中国食品药品检定研究院生物制品检定所
- 作品数：84 被引量：225H指数：9
- 相关作者：陈玉琴王盼刘静李东更多>>
- 相关机构：军事医学科学院生物工程研究所首都医科大学附属北京友谊医院北京热带医学研究所沈阳药科大学无涯学院更多>>
- 发文基金：国家科技重大专项国家高技术研究发展计划国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学农业科学经济管理更多>>
- 重组药物生产用细胞基质的质量控制
- 重组细胞基质是生物技术产品生产的第一道防线,它的安全性及正确性与终产品的质量息息相关,因此,开展细胞基质质量控制新技术研究、促进并提高生物技术研发及生产企业的质量控制的技术水平是提高产品生物技术产品安全性的重要措施。本文...
- 孟淑芳
- 关键词：细胞基质风险分析
- 基于免疫调控功能的间充质干细胞生物学有效性质量评价策略被引量：13
- 2016年
- 间充质干细胞(mesenchymal stem cell,MSC)是一类具有自我更新/多向分化潜能和独特免疫调控功能的成体干细胞,并已成为近年来临床研究中发展最为迅速的干细胞类型。由于其独特的免疫调控功能,MSC已被用于治疗多种类型的免疫异常或炎症反应失控所致的疾病。MSC在不同类型的炎症环境中,可由静息状态转变成激活状态,通过细胞间相互作用和分泌可溶性免疫调控因子,调节多种免疫细胞的增殖、分化、活化以及炎症因子的分泌功能。MSC的免疫调控功能是其临床应用中重要的生物学有效性质量属性,对这一质量属性的有效评价,是指导MSC产品研发及临床应用中最为相关的质量控制内容之一。本文综述了近年来人们对MSC免疫调控功能的认识及其与临床应用的相关性,在此基础上提出了针对治疗性MSC产品免疫调控功能的评价策略,为在我国建立和完善MSC生物学有效性评价体系奠定基础。
- 张可华纳涛韩晓燕袁宝珠
- 关键词：间充质干细胞免疫调控细胞治疗
- 产气荚膜梭菌核酸检测试剂国家参考品的研制
- 2023年
- 目的研制产气荚膜梭菌(CP)核酸检测试剂国家参考品。方法通过对5株产气荚膜梭菌和7株非产气荚膜梭菌的菌种检定、培养、灭活及分装,组建产气荚膜梭菌核酸检测试剂国家参考品。对参考品进行样品均匀性以及稳定性评估验证,组织3家实验室协作标定。结果参考品由5份阳性参考品、7份阴性参考品、3份重复性参考品以及1份最低检出限参考品样本组成,均匀性和稳定性良好。协作标定结果显示:5份阳性参考品检测结果均为产气荚膜梭菌阳性;7份阴性参考品检测结果均为产气荚膜梭菌阴性;重复性参考品检测结果全部为气荚膜梭菌阳性(n=10,CV≤5.00%);参考品最低检出限为1.0×10^(3)个菌/mL。结论建立了产气荚膜梭菌核酸检测试剂国家参考品,建立的国家参考品可用于产气荚膜梭菌核酸检测试剂盒的质量控制。
- 刘茹凤陈驰石继春李康王斌王春娥叶强李茂光
- 关键词：产气荚膜梭菌核酸检测国家参考品
- c-Myb截短突变体的构建及其对c-Myc蛋白表达的调节
- 2014年
- 目的：为了研究c-Myb蛋白各结构域的功能，构建c-Myb的6种截短突变体c-Myb-1~c-Myb-6的真核表达载体，测定不同突变体对c-Myc蛋白表达的影响。方法：以野生型c-Myb为模板，PCR扩增c-Myb-1~c-Myb-6片段，分别克隆到pcDNA3.0-FLAG载体，Western印迹检测克隆载体在293T细胞内的表达；将上述载体与野生型c-Myb转染乳腺癌细胞株MCF-7，检测其对c-Myb下游基因c-Myc表达的影响。结果：构建了c-Myb-1~c-Myb-6表达载体，与野生型c-Myb相比，c-Myb-1、c-Myb-4、c-Myb-5均能够促进MCF-7细胞中c-Myc的表达，而c-Myb-2、c-Myb-3、c-Myb-6则不能。结论：该研究为进一步探讨c-Myb在乳腺癌中的功能奠定了基础。
- 秦玺程龙饶春明高凯杨琦史新昌徐小洁叶棋浓王军志
- 关键词：C-MYB真核表达载体C-MYC
- 糖基化基因修饰对重组蛋白表达及活性的影响被引量：5
- 2018年
- 蛋白质翻译后修饰是蛋白质结构及功能成熟过程中的重要组成部分,其中的一种重要的翻译后修饰为蛋白质糖基化。许多影响细胞、组织、器官乃至生命的内源性蛋白或外源性重组蛋白(如治疗性重组蛋白或单克隆抗体),在细胞内成熟过程中几乎均会发生蛋白质糖基化修饰,而糖基化修饰的质和量的差异,可能会影响相关蛋白的表达水平、结构及功能。随着治疗性重组蛋白的需求和应用的不断发展,已出现了以改造治疗性重组蛋白为目的的蛋白质糖基化工程技术。该技术主要通过改变用于表达重组蛋白的宿主细胞中参与糖基化修饰的关键酶蛋白(糖苷酶及糖基转移酶),来影响重组蛋白的糖基化,从而改变重组蛋白的表达水平、结构及功能。本文介绍了重组蛋白糖基化修饰的类型及其生物学作用,重组蛋白糖基化修饰改造的策略,其中重点介绍了改变糖基化相关酶蛋白基因的活性的策略,经证明目前该糖基化工程策略是影响重组蛋白的表达及活性十分有效的方式。
- 周小菊纳涛马宁宁袁宝珠
- 关键词：重组蛋白翻译后修饰活性
- 《中国药典》中标准菌种质控新方法的研究被引量：3
- 2019年
- 目的 研究《中华人民共和国药典》(简称《中国药典》)纳入的标准菌种质控新方法,并评价不同批号标准菌种的质量稳定性。方法 对脉冲场凝胶电泳(PFGE)技术进行比较研究,同时整合16SrRNA基因序列分析、多位点序列分型和基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱等质控新方法,进行标准菌种质控新方法的建立,并对标准菌种的质量进行评价。结果 形成了适用于《中国药典》中标准菌种的方法,并通过整合的质控新方法对不同批号的标准菌种进行评价,结果显示,菌种质量稳定,遗传信息无改变。同时,建立了标准菌种16SrRNA基因标准序列、PFGE标准指纹图谱和标准基因型。结论 标准菌种质控新方法的研究,为更加全面、深入地评价标准菌种的质量提供了依据;建立的标准菌种质量控制体系及标准菌种质控鉴定信息,为标准菌种持续的质量控制奠定了重要的参比信息基础。
- 徐潇石继春王春娥梁丽郑锐孙文媛龙新星陈翠萍叶强
- 关键词：中国药典质控方法脉冲场凝胶电泳多位点序列分型基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱
- 非洲绿猴肾细胞中猪圆环病毒1型的检测被引量：1
- 2017年
- 目的建立轮状病毒疫苗污染事件中的外源因子猪圆环病毒1型（porcine circovirus type1，PCV1）感染非洲绿猴肾细胞（Vero细胞）的检测方法。方法培养感染PCV1的Vero细胞6d后，通过定性PCR、定量PCR、电子显微镜（电镜）检查和原位杂交检测PCV1的复制与增殖。结果从感染PCV1的Vero细胞培养物提取的DNA，其PCR扩增产物琼脂糖凝胶电泳可见特异性条带；定量PCR检测显示，感染6d后病毒总拷贝数是感染前的794．3倍；定性和定量PCR的最低检出浓度均为10^2.0拷贝／ml；电镜观察到PCV1特征性形态病毒颗粒；原位杂交检测到出现深色阳性信号的PCV1阳性细胞。结论PCV1感染Vero细胞后的复制增殖可以通过上述方法进行检测。
- 刘艳于晴川杜加亮刘悦越李东高加梅范行良张韵祺赵荣荣国秦
- 关键词：VERO细胞显微镜检查原位杂交
- 生物制品中猪细环病毒污染检测方法的建立和初步应用被引量：3
- 2015年
- 目的：建立生物制品中猪细环病毒（ Torque teno sus virus，TTSuV）污染的检测方法，并进行方法学分析及初步的应用。方法针对TTSuV保守序列设计引物和探针，建立荧光PCR方法，对方法的特异性、线性、精密度、最低检测限等参数进行验证，并对试验样本对检测的干扰性进行分析。利用该方法对猪全血样品、生产用细胞及轮状病毒疫苗样品进行检测，通过建立TTSuV分型检测的PCR方法对阳性样品进行分型。结果荧光PCR法的特异性较好，与不同种属的细小病毒、猴SV40病毒及猪圆环病毒无明显的交叉反应，TTSuV1和TTSuV2荧光PCR分别在109～103拷贝／μl和109～102拷贝／μl范围内线性较好，R2值达到0．993以上，TTSuV1和TTSuV2的最低检测限分别为1×103拷贝／μl和1×102拷贝／μl，试验内和试验间的Ct的精密度CV值均小于7％，试验内病毒拷贝数的CV值小于25％，试验间CV值小于45％。细胞样品成分对病毒检测无明显的干扰性。对20份猪全血样品进行检测，8份为阳性，其中1份为TTSuV1阳性，4份为TTSuV2阳性，3份为TTSuV1／2混合感染。 TTSuV1和TTSuV2型与标准株序列同源性分别为98％～99％和98％。对细胞样品和轮状病毒疫苗进行检测，结果均为阴性。结论成功建立了TTSuV荧光PCR检测法，能够用于生物制品TTSuV污染的检测，进一步提高了生物制品的安全性。
- 吴雪伶赵龙冯建平樊金萍赵翔孟淑芳
- 关键词：荧光PCR细胞
- 基于甲型流感病毒血凝素及联用其他保守表位的通用流感疫苗研究进展
- 2023年
- 流感病毒每年造成大量感染及死亡病例,对人类健康构成重大威胁,接种疫苗是预防流感病毒感染的最有效措施。然而,目前的季节性流感疫苗只能预防密切匹配的流行毒株,即使有了广泛的监测和每年的重新制定,每年更新的疫苗仍然比快速演变的病毒落后一步,往往导致匹配度不高或疫苗效力低。由于甲型流感病毒的进化变异相对复杂,利用一系列创新技术开发通用流感疫苗对流感病毒提供广泛和持久的保护,是预防流感流行的新思路和新手段。本文对近3年来以血凝素(hemagglutinin,HA)为靶位的通用疫苗研究进行全面整理,综述了基于流感病毒全HA、HA茎部、串联HA和其他保守表位的通用疫苗设计方法及其在疫苗研究中取得的最新进展,同时比较了不同技术优劣和免疫程序及策略的影响等,并强调了有待克服的潜在挑战,为成功开发通用疫苗提供经验和借鉴。
- 邓玉莹刘书珍李岚舒赵晨燕黄维金
- 关键词：甲型流感病毒血凝素
- 百白破疫苗新型佐剂的研究进展被引量：1
- 2019年
- 百白破疫苗作为中国婴幼儿计划免疫的重要组成部分,可以同时预防由百日咳杆菌、白喉杆菌和破伤风梭菌感染引起的疾病。百白破疫苗中所含抗原需经脱毒处理,需添加佐剂以提高其免疫原性。目前已上市的百白破疫苗基本以铝佐剂为主。多项研究表明,铝佐剂在免疫持久性和安全性等方面存在一定局限。现就近年来对百白破疫苗新型佐剂的研究进展进行汇总,并为未来新型百白破疫苗的应用提供科学依据。
- 李喆马霄
- 关键词：百白破疫苗免疫铝佐剂新型佐剂
