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河南省微生物工程重点实验室: 作品数：111 被引量：497H指数：11; 相关作者：刘安邦赵俊杰贾蕴莉贾蕴丽刘德海更多>>; 相关机构：河南省科学院中国科学院河南农业大学更多>>; 发文基金：河南省科技攻关计划国家自然科学基金河南省重大公益性科研项目更多>>; 相关领域：生物学农业科学轻工技术与工程化学工程更多>>

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黑曲霉β-甘露聚糖酶ManA耐热突变体的筛选被引量：3: 2022年; 为了改造黑曲霉(Aspergillus niger)来源的β-甘露聚糖酶ManA,获得耐热性高的突变体。利用易错聚合酶链式反应(PCR)技术对构建的表达质粒pGAPZαA-manA进行随机突变,将突变文库转化至毕赤酵母(Pichia pastoris)GS115,表达筛选耐热性高的突变体,并进一步对突变位点进行定点突变,筛选其他耐热性高的突变体。结果表明,ManA的H283R与H283K突变体相对于野生型在耐热性方面有显著提升,75℃加热30 min其相对酶活由26.66%分别提升至76.95%和83.57%;在pH 3.0~9.0的条件下,50℃保存24 h,H283K突变体与野生型的相对酶活均在90%以上,H283R突变体在pH 3.0时的相对酶活下降到了84.72%,两个突变体的最适温度、pH及比酶活与野生型没有明显差异。说明β-甘露聚糖酶ManA的283位组氨酸(H283)对其耐热性较为关键,将该位点突变为精氨酸(R)和赖氨酸(K)时,ManA的耐热性得到显著提升。; 李珊珊刘德海刁文涛陈晓飞权淑静; 关键词：甘露聚糖酶易错PCR 定点突变

多环芳烃降解菌的筛选及降解特性分析被引量：5: 2022年; 为了获得耐受各种不良环境的多环芳烃(PAHs)降解菌,利用多环芳烃(菲和芘)、重金属(Cu^(2+)、Cr^(6+))以及氮源缺乏培养基从南阳石油污染土壤中分离筛选一株耐受不良环境的菲芘降解菌,通过形态学特征和分子生物学方法鉴定菌株,并研究菌株对重金属Cr^(6+)和Cu^(2+)、氮源缺乏及酸碱的耐受程度,进一步探究在这些不良环境下菌株对多环芳烃菲和芘的降解效果。结果表明,菌株属于根瘤菌属,命名为F3-1。在液体培养基中,菌株F3-1对重金属Cr^(6+)和Cu^(2+)的耐受质量浓度均为20 mg/L;在氮源缺乏的情况下,菌株能够正常生长;菌株F3-1在pH 5.0和pH 7.4环境下均可以正常生长;菌株F3-1在不良环境下对多环芳烃菲和芘均有很好的降解效果,5 d后在pH 7.4条件下对菲(50 mg/L)的降解率为35.54%,在pH 5.0条件下对芘(50 mg/L)的降解率为53.43%。; 甄静李磊王继雯杨文玲杜志敏李亮亮巩涛; 关键词：降解根瘤菌多环芳烃

一株基因克隆干扰菌的鉴定及其发酵液降解DNA活性分析: 2016年; 旨在寻找导致基因克隆失败的原因,检测整个电泳环境中是否存在对DNA有强降解力的菌株。依据菌体形态,革兰氏反应以及16S rDNA序列对DNA降解菌株进行鉴定,琼脂糖凝胶电泳分析菌株对DNA的降解活性。结果显示,从DNA电泳槽中分离到了一株菌,革兰氏染色鉴定为阴性菌,对该菌进行液体培养,利用质粒pUC19作为底物,检测该菌发酵液对DNA的降解能力,发现该菌发酵液能够迅速并彻底地降解DNA,其最佳降解温度为45℃,将该菌命名为DD(DNA degrading)。对该菌的16S rDNA进行测序比对后,发现其与粘质沙雷氏菌(Serrtia marcescens)的16S rDNA序列同源性高达100%。结合菌体形态,革兰氏反应以及16S rDNA序列结果,DD菌株为一株粘质沙雷氏菌,DNA降解活性分析显示其具有很强的DNA降解能力。; 刁文涛王雪妍陈晓飞冯菲宁萌周伏忠; 关键词：DNA降解粘质沙雷氏菌

固定化菌株在土壤中的繁殖释放及性能分析被引量：1: 2016年; 不同条件下固定化菌株在土壤中的释放情况存在差异,本试验测定固定化枯草芽孢杆菌在不同条件土壤中的释放及其降解特性。设定不同温度、水分、pH测定固定化枯草芽孢杆菌在灭菌土壤中的释放情况,并分别测定菌株的固氮、解磷、解钾性能。结果表明：固定化菌株在温度35℃和40℃、含水量为50 m L/100 g、pH 5-8时均能大量繁殖释放,固定化后不同温度和水分条件不影响其降解特性。该研究结果为固定化菌株在农业复合微生物肥料上的应用提供理论基础。; 甄静李冠杰王继雯杨文玲巩涛慕琦; 关键词：固定化水解氮有效磷速效钾

有机磷降解菌的分离筛选及初步鉴定被引量：12: 2011年; 目的:从不同根系土壤分离筛选高效降解有机磷的细菌.方法:通过平板法进行初筛,根据水解圈直径和菌落直径比值大小筛选到水解圈直径和菌落直径比值较大的菌株,进一步通过液体摇瓶培养复筛,对其解磷能力进行了测定,并通过形态特征、生理生化特性和16S rDNA序列测定等一系列试验对其进行鉴定.结果:分离纯化出10株解磷菌,经平板法初筛出6株水解圈直径和菌落直径比值较大的菌株,最后复筛出1株分解有机磷能力较强的菌株XK-1,解磷能力达22.072mg/L.该菌株鉴定为枯草芽孢杆菌.结论:成功分离出一株解有机磷能力较强的枯草芽孢杆菌XK-1.; 王继雯甄静谢宝恩刘莹莹李冠杰; 关键词：有机磷解磷菌

一株具有黄曲霉毒素B1降解功能的食醚红球菌的分离鉴定被引量：5: 2017年; 通过以香豆素为唯一碳源和能源的培养基进行菌株筛选,从土壤中获得一株能够降解黄曲霉毒素的菌株Adt.16S rDNA序列及6-磷酸葡萄糖脱氢酶FGD基因序列用以对菌株进行分子生物学鉴定,薄层层析(TLC)和ELISA法用来检测该菌株对香豆素和黄曲霉毒素B1(AFB1)的降解活性.研究结果表明,菌株Adt的16S rDNA及FGD序列与食醚红球菌(Rhodococcus aetherivorans)的相应序列高度同源,为一株食醚红球菌(R.aetherivorans),TLC及ELISA结果显示其对香豆素和AFB1均有降解活性,其含有的FDR家族的还原酶很可能直接发挥这一活性.; 王雪妍陈晓飞周伏忠冯菲刁文涛; 关键词：黄曲霉毒素香豆素

灵芝免疫调节蛋白LZ-8及云芝免疫调节蛋白FIP-tvc对几种癌细胞系的抑制活性检测: 2019年; 在体外培养的人非小细胞肺癌A549细胞、人胃腺癌BGC-823细胞、人结肠癌HCT116细胞、人肝癌Hep3B细胞、人宫颈癌Hela细胞中加入不同浓度的酵母异源表达的LZ-8或FIP-tvc,培养24h后显微镜下观察细胞形态变化,并用CCK8试剂盒检测细胞存活率,以用来检测灵芝免疫调节蛋白LZ-8及云芝免疫调节蛋白FIP-tvc对几种癌细胞生长抑制能力.结果显示,LZ-8和FIP-tvc在5~10μg/mL浓度时使A549、BGC-823、Hela和Hep 3B细胞贴壁性变差,且CCK8结果显示前3种细胞的存活率有不同程度的降低(80%~95%存活率),而在20μg/mL浓度时FIP-tvc对Hep 3B细胞的存活率开始有明显抑制效果(89%存活率),但对HCT116细胞的形态无影响,对其存活率也无抑制作用.; 王雪妍周伏忠向凌云陈晓飞宁萌刁文涛; 关键词：抑癌活性

趋磁螺菌AMB-l磁小体合成相关基因的克隆及功能分析: 2009年; 为了更清楚的了解趋磁螺菌产磁小体的合成机理和调节途径,用Tn5转座子诱变的方法筛选得到了2株磁小体合成降低的突变株,并克隆了突变株中被插入失活的基因,分别为编码ABC型Fe3+转移系统中的离子结合蛋白的amb3385基因和功能未知的amb3672基因.互补实验表明携带amb3385和amb3672基因的广宿主载体可以不同程度地恢复突变株中磁小体的合成,证明了D.Schüler关于磁小体合成假说的第一个步骤,即Fe3+从胞外向经由Fe3+转运蛋白运输至了胞内.由于amb3672基因比对时未发现特殊相似基因,其功能尚需进一步研究.; 谢宝恩王继雯慕琦周伏忠陈国参

高效根结线虫生防真菌筛选及其性能研究被引量：6: 2021年; 为了获得具有防治根结线虫作用的菌株,采用几丁质平板透明圈初筛和离体拮抗试验复筛的方法,得到一株具有生防潜力的真菌菌株SFC-3。通过形态学特征观察和真菌内转录间隔区序列(Internal transcribed spacer,ITS)分析鉴定,确定菌株SFC-3为棘孢木霉(Trichoderma asperellum),其几丁质酶活为2.07 U/mL。根结线虫虫卵寄生实验和二龄幼虫致死率实验表明:菌株SFC-3对虫卵的寄生率最高达到78.86%,高于SFC-1、SFC-22等其他9株菌,在第7天时对根结线虫虫卵孵化的相对抑制率最高达到96.51%,对二龄幼虫的校正死亡率达到93.37%。通过筛选抗根结线虫菌株并研究了其生防效果,证实了菌株SFC-3有比较优秀的抗根结线虫性能。; 李磊赵俊杰赵俊杰刘莹莹甄静陈国参陈国参慕琦; 关键词：根结线虫种质资源生物防治

一株纳豆激酶高产菌株的固态发酵参数优化: 本研究在对实验室分离的纳豆激酶产生菌进行菌株鉴定及其酶学性质研究的基础上,对影响菌株固态发酵产酶的工艺参数进行了优化研究。实验结果表明,发酵温度、时间、含水量、pH、碳氮比及无机盐对纳豆激酶酶活都有一定影响,接种量和表明...; 周伏忠陈晓飞陈国参谢宝恩宁萌; 关键词：固态发酵酶学性质工艺参数; 文献传递

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