作用。此外,用TUNEL染色法及DNA片段的凝胶电泳法观察了rmhTRAIL在体内外对裸鼠肿瘤细胞的诱导凋亡作用。结果rmhTRAIL中(5mg/kg)、高剂量(15mg/kg)组相对肿瘤体积(RTV)分别为3.19±2.05和1.47±0.77,显著小于对照组8.48±5.87(P<0.05,和P<0.01);相对肿瘤增值率(T/C%)分别为37.6%和17.3%。中、高剂量组肿瘤重量分别为1.09g±0.55g和0.31g±0.09g,显著小于对照组2.78g±0.77g(P<0.01)。经rmhTRAIL处理的肿瘤组织和体外培养的肿瘤细胞均出现大量TUNEL染色阳性的凋亡细胞,rmhTRAIL处理的肿瘤细胞的DNA提取物在琼脂糖凝胶电泳上呈现典型的具有凋亡特征的DNA梯带。结论rmhTRAIL具有显著的体内外抗肿瘤作用,其机制主要是引起肿瘤细胞的凋亡。 唐艳旻 杨世方 朱冰 崔俊生关键词:凋亡诱导配体 裸鼠 非小细胞肺癌 抗肿瘤作用 人乳头瘤病毒(HPV)L2肽免疫小鼠诱导的抗体水平与保护作用的关系研究 被引量:2 2010年 目的 检测HPV-58 L2 11~200 AA肽在动物体内对HPV的保护效果,并分析疫苗诱导的抗体滴度或中和抗体滴度与疫苗保护作用之间的对应关系.方法 利用大肠杆菌表达HPV-58L2 11~200 AA肽,纯化目的 蛋白并与铝佐剂吸附后免疫小鼠,利用小鼠HPV-58假病毒感染模型检测不同剂量的免疫原对小鼠的保护作用.通过ELISA和假病毒中和抗体检测方法 检测免疫血清中的总抗体水平和中和抗体水平,分析具有保护作用的抗体或中和抗体滴度.结果 当蛋白免疫剂量为8μg时,能够完全保护小鼠不受HPV假病毒的感染.小鼠免疫血清中的中和抗体水平较低,利用已建立的假病毒中和试验方法 检测不到血清中的中和抗体.而利用ELISA检测血清中的总抗体水平结果 显示,免疫血清中的总抗体水平与疫苗的保护效果之间存在对应关系,当抗体滴度大于等于1:25 000时,小鼠体内检测不到荧光信号,能够保护机体不受假病毒的感染.结论 HPV-58 L2 11~200 AA肽能够保护小鼠不受假病毒的感染,L2 11~200 AA肽具有较好的疫苗发展前景,其引发的总抗体水平可以作为评价保护效果的间接指标. 吴雪伶 崔俊生 孟淑芳 李保卫 张春涛 樊金萍 邵荣光 王佑春关键词:人乳头瘤病毒 假病毒 中和抗体 重组变构人肿瘤坏死因子相关的凋亡诱导配体诱导U937细胞凋亡的实验研究 目的:肿瘤坏死因子相关的凋亡诱导配体(TNF-related apoptosis-inducing ligand,TRAIL)是新近发现的 TNF超家族成员,它能选择性的诱导肿瘤细胞和转化细胞发生凋亡,本文探讨重组变构人... 张学军 温丽 潘峻 王福旭 罗建民 董作仁 杨世芳文献传递 谷草转氨酶和乳酸脱氢酶的检测在早期评估抗肿瘤干预措施临床疗效中的应用 本发明公开了一种早期评价抗肿瘤干预措施临床疗效的方法,包括在肿瘤患者接受至少1次抗肿瘤干预措施后,通过检测该患者血液中肿瘤损伤生物标志物的含量,确定是否相对于治疗前升高来评估该抗肿瘤干预措施的疗效。所述肿瘤损伤生物标志物... 杨世方 崔俊生 韦鹏 郑向君 朱冰文献传递 一种抗肿瘤药物 本发明公开了一种抗肿瘤药物。本发明涉及一种抗肿瘤的药物,特别是涉及一种以重组蛋白为活性成分的抗肿瘤药物。本发明的目的是提供一种有效的治疗肿瘤的药物。一种治疗肿瘤的药物,它的活性成分是具有序列表中序列2的氨基酸残基序列或将... 朱冰文献传递 重组变构人TRAIL对非小细胞肺癌细胞的体外抑制作用 被引量:3 2005年 目的研究重组变构人TRAIL(rmhTRAIL)对人非小细胞肺癌(NSCLC)细胞和人正常细胞的生长、抑制作用及其与化疗药的联合作用。方法采用四唑盐(MTT)和集落形成试验法检测细胞的生长,并观察了与顺铂(DDP)联合应用对细胞生长的作用。结果rmhTRAIL对多种NSCLC细胞有显著的抑制作用,而对人正常细胞无影响;rmhTRAIL与DDP联合应用具有协同或增强对NSCLC细胞的抑制作用,而且对正常人细胞不表现毒性。结论rmhTRAIL是一种安全、有效的抗肿瘤生物制品。 唐艳旻 张丽梅 杨世方 朱冰 崔俊生 贾慧关键词:非小细胞肺癌细胞 体外抑制作用 TRAIL 集落形成 C细胞 人细胞 重组人淋巴毒素α的高密度发酵、复性和纯化 2006年 目的建立和优化重组人淋巴毒素α(rhLT-α)工程菌高密度发酵方法以及目的蛋白的复性和纯化方法,得到高纯度的重组人淋巴毒素α。方法高密度发酵rhLT-α工程菌,超声破碎细胞提取包涵体,经过复性后,用DEAE Sepharose FF,Phenyl Sepharose FF(LS)进行分离纯化。结果重组人淋巴毒素α以包涵体形式表达,经过破碎离心收集包涵体,洗涤后包涵体纯度达到85%以上。复性后,经两步纯化,最终目的蛋白纯度达98%以上。活性达6×108U/mg以上。结论建立了高效简便的淋巴毒素生产工艺,为淋巴毒素的规模生产打下了基础。 李道锋 张建军 贾慧 杨世方 崔俊生关键词:淋巴毒素Α 高密度发酵 复性 纯化 重组变构人TRAIL联合柔红霉素对白血病细胞诱导凋亡作用及其机制的研究 被引量:6 2006年 为了研究重组变构人肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(recombinanat mutant human TRAIL,rmhTRAIL)单用及与柔红霉素(DNR)联合应用对白血病细胞株U937、K562的诱导凋亡作用及其机制,以正常人胚肺成纤维细胞株MRC-5作对照,采用MTT法检测体外培养的U937、K562白血病细胞株在rmhTRAIL单用和联合DNR作用下增殖的抑制效应;用半定量逆转录多聚酶链反应(RT-PCR)法检测DNR处理前后白血病细胞TRAIL死亡受体和诱杀受体的mRNA表达水平。结果表明rmhTRAIL对白血病细胞株U937、K562有较明显的抑制增殖作用,DNR与TRAIL联合对抑制肿瘤细胞具有协同性,与各药单独使用比较均有显著差异(P<0.05);经DNR作用后,U937、K562细胞的死亡受体DR4、DR5水平上调,而两种诱杀受体DcR1、DcR2表达未受影响。结论在体外rm-hTRAIL单用或与DNR联用均能明显抑制白血病细胞增殖,rmhTRAIL与DNR对白血病细胞的杀伤有协同作用,其诱导机制可能与U937、K562细胞死亡受体DR4、DR5表达水平上调有关。 张学军 温丽 王福旭 罗建民 潘崚 刘小军 杜行严 董作仁 杨世芳关键词:U937细胞 K562细胞 柔红霉素