伊犁出入境检验检疫局
- 作品数：87 被引量：237H指数：8
- 相关机构：伊犁职业技术学院新疆农业大学新疆出入境检验检疫局更多>>
- 发文基金：国家质检总局科技计划项目国家自然科学基金新疆维吾尔自治区自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生理学生物学更多>>
- 双芽巴贝斯虫TaqMan实时荧光PCR检测方法的建立被引量：1
- 2014年
- 根据双芽巴贝斯虫（Babesia bigemina）18SrRNA基因的保守序列,设计特异性引物和TaqMan探针,建立了检测双芽巴贝斯虫的实时荧光PCR方法。该方法灵敏度高,最小检出量为1.1×101 copies/μL的标准质粒,比常规PCR灵敏1 000倍;重复性好,组内和组间重复性试验的变异系数分别为0.21%~1.14%和0.31%~1.50%,均小于2%;特异性强,对牛常见的其他两种血液原虫和健康血液无交叉反应。用建立的实时荧光PCR和常规PCR分别对30份临床样品进行检测,实时荧光PCR和常规PCR的检出率分别为30%和16.7%。结果表明,本研究建立的荧光TaqMan实时荧光PCR方法可以灵敏、准确、快速检测双芽巴贝斯虫感染,将为蜱传牛梨形虫病的流行病学调查和防制提供新的方法。
- 刘启生王振宝曹雯丽杜晓杰哈森刘绪斌巴音查汗
- 关键词：双芽巴贝斯虫实时荧光PCRTAQMAN探针
- 新疆阿克苏地区牛病毒性腹泻病血清流行病学调查被引量：2
- 2015年
- 为了解牛感染病毒性腹泻病的流行情况,采自阿克苏地区辖内9个县市散养牛共300 份血清进行了抗体检测.结果显示,有83 份血清呈抗体阳性,阳性率介于20%-35%之间,总体阳性率为27.6%.证明BVDV在阿克苏地区存在不同程度的感染和流行,调查结果为BVD的防控提供了有效的技术支持.
- 李佳王振宝侯芳白正辉何宗霖
- 关键词：抗体
- 一步法逆转录重组酶聚合酶常温扩增(RT-RPA)技术检测菜豆荚斑驳病毒被引量：7
- 2018年
- 菜豆荚斑驳病毒(bean pod mottle virus,简称BPMV)是我国进境植物检疫性有害生物,建立快速灵敏的一步法逆转录重组酶聚合酶扩增(reverse transcription-recombinase polymerase amplification,简称RT-RPA)技术用于对BPMV的检测。根据BPMV基因组的保守序列,设计重组酶聚合酶扩增(recombinase polymerase amplification,简称RPA)技术特异性引物,对BPMV、南方菜豆花叶病毒(southern bean mosaic virus,简称SBMV)、大豆花叶病毒(soybean mosaic virus,简称SMV)、南芥菜花叶病毒(arabis mosaic virus,简称Ar MV)及烟草环斑病毒(tobacco ringspot virus,简称TRSV)共5种病毒进行RT-RPA特异性验证;并设计5个模板浓度梯度,以验证RT-RPA方法的灵敏性。结果表明,建立的RT-RPA检测方法能够从BPMV样品中检测到198 bp的特异性条带,且仅需在40℃下恒温反应40 min,不需要特殊的仪器设备;特异性验证试验表明,除BPMV能检测到特异性条带外,其他4种病毒SBMV、SMV、Ar MV、TRSV均未检测到特异性条带,证明该方法特异性好; RT-RPA检测BPMV的灵敏度达到10-4稀释度,说明所建立的RT-RPA方法灵敏性高。综上所述,建立的RT-RPA方法检测BPMV特异性强、灵敏度高,无需特殊的仪器设备,适合实验室或者现场快速检测。
- 张永江魏霜袁俊杰乾义柯李桂芬魏梅生
- 关键词：菜豆荚斑驳病毒植物检疫
- 马泰勒虫二温式PCR检测方法的建立及应用被引量：4
- 2014年
- 为给马泰勒虫提供特异、快速、敏感的检测方法,根据马泰勒虫18S rRNA保守基因序列,设计了一对特异性引物,建立马泰勒虫二温式PCR检测方法。扩增出的目的片段大小为139 bp,经克隆、测序分析,与GenBank上登录的序列相似性为100%。该方法与其他虫种无交叉反应,具有一定的灵敏性和特异性。应用所建立的方法对采集的30份疑似病例全血样品进行检测,阳性率为33.3%,相比之下相同样品的血液涂片检查的阳性率为13.3%。与三温PCR方法比较减少了反应时间的消耗,提高了检测效率,该方法对马泰勒虫病的早期(潜伏感染期)检测、诊断具有实际应用价值。
- 李佳李永畅王振宝张杨巴音查汗
- 关键词：RRNA二温式PCR
- 影响食品合格率的多种因素被引量：2
- 2001年
- [目的]探讨食品合格率与多种影响因素的关系,以克服不利因素,提高食品质量。[方法]以1995年～1999年各类食品监测结果为材料,结合分析各类食品的合格率。[结果]食品的合格率与样品的抽样方式、样品的构成、样本量、检验指标项次密切相关。[结论]目前采用食品样本合格份数与总份数的比率评价食品合格程度尚欠合理性,建议采用经构成比标化后统计食品合格率。
- 杨屹
- 关键词：食品合格率
- 草原革蜱和边缘革蜱的分子生物学鉴定被引量：9
- 2013年
- 本研究旨在建立草原革蜱和边缘革蜱的分子生物学鉴定方法,并探讨其系统发生关系。在新疆从动物体表采集寄生蜱,形态学鉴定后,PCR扩增获得2种革蜱的16S rRNA及线粒体色素氧化酶亚基Ⅰ(COⅠ)基因序列,测序后进行同源性分析。用Mega 5.0和Mrbayes 3.2软件分别构建系统进化树,草原革蜱16S rRNA序列与GenBank数据库中已知草原革蜱16S rRNA序列聚类,而边缘革蜱COⅠ序列与GenBank数据库中已知边缘革蜱COⅠ序列聚类,与形态学鉴定结果一致。本研究结果表明,在传统形态学分类的基础上,结合分子生物学鉴定方法能简易、准确鉴定草原革蜱和边缘革蜱。
- 吕继洲王振宝袁向芬吴绍强
- 关键词：RRNA草原革蜱分子鉴定
- 进境哈萨克斯坦油葵中向日葵黑茎病菌的检疫鉴定被引量：1
- 2015年
- 依据出入境检验检疫行业标准SN/T 3174-2012,对新疆口岸进境的哈萨克斯坦油葵中的向日葵黑茎病菌进行检疫鉴定。挑取油葵样品中的可疑病种子和植株残体作为实验材料,分别提取其DNA,用向日葵黑茎病菌特异性检测引物LEPB/LEPF对挑取的样品进行PCR检测初筛,初筛结果阳性者,进行病原分离培养。对分离获得的阳性纯培养菌株的菌落、孢子形态进行观察,PCR检测及致病性测定,最终确定其为向日葵黑茎病菌。本研究从进境哈萨克斯坦油葵中分离到检疫性病原菌,新疆周边口岸应进一步加强疫情监测与调查。
- 王罛张小菊张祥林张伟乾义柯李亚伟张瑜孙燕飞
- 重组酶聚合酶扩增技术(RPA)检测葡萄卷叶伴随病毒2号
- 利用重组酶聚合酶扩增技术检测葡萄卷叶伴随病毒2号(Grapevine leaf-rollassociated virus 2,GLRaV-2)。根据GLRaV-2的HSP70基因保守序列,设计RPA特异性引物,建立GLR...
- 张永江魏霜黄帅刘建华任娇乾义柯林春贵
- 关键词：RPA
- 文献传递
- 伊宁市园林绿化植物资源调查研究被引量：3
- 2015年
- 为摸清新疆伊宁市区园林绿化植物资源种类、组成等情况,于2013年3月至2014年11月对伊宁市园林绿化植物资源进行了调查。结果表明,伊宁市园林绿化植物共有43科88属122种,其中乔木53种,灌木27种,草本39种,藤本4种。对其观赏特性、园林用途、乡土植物应用、种类配置等进行分析,提出相应建议。
- 梁巧玲张娜陆平
- 关键词：园林绿化植物种类生活习性观赏特性乡土植物
- 蜜蜂幼虫芽胞杆菌金属蛋白酶基因的原核表达及多克隆抗体的制备被引量：1
- 2018年
- 克隆蜜蜂幼虫芽胞杆菌金属蛋白酶基因PLMP,构建其原核表达载体后进行重组蛋白的表达及纯化,接种公兔制备多克隆抗体,以期为研究幼虫芽胞杆菌快速检测方法奠定基础。用PCR方法扩增幼虫芽胞杆菌PLMP基因,扩增产物克隆至表达载体pGEX-4T-1并转化至E.coliBL21(DE3)感受态中。经不同的诱导时间、IPTG浓度诱导表达PLMP重组蛋白,经SDS-PAGE电泳切胶回收纯化目的蛋白。用目的蛋白对公兔进行4次免疫后,采集血清制备多抗。PCR扩增得到1 242bp的PLMP基因片段;构建原核表达载体pGEX-4T-1-PLMP,经终浓度0.8mmol/L IPTG、37℃诱导表达5h得到分子质量为70ku目的蛋白;用目的蛋白免疫公兔得到的多抗经间接ELISA检测效价达到1∶12 800,Western blot检测出现条带,证明所制备的多抗能够用于PLMP抗原的检测。研究结果构建了表达幼虫芽胞杆菌金属蛋白酶基因PLMP的原核载体,获得了PLMP蛋白,制备了兔抗PLMP多克隆抗体,为建立幼虫芽胞杆菌快速检测方法奠定了基础。
- 葛婷何晓杰叶尔保勒阿斯喀.夏热甫汉雷程红王振宝
- 关键词：原核表达多克隆抗体
