南京医科大学基础医学院免疫学系
- 作品数：34 被引量：89H指数：5
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- 系统性红斑狼疮患者外周血T细胞CTLA-4表达及其临床意义被引量：3
- 2017年
- 目的:研究系统性红斑狼疮(systemic lupus erythematosus,SLE)T细胞中CTLA-4的表达及临床意义。方法:分离正常人和SLE患者的外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cells,PBMCs),以抗-CD3、抗-CD28刺激培养48 h,刺激培养前后收取细胞,以流式细胞术(FCM)检测CD4^+和CD8^+T细胞中CTLA-4^+细胞比例,并分析其与SLE疾病活动性指数(SLEDAI)和肾损害的关系。再以ELISA法检测培养上清中游离的CTLA-4水平。结果:SLE患者刺激前的CD4^+和CD8^+T细胞且主要是CD25^+T细胞中CTLA-4^+细胞的比例较正常人显著增高,与SLEDAI呈正相关;而其CD8^+CD28-T细胞中CTLA-4^+细胞比例也显著高于正常人,但与SLEDAI之间无显著相关性;经抗-CD3、抗-CD28抗体刺激后,其CD4^+CD25^+T细胞、CD8^+CD25^+T细胞或CD8^+CD28-T细胞中CTLA-4^+细胞的比例却显著低于正常人,但与SLEDAI之间无显著相关性,仅在活动性SLE患者中有肾损组的CD8^+CD28-T细胞中CTLA-4^+细胞的比例显著低于非肾损组;而且经刺激培养后SLE患者PBMC上清中游离的CTLA-4水平也显著低于正常人。结论:SLE患者新鲜分离的T细胞(CD4^+及CD8^+)中CTLA-4表达异常增高,反映T细胞异常活化和疾病活动;另一方面,SLE患者T细胞又存在CTLA-4诱导性表达障碍,可能与SLE T细胞体外再活化能力减弱有关。
- 徐安琪杨晓帆王慧娟张缪佳季晓辉
- 关键词：系统性红斑狼疮T细胞CTLA-4
- 新型冠状病毒肺炎合并急性呼吸窘迫综合征的研究进展被引量：2
- 2020年
- 新型冠状病毒肺炎(COVID-19)给我国乃至世界带来巨大的公共卫生问题。目前尚无针对于COVID-19的特效药。急性呼吸窘迫综合征是COVID-19患者的常见致命性并发症之一,与其较高的重症率和病死率相关。本文结合相关文献、近期临床观察以及既往经验,对COVID-19合并急性呼吸窘迫综合征的关联进行解读,并对其治疗和管理进行探索性综述,以期为临床治疗提供参考。
- 李芯雨陈中琦吉宁飞张明顺
- 关键词：呼吸窘迫综合征成人
- 模拟临床的中性粒细胞性激素抵抗型支气管哮喘小鼠模型的建立及意义被引量：9
- 2020年
- 目的建立一种模拟临床的中性粒细胞性激素抵抗型支气管哮喘(哮喘)小鼠模型并探讨其意义。方法采用屋尘螨(house dust mite,HDM)和脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)混合液,气管内给药建立哮喘小鼠模型。将18只雌性C57BL/6小鼠按照数字表法随机分为对照组、哮喘组(HDM+LPS)和地塞米松(dexamethasone,Dex)组(HDM+LPS+Dex)。肺功能仪测定小鼠气道阻力,HE染色观察肺组织炎症细胞浸润,过碘酸-雪夫染色(PAS)观察杯状细胞增生,瑞氏染色检测BALF炎症细胞总数及分类计数,聚合酶链式反应(PCR)和酶联免疫吸附试验(ELISA)检测肺组织和BALF炎症因子。流式细胞术检测肺组织Th17细胞分化。结果HE染色显示,哮喘组肺组织炎症较对照组显著增高(P<0.05),地塞米松组肺组织炎症较哮喘组稍减轻(P>0.05);BALF细胞分类计数显示,哮喘组炎症细胞(除外嗜酸粒细胞)浸润较对照组显著增加[炎症细胞总数分别为(2797±400)×106/L和(105±75)×106/L,中性粒细胞计数分别为(1151±395)×106/L和(12±6)×106/L,淋巴细胞计数分别为(897±135)×106/L和(11±5)×106/L,巨噬细胞计数分别为(215±51)×106/L和(34±16)×106/L,均P<0.05],地塞米松组肺组织炎症细胞总数及巨噬细胞计数较哮喘组显著下降[炎症细胞总数(1140±418)×106/L vs(2797±400)×106/L,巨噬细胞计数(117±31)×106/L vs(215±51)×106/L,均P<0.05],但淋巴细胞和中性粒细胞计数无统计学意义[淋巴细胞计数(587±208)×106/L vs(897±135)×106/L,中性粒细胞计数(294±134)×106/L vs(1151±395)×106/L,均P>0.05];免疫组织化学检测结果同样证实,地塞米松组肺组织中性粒细胞浸润较哮喘组不能被有效抑制;哮喘组和地塞米松组气道阻力较对照组均显著增高(P<0.05),但两组间气道阻力差异无统计学意义(P>0.05);与哮喘组相比,地塞米松组肺组织Th2炎症指标显著降低(均P<0.05),而Th17细胞炎症指标有升高趋势,Th1炎症指标无显著改善;流式细�
- 王楠陈子葛林阳王曦高蕾李涛胡蓉张明顺周林福
- 关键词：哮喘地塞米松中性粒细胞THL7细胞
- TBK1对NLRC4炎症小体的作用及其机制研究
- 2024年
- 目的:探究TANK结合激酶1(TANK-binding kinase 1,TBK1)调控核苷结合寡聚化结构域样受体4(nucleotide-binding oligomerization domain-like receptor 4,NLRC4)炎症小体激活的作用及其机制。方法:在鼠伤寒沙门氏菌(Salmonella typhimurium,S.T)感染的永生化骨髓巨噬细胞(immortalized bone marrow derived macrophage,IBMDM)中,Western blot检测NLRC4炎症小体激活及其下游分子半胱天冬蛋白酶1(cysteine aspartic acid specific protease 1,Caspase-1)和Gasdermin D(GSDMD)的剪切情况;乳酸脱氢酶检测试剂盒检测细胞培养基上清中乳酸脱氢酶的含量;蛋白质免疫共沉淀实验确定TBK1与NLRC4的相互作用及其具体结构域;细胞免疫荧光实验确定TBK1与NLRC4的空间定位;GST pull-down实验确定TBK1与NLRC4是否存在直接相互作用;凋亡相关斑点样蛋白(apoptosis-associated speck-like protein containing a CARD,ASC)寡聚化检测实验验证NLRC4炎症小体组装。构建S.T感染C57BL/6小鼠动物模型,观察小鼠生存情况。涂板计数腹腔灌洗液和肺的细菌负荷量;酶联免疫吸附试验(ELISA)检测腹腔灌洗液及血清中的肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor,TNF)-α和白细胞介素(interleukin,IL)-1β的含量;流式细胞术检测腹腔灌洗液中的中性粒细胞比例。结果:在S.T感染的IBMDM中,抑制TBK1可减弱NLRC4炎症小体激活,NLRC4磷酸化水平下降,Caspase-1与GSDMD的剪切减少;TBK1与NLRC4存在相互作用,TBK1的N端与NLRC4的NACHT结构域相互作用;TBK1与NLRC4存在空间上的共定位;TBK1可以磷酸化NLRC4的Ser533位点。S.T动物模型实验显示,抑制TBK1活性可以显著提高小鼠的生存率;减低小鼠腹腔灌洗液和肺中的细菌负荷量;降低血清以及腹腔灌洗液中的IL-1β、TNF-α的表达水平;减少腹腔灌洗液中的中性粒细胞比例。结论:TBK1与NLRC4相互作用,磷酸化NLRC4 Ser533位点,促进NLRC4炎症小体的激活,为治疗相关疾病提供理论依据和新的潜在靶点。
- 曾强张在奎孙乃双陈允梓
- 关键词：鼠伤寒沙门氏菌
- 医学免疫学教学动画的制作与实际应用体会被引量：3
- 2020年
- 医学免疫学是一门与临床紧密连接的基础科学,其基础知识抽象深奥,普通的课堂讲授很难使学生理解并掌握。在教学过程中适当加入教学动画,配合教师讲解可帮助学生更好地理解。文章将免疫学动画的制作步骤分成动画脚本的撰写、动画元素的制作与表现、动画技术的使用与动画的实现这几部分进行了阐述,并结合动画在实际教学中的应用加以分析,为提高医学免疫学教学质量提供了更为丰富的资源。
- 施冬艳崔轩成
- 关键词：医学免疫学教学动画在线教学动画技术
- C17orf76-AS1在卵巢上皮癌中的表达及其对卵巢上皮癌细胞SKOV3生物学功能的影响
- 2017年
- 目的检测C17orf76-AS1在正常卵巢上皮细胞与卵巢上皮癌细胞系中的表达情况并探讨C17orf76-AS1过表达对卵巢上皮癌细胞系SKOV3生物学功能的影响。方法通过定量PCR(QPCR)方法检测C17orf76-AS1在在卵巢上皮细胞IOSE80及不同卵巢上皮癌细胞系(A2780、SKOV3、OVCAR3、HO-8910和HO-8910PM)中的表达。在pc DNA3.1基础上构建C17orf76-AS1过表达质粒并采用Lipo2000瞬时转染SKOV3细胞,QPCR检测SKOV3细胞中C17orf76-AS1的过表达效率;CCK-8实验检测C17orf76-AS1过表达对SKOV3细胞增殖的影响;Transwell法和划痕实验检测C17orf76-AS1过表达对SKOV3细胞侵袭迁移能力的影响。结果与正常卵巢上皮细胞IOSE80比较,C17orf76-AS1在A2780、SKOV3、OVCAR3、HO-8910及HO-8910PM细胞中均呈低表达,分别下降了0.36、0.30、0.46、0.32、0.31倍(P<0.05)。在SKOV3细胞中过表达C17orf76-AS1,CCK-8结果显示C17orf76-AS1过表达48 h后,SKOV3的增殖能力显著下降了约1.5倍;Transwell结果显示SKOV3细胞迁移能力下降约1.3倍,划痕实验也同样证实过表达C17orf76-AS1后,SKOV3细胞愈合能力显著低于对照组(P<0.05)。结论C17orf76-AS1在卵巢上皮癌细胞中异常低表达,其过表达显著降低了卵巢癌细胞增殖和迁移能力。
- 樊卫民许鹏飞付子毅陈云
- 关键词：卵巢上皮癌长链非编码RNA增殖
- 肠道黏膜免疫与炎症小体的研究进展被引量：12
- 2019年
- 肠道是机体消化器官,为机体生命活动提供所需要的营养。肠道免疫系统有独特的功能,在抵抗潜在病原体侵入机体过程中发挥至关重要的作用。炎症小体是机体天然免疫系统中重要的蛋白复合体感受器,参与病原体引起的宿主防御反应,并在维持肠道免疫稳态中发挥关键作用。本文综述了肠道黏膜免疫系统及炎症小体在肠道免疫中的作用。
- 黄佳铭杨冬雪李晓曦杨硕
- 关键词：肠道上皮细胞微生物肠道黏膜免疫
- 翻转课堂在医学免疫学教学中的探索被引量：10
- 2020年
- 为了研究翻转课堂教学模式在医学免疫学教学中的可行性及其效果,对超敏反应章节的教学进行了翻转课堂的实践,同时采用问卷调查和与学生座谈的方式对这种教学方法的效果进行分析。结果显示,学生普遍喜欢此种教学方法,并对其教学效果给予了较高的评价,认为翻转课堂能够激发学习兴趣,充分发挥自主学习的优势,促进学习中的沟通与交流。课堂实践表明,翻转课堂教学模式在医学免疫学的教学中有较高的应用价值。
- 张婧王迎伟邱文
- 关键词：医学免疫学教学改革
- 大鼠MIP-1α基因启动子荧光素酶报告质粒的构建及其IRF-8结合元件的初步鉴定被引量：1
- 2019年
- 目的:构建大鼠巨噬细胞炎性蛋白-1α(macrophage inflammatory protein-1α,MIP-1α)基因启动子(全长和截短)荧光素酶报告质粒,并观察在人胚肾细胞(HEK-293T)中过表达干扰素调节因子-8(interferon regulatory factor-8,IRF-8)对MIP-1α基因启动活性的影响,同时筛选其可能的IRF-8结合元件。方法:采用PCR技术,扩增出大鼠MIP-1α基因启动子序列,将MIP-1α基因启动子插入到荧光素酶报告基因载体pGL3-basic中,构建MIP-1α基因启动子全长荧光素酶报告质粒(pGL3-MIP-1α-FL)。将上述p GL3-MIP-1α-FL和本课题组已构建的大鼠IRF-8过表达质粒(pIRES2-IRF-8)共转染HEK-293T细胞,检测细胞内荧光素酶活性,确定IRF-8对MIP-1α基因的启动作用。同时,应用生物信息学软件预测MIP-1α基因启动子上IRF-8的结合元件,并据此构建3个MIP-1α基因启动子截短的荧光素酶报告质粒(pGL3-MIP-1α-1～3)。将上述MIP-1α基因启动子全长和各截短的荧光素酶报告质粒和IRF-8过表达质粒共转染HEK-293T细胞,再测定荧光素酶活性,初步确定IRF-8的结合元件。结果:菌液PCR及核酸测序证实,上述pGL3-MIP-1α-FL(-1 400～+94 nt)质粒构建成功。将pGL3-MIP-1α-FL和pIRES2-IRF-8共转染HEK-293T后发现,过表达IRF-8可显著增加MIP-1α基因启动子活性。应用生物信息学软件预测发现MIP-1α基因启动子上IRF-8的结合元件(-1 157～-1 144nt、-740～-734 nt、-683～-670 nt、-365～-359 nt、-249～-236 nt),并据此构建3个MIP-1α基因启动子截短的荧光素酶报告质粒,即pGL3-MIP-1α-1(-453～+94 nt)、p GL3-MIP-1α-2(-352～+94 nt)和pGL3-MIP-1α-3(-3～+94 nt)。将pGL3-MIP-1α-FL、pGL3-MIP-1α-1～3和pIRES2-IRF-8共转染HEK-293T后发现,p GL3-MIP-1α-3的启动活性显著低于pGL3-MIP-1α-FL、pGL3-MIP-1α-1和pGL3-MIP-1α-2。提示IRF-8可能结合在大鼠MIP-1α基因启动子的-352～-3 nt区域的IRF-8结合元件(-249～-236 nt)上。结论:本实验成功构建了大鼠MIP-1α基因启动子全长�
- 钱宝梅王文博罗灿张婧赵聃王迎伟邱文
- 关键词：启动子
- 学生视角下混合式教学过程性评价指标对《医学免疫学》学习成绩的影响
- 2023年
- 目的 学习成绩是衡量人才培养质量的关键指标。在混合式教学实践中,科学合理的过程性评价是影响学习成绩评价的重要一环,文章从学生视角出发,旨在探究学生对过程性评价指标的态度、行为等个体因素对其学习成绩的影响。方法 2022年7月1日—7月15日,通过问卷调查方式,基于学生学习成绩以及学生对过程性评价反馈的问卷数据,采用相关性分析,确定学生视角下,对学习成绩影响最大的过程性评价指标。结果 通过对临床医学专业本科生409份调查问卷的数据分析,发现在6项过程性评价指标中,91~100分、81~90分的学生中,认可视频帮助度、编排与时长的比例高于其他较低分数段。其中,视频长度合理的评价指标与学业成绩关联性最高。不同分数段学生的学习成绩与完成作业的难度感受相关性差异有统计学意义(P<0.05)。排在第一至第六的指标依次为作业、签到、互动讨论、科普作品展示、视频访问时长和访问次数,由高到低依次显示了学生对各指标的认可程度。学生对讨论、科普展示等主动性学习指标的认可度低于客观性评价指标。结论 学生对客观性强的过程性评价普遍持积极态度,对主观性、创造性相关指标的认可度相对薄弱,对课程投入程度和态度的客观性评价指标对学习成绩影响最大。
- 李晓曦刘英霞孙可一张明顺蔡振明马春梅陈云杨硕
- 关键词：医学免疫学混合式教学
