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含CpG免疫刺激序列的质粒增强HBsAg诱导的免疫应答: 2012年; 目的探讨以含有多拷贝CpG寡脱氧核苷酸(CpG ODN)的质粒作为治疗性乙肝疫苗佐剂的可行性。方法构建含有6个拷贝D型CpG ODN的质粒pKO-CG6,将该质粒以及载体pKO分别刺激健康人及HBV感染者的外周血单核细胞(PBMC),检测PBMC的增殖及分泌的细胞因子IFN-γ、IL-12,进一步将重组HBsAg分别联合这两种质粒免疫小鼠,检测小鼠的细胞和体液免疫应答。结果质粒pKO-CG6与载体pKO在体外均能有效激活健康人及HBV感染者PBMC增殖反应,并促进IFN-γ、IL-12的产生,其中pKO-CG6的免疫刺激活性强于载体pKO。小鼠体内试验表明,虽然载体pKO也具有免疫佐剂作用,但pKO-CG6更能显著增强HBsAg诱导的免疫应答,尤其是细胞免疫应答。结论含有多拷贝D型CpG ODN的质粒能有效激活HBV感染者的PBMC,并增强HBsAg在小鼠体内的免疫原性。; 解冰唐紫薇劳文光李建军王岩朱诗应陶清源戚中田赵平陈志辉; 关键词：乙型肝炎病毒 CPG寡脱氧核苷酸质粒免疫佐剂

细胞极性与丙型肝炎病毒受体介导的细胞入侵: 2010年; 丙型肝炎病毒(hepatitis C virus,HCV)的细胞入侵过程由多因素介导,包括多种受体及触发病毒内吞入胞的细胞因素。新发现的受体分子occludin已被证明与SR-B1、CD81、claudin同介导HCV细胞入侵,occludin和claudin同为组成细胞间紧密连接的整合蛋白,引起了研究者们对紧密连接及细胞极性对HCV入侵影响的广泛关注。对细胞极性及紧密连接的研究,有助于发现新的HCV治疗药物的作用靶点,从而干预其细胞入侵及细胞间蔓延。本文从肝细胞极性特点、紧密连接及主要整合蛋白claudin和occludin、极性细胞模型及与HCV入侵的关系等几个方面综述了近来的最新进展。; 关默戚中田; 关键词：丙型肝炎病毒细胞极性 OCCLUDIN

丙型肝炎患者血清中丙型肝炎病毒交叉中和抗体的检测: 2010年; 目的分析HCV感染者血清中是否存在交叉反应性中和抗体。方法以分泌表达HCV包膜E2蛋白真核表达质粒转染的293T细胞培养上清液中的HCVE2蛋白作为检测抗原,建立检测HCVE2抗体的ELISA方法,检测32份HCV抗体阳性的慢性丙肝患者血清,然后用免疫荧光分析血清与HCV全长包膜蛋白表达质粒转染的293T细胞的结合反应,再用5株HCV假病毒(HCVpp)及两株细胞培养产生的HCV(HCVcc)为模型分析血清的病毒中和活性。结果 32份HCV抗体阳性血清中,26份血清可检测出E2抗体,阳性率81.3%。其中HCV RNA阳性的12份血清均为E2抗体阳性,E2抗体水平与HCV RNA水平负相关。HCVE2抗体阳性血清对5株HCVpp以及两株HCVcc的感染性均有不同程度的中和作用,中和活性与E2抗体水平相平行。结论 HCV感染可诱导保护性体液免疫应答,丙肝患者血清中存在交叉中和抗体,提示开发能诱导广泛交叉中和抗体的丙肝疫苗具有可行性。; 吉瑾罗源陆伟朱勇喆戚中田王敦赵平; 关键词：丙型肝炎病毒中和抗体

LPS、rh-TNFα刺激PBL诱导TRAIL表达的初步研究被引量：5: 1999年; 选择人ＰＢＬ作为人ＴＲＡＩＬ基因的来源，抽提细胞在ＬＰＳ和ｒｈ－ＴＮＦα刺激２、１０、１８ｈ的总ＲＮＡ，通过ＲＴ－ＰＣＲ观察ＴＲＡＩＬ基因转录ｍＲＮＡ的水平，然后用ＰＣＲ扩增ＴＲＡＩＬ基因，并用免疫印迹法分析ＴＲＡＩＬｍＲＮＡ翻译蛋白的水平。结果发现：在ＬＰＳ和ｒｈ－ＴＮＦα刺激细胞并进一步诱导细胞凋亡可能与诱导表达ＴＲＡＩＬ有关。本实验得到了ＴＲＡＩＬ基因，为重组表达ＴＲＡＩＬ打下了基础。; 王梁华朱玉平潘卫娄永华陈建鹤冯煜焦炳华; 关键词：肿瘤坏死因子 TRAIL LPS 基因表达

三联脆组基因在胰腺癌及癌旁组织中mRNA表达的研究被引量：3: 2000年; 蔡清萍王梁华付志仁焦炳华徐冠南王元和张国治; 关键词：胰腺癌癌旁组织 MRNA

原发性肝癌患者血清中庚型肝炎病毒基因的检测被引量：2: 1998年; 用逆转录－聚合酶链反应法（ＰＴ－ＰＣＲ）检测了６７例原发性肝癌（ＰＬＣ）患者血清中的庚型肝炎病毒（ＨＧＶ）ＲＮＡ，以ＰＣＲ－双脱氧末端终止法分析了ＰＣＲ产物的核苷酸序列。结果显示，ＨＧＶＲＮＡ的检出率为１９．４％（１３／６７），其在ＨＢｓＡｇ阳性组和ＨＢｓＡｇ／抗ＨＣＶ阴性组中的阳性率分别是１２．２％（６／４９）和５０％（７／１４）；５’非编码区（５’－ＮＣＲ）扩增片段的核苷酸序列与美国株ＧＢＶ－Ｃ的同源性为９１．７％，提示在我国ＰＬＣ患者中存在ＨＧＶ感染。; 崔晓红潘卫宋艳斌赵平陈景山朱诗应戚中田; 关键词：肝肿瘤庚型肝炎病毒聚合酶链反应

抗人CD38单克隆抗体抗原识别表位的初步研究被引量：1: 2005年; 目的:确定抗人CD38分子单克隆抗体(mAb)1C6识别的抗原表位所在区域。方法:分别构建缺失人CD38不同表位的重组质粒,用IPTG诱导表达融合蛋白。对表达产物进行SDS-PAGE蛋白电泳及Westernblot分析。结果:1C6不能识别缺失第220～241位氨基酸的D4片段,而对其他的缺失突变体均可识别。结论:mAb1C6抗体识别的抗原表位位于CD38分子胞外段第220～241位氨基酸。; 温新宇胡美茹黎燕戚中田沈倍奋; 关键词：单克隆抗体抗原表位缺失突变

IgA亲和体随机组合噬菌体文库的构建和体外分子进化: 2010年; 目的构建IgA亲和体随机组合文库并进行体外分子进化,研究IgA亲和体分子结构与功能的关系。方法基因合成两个IgA亲和体片段。3′端引入3个随机连接肽序列随机连接,克隆于噬菌粒展示载体pCANTAB5S,构建噬菌体展示随机组合分子文库。以人IgA为靶分子对该文库进行4轮亲和筛选。制备阳性筛选克隆的单克隆噬菌体,用ELISA鉴定IgA结合活性。结果成功构建噬菌体展示IgA亲和体随机组合分子文库,库容量为3.4×107,滴度为1.6×1012TU/L,阳性克隆占79%以上,序列分析IgA亲和体随机连接,随机连接肽序列呈随机分布。在人IgA分子诱导的分子进化过程中,展示多个IgA亲和体串联体的噬菌体比例明显增加,获得3种新型IgA亲和体组合分子结构形式:IgA亲和体二联体、三联体和四联体。ELISA结合实验表明IgA亲和体三联体和四联体的IgA结合能力远大于单体和二联体。结论通过构建IgA亲和体噬菌体展示随机组合文库和体外分子进化的方法,获得多种新型组合分子,其中IgA亲和体三联体和四联体的IgA结合能力明显增加,提示通过有效的分子进化成功地获得了高亲和力的IgA结合分子。; 温宗梅曹洁陈秋莉贾建安蒋少华潘卫; 关键词：肽库串联重复序列分子进化

提高医学微生物学课堂教学效果的几点体会: 在知识高度信息化的今天，教师的传统地位受到了挑战。如何在新形势下发挥教师在课堂教学中的作用是摆在每位教师面前的一个主要课题。本文总结了我们在医学微生物学大课教学中如何提高教师自身素质以及积极营造教学互动课堂氛...; 曹洁潘卫戚中田; 关键词：医学微生物学课堂教学教学互动; 文献传递

改良碘量法快速测定地震灾区饮水消毒中的有效氯含量: 2010年; 目的：研究与验证改良碘量法快速测定地震灾区饮水消毒中有效氯含量的效果。方法：取漂白粉精片、二氯异氰尿酸钠和三氯异氰尿酸消毒液各3个样品,每一样品的有效氯含量按本法各测定5次,以此进行精密度试验;另各取10份同一漂白粉精片和二氯异氰尿酸钠消毒液,分别用本法和国标碘量法测定其有效氯含量,比较两种方法的测定结果。结果：精密度平行对照实验显示,测定3种不同含氯消毒剂有效氯含量（%）,其标准差（SD）和相对标准偏差（RSD）分别为：SD=±0.27～0.42,RSD=0.73%～1.12%（漂白粉精片）、SD=±0.35～0.57,RSD=0.86%～1.40%（二氯异氰尿酸钠）和SD=±0.42～0.65,RSD=0.80%～1.25%（三氯异氰尿酸）;本法与国标碘量法比较,两者测定结果的均值经t检验无显著性差异（P0.05）。结论：本法测定结果的精确度与国标碘量法基本一致,适用于平时及野外特殊条件下饮水消毒中有效氯含量的测定。; 阮芳铭左晋桐沈志雷周利梅俞镔炯朱时应曹广文张迁常文军; 关键词：有效氯含量碘量法二氯异氰尿酸钠三氯异氰尿酸含氯消毒剂饮水消毒

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第二军医大学基础部微生物学教研室

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