济宁医学院附属医院中心实验室
- 作品数：13 被引量：28H指数：3
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- 相关机构：山东大学齐鲁医学院天津医科大学研究生院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金山东省自然科学基金山东省优秀中青年科学家科研奖励基金更多>>
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- 小鼠脊髓前角运动神经元的分离、培养和鉴定
- 2016年
- 目的：探讨一种分离小鼠脊髓前角运动神经元的方法,为运动神经元相关的研究提供依据.方法：分离13 d的C57BL/6胎鼠脊髓,利用Optiprep分离液经密度梯度离心获得脊髓前角运动神经元,培养后观察神经元细胞形态的变化,免疫荧光双标法对分离运动神经元的纯度进行判定.结果：将分离到的运动神经元进行培养,能够观察到典型的神经元细胞形态及轴突生长.免疫荧光双标证明培养的细胞为运动神经元细胞,纯度约95％.结论：Optiprep分离液用于小鼠运动神经元的分离,可获得良好的分选效果.Optiprep分离液可用于运动神经元相关的研究.
- 吕辉刘路路付婷婷孔庆霞乔保俊王玉忠
- 关键词：运动神经元原代培养C57BL/6小鼠
- 柳氮磺胺吡啶在神经病理性疼痛大鼠中的镇痛作用被引量：1
- 2018年
- 目的:研究柳氮磺胺吡啶(sulfasalazine,SFZ)对大鼠坐骨神经结扎(CCI)引起的神经病理性疼痛的镇痛作用,并探讨其对脊髓背角胶质细胞活化、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-1β(IL-1β)和白介素-6(IL-6)产生的影响。方法:将SD大鼠随机分为3组,即假手术(Sham)组、CCI组与SFZ组。建立大鼠CCI模型,按65 mg·kg-1灌胃(ig)给予SFZ,使用von Frey纤维丝测定大鼠机械缩足阈值(MWT)。应用免疫荧光染色法和Western blot法检测小胶质细胞标记物Iba-1及星型胶质细胞标记物GFAP的表达变化。采用RT-q PCR法检测TNF-α,IL-1β和IL-6的mRNA水平。结果:CCI组MWT值与Sham组相比显著降低(P<0.05);SFZ组MWT值较CCI组显著升高(P<0.05)。CCI组Iba-1和GFAP表达水平明显高于Sham组(P<0.05);SFZ组Iba-1表达水平与CCI组相比没有显著差异(P>0.05),SFZ组GFAP表达水平低于CCI组(P<0.05)。CCI组TNF-α,IL-1β和IL-6 mRNA水平与Sham组相比显著升高(P<0.05);SFZ组TNF-α,IL-1β和IL-6 mRNA水平较CCI组显著降低(P<0.05)。结论:SFZ可能通过抑制脊髓星型胶质细胞激活和炎症因子释放从而缓解CCI引起的神经病理性疼痛。
- 马龙飞陈国武陈明台王丽娜刘代强孟纯阳
- 关键词：柳氮磺胺吡啶神经病理性疼痛小胶质细胞星型胶质细胞炎症因子
- 溶酶体在肿瘤演进过程中作用的研究进展
- 2017年
- 溶酶体内部呈酸性环境，含有50余种酸性水解酶以及多种溶酶体特异性膜蛋白，主要功能是接受和降解大分子物质。在某些肿瘤细胞中溶酶体的功能存在异常，部分酸性水解酶的表达会发生变化。抑制溶酶体胞吐作用能够抑制肿瘤侵袭转移，因为既不影响酸性水解酶的活性，也会导致溶酶体膜的不稳定，增加肿瘤细胞对药物的敏感性。
- 黄建
- 关键词：溶酶体胞吐作用肿瘤肿瘤侵润肿瘤转移
- 正常免疫小鼠人源结肠癌移植瘤模型的建立被引量：2
- 2021年
- 目的探讨建立新型正常免疫小鼠人原代结肠癌移植瘤模型,为研究结肠癌在正常免疫情况下的发病机制提供可靠的实验动物模型。方法人结肠癌细胞来自于2017年于济宁医学院附属医院接受手术治疗的结肠癌患者。细胞组小鼠接种含结肠癌细胞的磷酸盐缓冲液(PBS),微载体组接种含microcarrier 6的PBS,细胞-微载体复合物组接种含结肠癌细胞和microcarrier 6的复合物PBS。采用皮下注射方式将各组细胞接种于小鼠右腋皮下,记录肿瘤形成时间、大小、成瘤率及镜下病理学改变等。移植瘤组织采用EnVision二步法行免疫组化染色,根据视野中阳性细胞比例判断移植瘤成瘤效果,采用聚合酶链反应(PCR)法检测小鼠肿瘤组织中人特异性Alu序列的表达。结果接种肿瘤细胞后,细胞组和微载体组小鼠均无死亡,均未成瘤;细胞-微载体复合物组小鼠在接种后第5~7天于右侧腋窝皮下可触及皮下肿瘤,成瘤率为67%(10/15),接种后2~3周,肿瘤体积可达500 mm3左右。免疫组化结果示,CK20、CDX-2和癌胚抗原均为阳性表达。PCR结果显示,荷瘤小鼠移植瘤组织中可检测到人特异性Alu序列的表达。结论人原代结肠癌细胞以microcarrier 6为载体在正常免疫小鼠体内成瘤,成功地建立了新型正常免疫小鼠人源结肠癌移植瘤模型。
- 程姝敏刘建玲谌通毕研贞刘昆燕王全义唐慧昕杨永红张小蓓胡瑞瑞刘素芹张凯孔令斌郭道路舒振锋洪丰
- 关键词：结直肠肿瘤微载体免疫
- 多参数磁共振成像对Danon病家系的诊断价值被引量：1
- 2021年
- 目的:探讨Danon病家系中LAMP2突变基因患者的磁共振成像特征。方法:纳入2014年1月就诊于我院的1个Danon病家系,在知情同意及自愿参与的前提下,采用西门子verio3.0T系统对所有家族成员进行标准的心脏磁共振扫描,选择Danon病家系中携带LAMP2突变基因的7例患者作为LAMP2组,7例未携带LAMP2突变基因的正常人作为对照组,采用SPSS及CVI42分析LAMP2突变基因患者的磁共振成像特征。结果:LAMP2组7例患者中,5例有延迟增强表现。LAMP2组和对照组的心肌整体径向应变峰值(GPSR)、整体环向应变峰值(GPSC)及整体纵向应变峰值(GPSL)均差异有统计学意义(均P<0.05),LAMP2组较之对照组GPSR、GPSC、GPSL呈降低趋势。除基底部和心室中部径向峰值应变(PSR)组间差异无统计学意义外,LAMP2组与对照组PSR在心尖部、环向峰值应变(PSC)及纵向峰值应变(PSL)在心脏各部位均差异有统计学意义(均P<0.05),PSC和PSL在心脏自基底部至心尖部均呈上升趋势。GPSR、GPSC、GPSL诊断Danon病的ROC曲线下面积分别为0.792、0.979、0.917(均P<0.05)。结论:对比剂延迟增强磁共振成像和心肌应力分析技术对Danon病诊断具有重要价值,多参数磁共振成像在可疑Danon病的诊断中可提供重要的鉴别信息。
- 陈岳彤翟宁王青雷闫波崔英华
- 关键词：磁共振成像肥厚型心肌病心肌应变
- GATA结合蛋白5与急性心肌梗死相关性的研究进展被引量：3
- 2020年
- 心血管疾病和癌症是最常见的慢性疾病,经常共存和互相依赖[1]。但目前我国心血管疾病的患病率和病死率处于上升趋势,且其病死率高于肿瘤和其他疾病,位居我国第一位,占居民疾病死亡构成比的40%以上[2]。冠状动脉疾病是影响全球人群的主要心血管疾病之一[3]。是冠状动脉壁富含胆固醇的斑块积聚所致,在炎症的作用下,冠状动脉斑块破裂或侵蚀,导致血栓形成和急性心肌梗死(acute myocardial infarction,AMI)的发生[4]。
- 宋志鹏高蕊闫波
- 关键词：心肌梗死血管细胞黏附分子1一氧化氮合酶
- 核因子-κB p65在神经病理性疼痛大鼠脊髓中的表达定位被引量：5
- 2019年
- 目的研究核因子-κB(NF-κB)p65在神经病理性疼痛大鼠脊髓背角中的表达与定位。方法建立大鼠坐骨神经慢性压迫损伤(CCI)模型;应用Western blot法检测CCI大鼠脊髓NF-κB p65的表达情况;采用免疫荧光染色双标法检测NF-κB p65蛋白在CCI大鼠脊髓背角内的亚细胞(神经元、星形胶质细胞及小胶质细胞)定位。结果 CCI大鼠的机械阈值较正常大鼠显著降低;神经损伤后,NF-κB p65表达量在脊髓组织中显著增高;NF-κB p65主要定位于脊髓背角神经元和星形胶质细胞,而在小胶质细胞中没有表达。结论 NF-κB p65在CCI大鼠脊髓中相对高表达并主要定位于脊髓背胶神经元和星形胶质细胞。
- 马龙飞张小蓓孟纯阳
- 关键词：核因子-ΚBP65神经病理性疼痛星型胶质细胞
- 从表观遗传学角度探究沉默信息调节因子1与心房颤动的相关性被引量：2
- 2019年
- 心房颤动(房颤)是一种由多种原因导致的心房电生理的紊乱,表现为一种无序、快速的室上性心律失常。根据有无诱因,房颤可以分为病理性房颤和特发性房颤,与特发性房颤不同的是,病理性房颤一般是发生在诸如冠心病、心肌炎、高血压、心脏瓣膜病、心力衰竭、甲状腺功能亢进等疾病的基础之上。目前对于房颤发病机制的研究尚不明确,多数学者认为房颤是由多种机制导致的,包括心房的重构、免疫炎性反应、氧化应激、自主神经功能紊乱、肾素-血管紧张素-醛固酮系统功能异常及遗传变异因素等[1]。
- 李家睿李秀霞闫波
- 关键词：心房颤动遗传学氧化性应激心房重构
- 1个Danon病家系的分子诊断及产前诊断
- 2023年
- 目的对1个Danon病家系进行基因突变检测,并对该家系中的1例高危胎儿进行产前诊断。方法采集该家系先证者和其他家庭成员的外周血标本,利用Sanger测序检测该家系其他成员是否存在先证者的溶酶体相关膜蛋白2(LAMP2)基因突变(c.257_258delCC)。获得胎儿母亲基因检测结果后采集羊水标本,并对高危胎儿进行产前诊断。结果该家系多名成员存在LAMP2基因c.257_258delCC突变,胎儿携带与先证者相同的LAMP2基因c.257_258delCC突变。结论利用Sanger测序技术可对Danon病家系进行分子诊断,并成功对1例胎儿进行了产前诊断。
- 郝文跃陈岳彤王帅王青雷左汉恒逄淑超闫波崔英华
- 关键词：产前诊断心肌病
- 健康成人白细胞中LC3基因表达水平的年龄相关性研究被引量：1
- 2012年
- 目的自噬是真核细胞内的一种主要消化降解途径。动物实验研究表明细胞的自噬功能随年龄增长逐渐下降,但在人体内尚未见系统性研究报道。因此,我们对健康成人外周血白细胞的自噬活性与年龄相关性进行了探讨。方法 LC3基因是自噬过程中的关键基因之一,其编码蛋白经过修饰后形成的耦合蛋白LC3-Ⅱ是自噬体和自噬溶酶体的膜标记蛋白。在该研究中,我们在基因表达和蛋白水平上,检测健康成人外周血白细胞中LC3基因的表达水平,并在不同年龄组之间,以及同一年龄组不同性别之间进行了比较和分析。结果外周血白细胞中LC3基因的表达水平随年龄增长呈现逐渐下降趋势。其中,70岁以上年龄组LC3基因表达水平显著低于40～49岁年龄组(P<0.05)。与之相反,70岁以上年龄组的LC3-Ⅱ蛋白水平显著高于40～49岁年龄组(P<0.05)。在同一年龄组中男性和女性之间,LC3基因表达水平和LC3-Ⅱ蛋白水平未见显著性差异。结论本研究结果提示健康成人外周血白细胞自噬体的形成和自噬功能随年龄增长逐渐下降。LC3-Ⅱ蛋白水平随年龄增长逐渐升高提示细胞消化降解该蛋白的能力下降,导致其在细胞内沉积而致。因此,应用药物等手段增强细胞LC3的基因表达水平,可延缓细胞的衰老过程。
- 闫波黄建逄淑超张俊平
- 关键词：自噬体年龄LC3白细胞
