暨南大学生命科学技术学院发育与再生生物学系
- 作品数：18 被引量：78H指数：4
- 相关作者：邹飞雁张春雪徐放杨海婷廖翠玲更多>>
- 相关机构：中国科学技术大学生命科学与医学部安徽医科大学口腔医学院中国科学院生物物理研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金广东省科技计划工业攻关项目中央高校基本科研业务费专项资金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学农业科学文化科学更多>>
- 慢病毒干扰小鼠附睾特异的meClps基因可降低精子的运动能力被引量：3
- 2014年
- 目的筛选能有效干扰小鼠附睾特异的类辅脂酶meClps基因表达的RNA靶点,并通过慢病毒介导的RNAi敲低meClps表达后分析对精子运动的影响。方法构建真核表达载体pDsRed2.0-C1-meClps中并转染NIH-3T3细胞,用meClps抗血清检测meClps蛋白的表达。针对meClps基因的序列设计并合成3对靶向干扰meClps表达的寡核苷酸序列,构建重组慢病毒载体pRNAT-U6.2/lenti-RNAi-251、224和286。将重组慢病毒干扰质粒分别与pDsRed2.0-C1-meClps共转染到NIH-3T3细胞,半定量PCR和Western blotting检测meClps基因在mRNA和蛋白水平的变化。将筛选得到的干扰效果最好的慢病毒载体包装慢病毒,注射到小鼠附睾头部组织后分析对附睾尾部精子运动性能的影响。结果构建了体外表达meClps蛋白的pDsRed2.0-C1-meClps表达载体和靶向meClps基因的慢病毒RNAi载体。靶向meClps的RNA干扰载体对转染pDsRed2.0-C1-meClps后的NIH-3T3细胞中的meClps的mRNA和蛋白表达都有抑制,但以转染pRNAT-U6.2/lenti-RNAi-251对meClps的抑制效果最明显。包装后的慢病毒注射到小鼠附睾头部后附睾尾部组织中的精子运动速率降低(P<0.05)。结论筛选出RNAi-251能有效干扰meClps表达,通过慢病毒介导的RNAi敲低meClps表达后精子运动性能降低。
- 廉滋珍曹佐武陈冉陈雷薛樱子秦俊文齐绪峰张春雪禹艳红
- 关键词：RNA干扰慢病毒精子运动
- 广州市增城区初中学生的青春期生殖健康知识调查被引量：4
- 2016年
- 目的:通过对广州市增城区初中学生的生殖健康知识掌握现状的调查,为开展中学生的青春期生殖健康教育提供参考资料。方法:本课题组设计问卷,内容涉及生理、生殖、避孕、流产、性与性病等知识。采用整群抽样法对广州市增城区某中学1 263名初中学生进行不记名问卷调查。男女学生对生殖健康知识了解程度的差异采用χ2检验分析。结果:收回有效问卷1 210份,问卷回收率95.8%。大部分学生对青春期与生殖系统发育过程等表示一般了解或者完全不了解;对生殖生理知识的正确回答率从高至低依次是婴儿出生部位(67.70%)、精/卵子发生部位(58.84%和55.04%)、女性易怀孕时期(48.70%)、男/女何时具有生育能力(29.26%和31.74%);男生(30.44%)认为流产对身体没有伤害显著高于女生(9.58%)(P<0.001);女生(71.65%)对性病的了解稍高于男生(66.82%),但未见有统计学差异(P>0.05);21.00%的男生对中学生发生性行为持开放态度,显著高于女生的10.85%(P<0.001)。结论:初中学生的生殖健康知识知晓率低,男生与女生对生殖健康知识的了解程度有差异,女生认知水平总体高于男生;应重视和加强中学生的青春期生殖健康教育。
- 杨海婷姚朗建吴丽英黃振文温慧婷陈达明吴丽芝李菁朱伟杰
- 关键词：生殖健康知识初中学生青春期
- 人ZP3的N端肽的体外表达
- 2013年
- 目的：为了深入研究透明带的功能，体外表达人ZP3的N 端肽段。方法：通过PCR克隆人ZP3的第77～703的DNA序列，利用该片段构建hZP3的N端肽的原核表达载体，转化大肠杆菌Rosetta （DE3）进行体外表达，利用分离的表达产物免疫小鼠，通过ELISA检测抗体反应，利用Western blotting和免疫组化检测抗血清与重组透明带蛋白和人卵巢天然的透明带蛋白的特异反应。结果：Western blotting结果显示，获得了约27 ku的重组蛋白，用该蛋白免疫小鼠获得了抗体滴度近20000的抗血清，该抗体能与重组透明带蛋白和人卵巢天然的透明带蛋白的特异反应。结论：成功表达人ZP3的N端重组肽，表达产物具有免疫原性。
- 曹佐武徐放谢琪璇乜春城姚冠颖
- 关键词：透明带抗原性体外表达免疫组化
- ZP2抑或ZP3——精卵识别机制的争辩被引量：3
- 2013年
- 本文综述受精研究的新进展,精子与卵透明带的识别是受精过程中的一个关键过程。自从上世纪七十年代以来,国际上有关实验室对受精机理进行了系统的研究,取得了明显的进展,建立了精卵识别的经典理论,认为卵透明带ZP3是精子的初级受体与顶体反应的诱导剂。然而,近年来的深入研究结果与原来的理论发生明显冲突,使得原来清晰的阐述变得迷糊,原来顺理成章的结论重新变成疑点。
- 曹佐武
- 关键词：透明带受精顶体反应多精子受精
- 围着床期小鼠胚胎表达肿瘤易感基因101(TSG101)被引量：2
- 2013年
- 揭示肿瘤易感基因101(TSG101)在围着床期胚胎中的时空表达型。方法:收集囊胚、培养获得着床前、着床后以及长开的小鼠胚胎。利用全胚原位杂交以及全胚免疫染色方法检测围着床期小鼠胚胎中TSG101的时空表达型。结果:TSG101表达于围着床期胚胎的內细胞块和滋养层细胞中,其中内细胞块细胞中的表达更强。结论:围着床期胚胎表达TSG101,暗示TSG101在胚胎着床过程中发挥作用。
- 谢琪璇黄卉卉蒋启荣高桥祐司秋山泰身秦俊文
- 关键词：TSG101胚胎围着床期
- 梗阻性无精子症患者精子顶体完整性与卵胞质单精子注射治疗结局之间的关系被引量：2
- 2013年
- 目的:探讨梗阻性无精子症(OA)患者精子的顶体完整性及其与卵胞质单精子注射(ICSI)治疗临床结局之间的关系。方法:选取梗阻性无精子症患者共37例为试验组,同期进行体外受精治疗且精液常规参数正常的男性33例为对照组,应用荧光标记的豌豆凝集素法(PSA-FITC)检测精子顶体完整性,巴氏染色法分析精子形态,比较试验组与对照组的顶体完整率(AIR)、正常形态率(NFR)、受精率(FR)、卵裂率(CR)及优质胚胎率(OER),并将AIR与FR、NFR与FR进行相关性分析。结果:试验组的AIR、NFR、FR显著低于对照组(P<0.01),CR、OER试验组与对照组相比无统计学差异(P>0.05)。试验组AIR与FR呈显著正相关(r=0.595,P<0.01),NFR与FR显著正相关(r=0.463,P<0.01);对照组AIR与FR显著正相关(r=0.683,P<0.01),NFR与FR呈显著正相关(r=0.205,P<0.01)。结论:梗阻性无精子症患者的精子AIR较低。行皮下附睾抽吸术(PESA)-ICSI的梗阻性无精子症患者精子其AIR高则受精率也会高。
- 张希朱伟杰龙晓林杜红姿张文红
- 非编码RNA研究进展被引量：38
- 2019年
- 非编码RNA是指不具备蛋白质编码能力的RNA,包括转运RNA、核糖体RNA、小核仁RNA(small nucleolar RNA, snoRNA)以及长非编码RNA(long noncoding RNA, lncRNA)等.非编码RNA广泛参与生命活动中重要的生物功能,如生物个体的发育与分化、生殖、细胞凋亡和细胞重编程等,并且与人类疾病密切相关.近年来,随着我国经济的发展和人口老龄化,心血管疾病、肿瘤、代谢性疾病等疾病已成为威胁中国居民健康的重大慢性非传染性疾病,一些罕见病,例如小胖威利综合征(Prader-Willi syndrome, PWS)也随着人口基数的不断增大逐渐影响我国居民的身体健康.随着对这些慢性疾病及罕见疾病发生发展的相关机制研究,我国科学家发现非编码RNA与这些疾病密切相关.非编码RNA参与调控一系列的心血管疾病、肿瘤、代谢性疾病、感染免疫性疾病和PWS等疾病过程.本文对我国学者在非编码RNA领域的贡献进行综述,详细阐述了非编码RNA的加工形成和功能研究等主要进展,并对探究这些非编码RNA与PWS、心血管疾病、肿瘤、代谢性疾病和感染免疫性疾病等发生发展中的重要调控作用,以及我国科学家对该领域的贡献进行了详细的综述和总结.
- 陈玲玲冯珊珊范祖森龚畅刘本宇刘子豪李传伟宋尔卫孙树汉吴庚泽吴煌吴缅许光袁继行曾春雨朱友明
- 关键词：非编码RNA心血管疾病代谢性疾病肿瘤神经系统疾病内分泌系统疾病
- 4种酶质量浓度对小鼠睾丸间质细胞分离效果的比较
- 2015年
- 目的:比较4种酶质量浓度对原代小鼠睾丸间质细胞的分离效果.方法:将20只成年雄性昆明小鼠睾丸平均分成A、B、C、D 4组,分别用0.05%、0.125%、0.25%胰酶和0.02%胶原酶Ⅱ消化分离睾丸间质细胞,比较4种酶质量浓度分离的间质细胞数量和存活率;分别用苏木素-伊红染色、苏丹Ⅲ染色观察间质细胞及其脂滴形态.结果:A组和B组分离的间质细胞数多于C组和D组(P<0.05).4种酶质量浓度所分离的间质细胞存活率均在90%以上,差异无统计学意义(P>0.05).低浓度胰酶(0.05%和0.125%)所分离的间质细胞生长状态良好,细胞内脂滴小而丰富,长时间体外培养后胞质空泡化,脂滴发生融合.结论:低质量浓度胰酶对原代间质细胞分离效果好.
- 黄瑞朱伟杰
- 关键词：间质细胞胰酶脂滴小鼠
- 大鼠LC3B荧光融合表达载体的构建及在骨肉瘤细胞中的自噬检测应用被引量：1
- 2017年
- 目的构建三种rLC3B融合表达载体，探究其在骨肉瘤细胞中的自噬检测应用。方法采用PCR扩增大鼠LC3B基因序列，克隆至pEGFP-C1和pmCherry—C1，分别构建pEGFP-rLC3B和pmCherry-rLC3B融合表达载体；随后以pEG-FP-rLC3B为模板经PCR得到EGFP—rLC3B序列，克隆至pmCherry-C1并构建pmCherry-EGFP—rLC3B融合表达载体。将上述三种质粒转染至U-2OS细胞后，采用饥饿和Rapamycin激活自噬，或Chloroquine和Baf-A1抑制自噬，通过激光共聚焦显微镜观察自噬体和自噬溶酶体的形成。采用Westernblot检测Rapamycin、Chloroquine和Baf-A1作用下的内源性LC3B和外源性EGFP-rLC3B、mCherry，rLC3B及mCherry—EGFP-rLC3B，验证外源性rLC3B的正确表达和自噬检测功能；采用West-erablot检测游离EGFP表达，从而精确检测细胞内的自噬性降解水平。结果经酶切鉴定和测序验证：成功构建三种融合表达载体。采用饥饿和Rapamycin激活自噬，或Chloroquine和Baf-A1抑制自噬，并在激光共聚焦显微镜下观察到明显的自噬体或自噬溶酶体。Westernblot同时检测到内源LC3B和外源rLC3B的表达，并且游离EGFP蛋白的表达随着饥饿时间增加而明显上调，12h组比对照组增加1．05倍，24h组比对照组增加1．56倍，显示自噬性降解水平升高。结论EGFP-rLC3B载体可检测自噬体的形成和反应细胞内的自噬性降解水平；mCherry-rLC3B载体可同时显示自噬体和自噬溶酶体，但不能区分这两者；mCherry-EGFP-rLC3B载体可同时显示和区分自噬体和自噬溶酶体，是检测自噬流的最佳方法。
- 廖翠玲章淼锋孙继红董江军朱园园叶招明邹飞雁
- 关键词：自噬克隆分子荧光抗体技术
- 喂食转基因大豆对子代雄鼠生殖系统的影响被引量：9
- 2013年
- 亲代小鼠分别喂食转基因和非转基因大豆饲料,120 d后组内交配获得子一代小鼠。以转基因饲料喂食的亲代所繁殖的子代小鼠作为实验组,断乳后子鼠继续喂食转基因大豆饲料;对照组子鼠为亲代非转基因喂食组所繁殖,断乳后继续喂食非转基因大豆饲料。分别于喂食30、60、90、120 d取子代小鼠的睾丸称重并计算脏器系数,伊红法染色检测精子存活率与畸形率;制作石蜡切片HE染色后观察睾丸病理学变化。结果表明:与对照组相比,实验组小鼠睾丸系数、精子存活率与畸形率均无显著性差异;组织切片镜检未发现两组小鼠的睾丸出现明显病理损伤。实验结果说明转基因大豆饲料喂食120 d未对子代雄鼠精子质量和睾丸组织病理造成影响,表明亲代长期喂食转基因大豆饲料后无潜在遗传毒性及积累效应。
- 芦春斌周文刘标
- 关键词：转基因大豆精子质量
