天津医科大学基础医学实验教学中心
- 作品数：36 被引量：115H指数：5
- 相关作者：孙亚楠张荣信更多>>
- 相关机构：天津大学材料科学与工程学院北京大学公共卫生学院北京大学公共卫生学院生育健康研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金全国统计科学研究计划项目国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学文化科学经济管理更多>>
- 亚细胞结构内蛋白与蛋白相互作用的质谱分析方法研究
- 蛋白质相互作用是蛋白分子发挥生物功能的基础,同一个蛋白可以通过与不同的蛋白发生相互作用而产生多种生理作用。免疫沉淀结合质谱分析(IP-MS)由于通量高、实验简便、可以对未知蛋白进行鉴定等优势已经成为最为常用的测定蛋白相互...
- 肖明明高华君陈瑞冰
- 关键词：蛋白质相互作用SILAC液质联用
- MLH1R217C/BRAFV600E突变型家族性甲状腺乳头状癌永生化细胞系的建立及鉴定被引量：1
- 2016年
- 目的建立家族性甲状腺乳头状癌(FPTC)永生化细胞系,为研究家族性非髓样甲状腺癌(FNMTC)提供新的途径。方法选取FPTC患者的肿瘤标本,采用消化法分离原代细胞。使用改良的DMEM/F12培养基,添加促甲状腺激素(TSH)、三碘甲状腺原氨酸(T3)、表皮细胞生长因子(EGF)及氢化可的松等进行培养。在原代细胞早期分2种方式导入外源基因SV40T/TERT用于诱导永生化。利用RT-PCR检测甲状腺过氧化物酶(TPO)、甲状腺球蛋白(TG)、促甲状腺激素受体(TSHR)、钠/碘共同转运体(NIS)等基因的表达,同时利用免疫荧光技术检测TPO及磷脂酰肌醇蛋白聚糖-3(GPC3)蛋白的表达。提取该患者外周血DNA,进行突变基因的检测。提取细胞基因组PCR扩增后测序,进行突变基因的检测。结果分离的FPTC原代细胞呈梭形或不规则多角形贴壁生长;细胞生长6个月,转染SV40T组(标记为FPTC-S)传代至p26,FPTC细胞传代至p23,转染SV40T+h TERT组(标记为FPTC-ST)传代至p19,细胞增殖能力较好;FPTC-S与FPTC-ST细胞均能够在基因水平稳定表达TPO、TG与TSHR;患者外周血中存在MLH1 R217C胚系突变;原代细胞存在BRAF V600E突变;原代细胞及永生化的细胞系中均存在MLH1 R217基因突变。结论本研究初步建立了FPTC永生化细胞系,且该细胞系中存在MLH1 R217C及BRAF V600E突变,该细胞系将为研究以上突变及其相互作用关系提供研究模型。
- 郝伟静于洋王青松赵丽叶艳董莉李健森孟祥睿运新伟高明
- 关键词：细胞培养技术永生化细胞系MLH1BRAF
- 肝肿瘤靶向的基因/药物纳米共载体系的研究
- <正>目的 PBAE作为一种新型的阳离子聚合物基因载体,具有合成简单、结构多样、可降解、细胞毒性低、转染效率高等优点。普鲁兰多糖是一种由出芽短梗霉发酵所产生的类似葡聚糖、黄原胶的胞外水溶性黏质多糖,其具有易溶于水、无毒无...
- 刘媛媛王银松张宁
- 关键词：肝肿瘤细胞去唾液酸糖蛋白受体肿瘤靶向普鲁兰多糖
- 羊布鲁氏菌omp25基因原核表达载体的构建与鉴定被引量：2
- 2012年
- 目的:利用PCR反应从羊布鲁氏菌基因组DNA中克隆omp25基因,并将其构建到原核表达载体pET-32a中。方法:试剂盒法提取羊布鲁氏菌基因组DNA,设计合适的引物,通过PCR反应从基因组中扩增外膜蛋白OMP25的编码基因(omp25)。将得到的基因片段连接到克隆载体pMD19-T的多克隆位点(MCS)中,将连接体pMD19-T-omp25转化感受态大肠杆菌DH5(并进行筛选和克隆扩增,提取质粒并进行酶切分析与序列测定。利用酶切与连接反应将目的基因(omp25)插入载体pET-32a的多克隆位点中,将连接体pET-32a-omp25转化感受态大肠杆菌DH5(并进行筛选和克隆扩增,提取质粒并进行酶切分析。结果:PCR扩增得到的基因片段与GenBank中已公布的羊布鲁氏菌omp25基因同源性为99%。酶切分析结果表明,omp25基因成功地插入载体pET-32a中。结论:成功地扩增得到了羊布鲁氏菌omp25基因并构建了携带该基因的重组原核表达载体pET-32a-omp25,为后续的研究提供了可靠的基础。
- 石艳春韩堃郑源强吴岩毕力夫
- 关键词：原核表达载体克隆
- AioIos通过抑制p66Shc促进肿瘤细胞的锚定非依赖性生长
- 目的探讨淋巴细胞特异性转录因子Aiolos在促进实体肿瘤细胞实现远端转移过程中的作用,及其发挥作用的机制。方法利用免疫组化实验研究临床肿瘤标本中Aiolos的表达水平并分析其与患者生存期间的相关性;利用Microarra...
- 李西川徐昭杜玮张真发赵秀兰马振毅孙保存姚智刘喆
- 关键词：肿瘤细胞非依赖性失巢凋亡P66SHC
- 诱导型狨猴肝纤维化模型的建立
- 2014年
- 目的:建立诱导型狨猴肝纤维化模型。方法:手术切除普通狨猴部分肝脏,通过腹腔注射二乙基亚硝胺(DENA-2.5 mg/kg),并利用体质量和肝功能检测、病理分析、免疫组化,胶原染色和B超小动物活体成像等手段进行监测。结果:手术切除肝脏促使狨猴肝脏再生,并伴随肥大和炎症反应;DENA药物诱导会引发与人类类似的肝脏炎症,肝脏胶原聚集和血管增生,最终导致狨猴肝脏纤维化。结论:手术切肝联合DENA化学诱导可以成功获得狨猴肝纤维化模型。
- 李萌乾王青松郭正隆尹海芳
- 关键词：肝纤维化二乙基亚硝胺肝切除
- 衔接蛋白p66Shc抑制小细胞肺癌细胞转移的机制研究
- 临床上肿瘤细胞的转移是导致肿瘤患者死亡的主要原因。正常的表皮细胞脱离依赖存活的贴附基质促发失巢凋亡（anoikis）,而可转移的肿瘤细胞绕过失巢凋亡途径是实现转移的关键事件之一。分布在黏着斑（focal adhesion...
- 刘喆马振毅
- 关键词：肿瘤转移失巢凋亡PRB
- KAT2B对脂肪细胞分化调控的分子机制研究
- 时文涛凌超焦红肖吕佳于萍魏凤江蔡春友李卫东
- DNA甲基化对花生四烯酸代谢通路间平衡的影响
- 目的花生四烯酸代谢在内皮细胞功能中起到重要作用,但DNA甲基化对其影响目前鲜有报道。本实验的目的是探索DNA甲基化对花生四烯酸代谢通路间平衡的影响。方法我们首先通过预测发现花生四烯酸代谢途径中的部分酶具有可发生甲基化的潜...
- 薛珊珊孙晓丽王春炅何金龙黄敬艾玎朱毅
- 关键词：代谢途径代谢通路甲基化DNA
- 基于“三方四体”的医疗保险费用控制策略研究被引量：10
- 2011年
- 目的:我国医疗保险制度不断完善和发展,但医疗费用的过快增长仍是我国面临的一个难点问题。医疗保险费用的增长除了受疾病模式、经济发展客观需要等合理因素影响外,其它不合理支出是造成费用增长的另一重要原因。方法:对目前我国医疗保险医疗费用快速增长的现象从"三方四体"方面进行了深入的原因分析。结果:提出供方、需方、保方以及政府在费用控制方面所应该采取的策略,如建议医疗保险费用的控制在以公益性为前提下,政府职能与商业保险相结合、完善费用控制的各个环节等。结论:医疗保险费用的合理控制对社会的稳定、持续发展有着非常重要的作用,需要社会各界的共同努力。
- 李长平柯慧崔壮魏凤江张亚黎马骏
- 关键词：医疗保险费用
