山西农业大学农学院分子农业与生物能源研究所 作品数:24 被引量:47 H指数:4 相关机构: 晋中学院生物科学与技术学院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 山西省高等学校科技创新项目 山西省自然科学基金 更多>> 相关领域: 农业科学 生物学 轻工技术与工程 环境科学与工程 更多>>
大豆转录因子GmWIN1-3介导逆境胁迫响应的功能分析 被引量:1 2022年 为挖掘提高大豆逆境胁迫抗性的优异基因,本文聚焦大豆(Glycine max)WIN1转录因子基因克隆和生物学功能分析。基于转录组学分析,RT-PCR克隆到GmWIN1-3基因的编码序列(720 bp)。亚细胞定位分析显示该转录因子定位于细胞核。PlantCARE软件预测GmWIN1-3启动子中含有LTR和TC-rich repeats等胁迫顺式作用元件。基因表达谱分析显示,在低温和高盐胁迫下,GmWIN1-3呈上调表达,而在干旱胁迫下呈下调表达。在低温胁迫下,过表达GmWIN1-3显著促进大豆毛状根油脂积累和减低MDA含量。油脂合成途径相关酶基因GmBCCP1-4和GmDGAT2-3在GmWIN1-3转基因大豆毛状根中表达显著上调,然而GmDGAT2-1和Gm LPAT5-2则呈下调表达。异源过表达GmWIN1-3显著提高烟叶油脂积累和烟草幼苗低温胁迫耐性。研究表明转录因子GmWIN1-3可通过上调GmDGAT2-3等酶基因表达和总脂质积累,进而提高大豆幼苗抵御逆境胁迫的能力。 薛金爱 蔡桂萍 周雅莉 陈莹 刘宝玲 张莉 李润植关键词:大豆 功能分析 逆境胁迫 吹脱法耦合微藻培养净化高氨废水体系的优化及应用 2022年 为了净化高氨废水及资源化再利用,首先利用吹脱法系统优化了高氨氮(800 mg/L)废水的pH和温度等条件,并用吹脱处理后的人工废水培养小球藻(Chlorella vulgaris),获得微藻生物质,最后应用于小油菜(Brassica campestris L.)、生菜(Lactuca sativa var.ramosa Hort.)的种子萌发试验,以评估微藻生物质对植物的促生、抗逆及营养功效。结果表明,在pH值为12和温度为80℃时,高氨氮废水吹脱效果最佳,氨氮吹脱率达95.5%,且用时较短;在40 min反应时间后,氨氮含量达到最低(50 mg/L)。吹脱去除氨氮后的废水溶液用于微藻培养,小球藻生长情况良好,干质量达到0.7535 g/L,与正常BG11培养获得的干质量(0.8590 g/L)无显著差异,说明吹脱法有效解除了高氨废水(氨氮含量>400 mg/L)对微藻生长的抑制作用。与吹脱前高氨废水相比,吹脱处理后废水可显著提高植物种子发芽率和发芽势,基于吹脱处理后废水培养的微藻对植物的促生、抗逆及营养功效更佳。 于杰 王瑞 王猛 史达明 崔红利 李润植关键词:高氨废水 吹脱法 种子萌发 螺旋藻多糖对子宫内膜异位大鼠血清指标及PI3K/Akt/mTOR信号通路基因表达的影响 被引量:5 2021年 近年来,子宫内膜异位症(endometriosis,EMs)发病率明显增加,给女性身心健康带来极大危害。螺旋藻多糖(polysaccharides from Spirulina,PSP)是一类具有多重功效的天然生物大分子,具有抗炎、抗细胞增殖等多种功能,药理学上具有治疗EMs的潜力。为了探讨PSP对EMs大鼠血清指标的影响及分子机制,本实验首先通过水提法提取PSP,柱层析法测得纯度为89%;以SD大鼠为模式动物,采用自体移植术成功制备了大鼠EMs模型,通过饲喂不同剂量的PSP,观察对EMs的治疗效果;用Western blot和RT-PCR检测PI3K/Akt/mTOR通路蛋白及mRNA含量。结果表明:与对照组相比,模型组EMs可显著增加大鼠血清中TNF-α、VEGF、MMP-2的水平;与模型组相比,不同剂量的PSP均可缓解EMs症状,具体表现为EMs病灶减小,血清TNF-α、VEGF、MMP-2等含量的降低。模型组中,PI3K、AKT、mTOR在转录水平与蛋白水平表达量均显著升高,而PSP治疗组PI3K、AKT、mTOR在转录水平与蛋白水平表达量显著降低。研究结果提示PSP可能通过抑制PI3K/Akt/mTOR信号通路进而改善EMs症状。 王猛 马浩天 关思宇 于杰 狄建兵 王愈 李润植 崔红利关键词:螺旋藻多糖 子宫内膜异位症 血清 微藻源生物刺激剂的制备及在设施农业中的应用 被引量:9 2020年 化肥和农药的过量使用导致的农业面源污染已经成为我国环境污染的重要组成部分,对农业绿色高效安全生产及设施农业带来了巨大挑战。寻找新型的传统化肥替代品、提高化肥使用效率及保护生态环境是亟待解决的重大问题。生物刺激剂是具有调控植物生长作用的成分和(或)微生物的统称,用于农业生产,可改善土壤理化性质与群落微生物,能促进作物的代谢与生长,增强对营养物质的吸收和利用,提升作物抗逆能力及提高作物产量与产品品质。微藻体内具有结构新颖、功能独特的天然活性物质,是制备新型生物刺激剂的理想来源。微藻用于环境治理的同时,可获得足量的微藻生物质来制备生物刺激剂,从而达到治理环境、降低成本及提质增效的目的。就微藻源生物刺激剂的定义及功能、微藻全细胞和天然活性物质生物刺激剂的制备、应用效果及对植物和土壤的作用原理进行综述,以期为微藻源强效生物刺激剂的规模化制备及农业生产应用奠定理论基础和提供生产实践指导。 张靖洁 刘珅坤 唐涛 葛保胜 李润植 崔红利关键词:农业面源污染 微藻 设施农业 褐藻多糖的体外抗氧化活性及其延长秀丽隐杆线虫的寿命 被引量:10 2022年 该研究探讨了褐藻多糖(FSP)的体外抗氧化作用。以秀丽隐杆线虫为模式动物,采用氧化剂H2O2建立急性氧化应激模型,测定FSP对线虫寿命、运动能力、年龄色素及氧化应激指标的影响。研究表明,FSP对羟基自由基有一定的清除能力,且作用效果呈剂量依赖性;FSP(50、100、200μg/mL)呈剂量依赖性的延长秀丽隐杆线虫寿命,分别为7.24%、26.70%和48.42%;FSP显著提高了线虫运动能力,其中200μg/mL处理组运动能力达73.50%,而且减少体内脂褐素的积累及细胞凋亡程度;在0.1%H2O2氧化应激下,200μg/mL的FSP通过提升抗氧化酶SOD、CAT活性来增强抗氧化能力;qRT-PCR结果显示,FSP通过调控Insulin/IGF-1信号通路上相关基因的表达影响线虫寿命。综上,FSP可通过延长秀丽隐杆线虫的寿命,提升其运动能力,提升线虫抗氧化酶活性,调控关键基因的表达,抑制氧化应激水平,对线虫氧化损伤发挥保护作用。 王猛 关思宇 于杰 薛金爱 狄建兵 王愈 姜进举 崔红利 李润植关键词:抗氧化 秀丽隐杆线虫 BCAAs对干旱和盐胁迫下亚麻荠种子萌发的影响 2022年 旨在为逆境条件下亚麻荠的种植和栽培提供理论依据和技术支持,明确干旱和盐胁迫下支链氨基酸(BCAAs)对亚麻荠种子萌发的影响,研究以亚麻荠SC-N16为材料,采用聚乙二醇6000(PEG)和氯化钠(NaCl)建立亚麻荠种子的干旱胁迫和盐胁迫模型,通过亮氨酸(Leu)、异亮氨酸(Ile)和缬氨酸(Val)溶液对亚麻荠种子进行浸种处理,统计分析BCAAs对亚麻荠种子萌发率、发芽势、发芽指数、根长、芽长、鲜质量、干质量等萌发指标的影响。结果表明,干旱胁迫模型为0.20 g/mL PEG和盐胁迫模型为150 mmol/L NaCl条件下,3种BCAAs都能改善亚麻荠种子的发芽能力;其中,100μmol/L Val浸种后的缓解效果最好,其发芽势和萌发率较干旱胁迫模型分别提高了164.78%和34.76%,比盐胁迫模型分别提高了36.98%和29.77%。进一步扩大Val的浓度为0~250μmol/L,随着Val浓度的增大,干旱和盐胁迫下Val对亚麻荠种子萌发的缓解作用均呈先上升后下降的趋势,100μmol/L Val为最佳处理;100μmol/L Val处理后根长、芽长、干质量和鲜质量较PEG干旱胁迫分别提高了19.61%、30.77%、28.66%和9.53%,较NaCl盐胁迫增幅分别为21.05%、38.63%、27.14%和7.83%。综上可见,干旱和盐胁迫下外源BCAAs为Val且浓度为100μmol/L时对亚麻荠种子萌发的缓解效果最好。 冯悦 李润植 崔红利 薛金爱 张春辉关键词:亚麻荠 种子萌发 支链氨基酸 干旱胁迫 盐胁迫 雨生红球藻磷脂-二酰甘油酰基转移酶基因的鉴定与表达分析 被引量:1 2022年 单细胞光自养雨生红球藻富集虾青素(AST)和三酰甘油(TAG)的合成调控机制目前还未得到解析。以雨生红球藻-797株系为试验材料,克隆编码磷脂-二酰甘油酰基转移酶(HpPDAT)的基因、鉴定酶蛋白理化特征和分析不同光质下的表达谱。结果显示,基于雨生红球藻转录组数据,鉴定获得一条编码HpPDAT的cDNA序列,全长3138 bp,编码978个氨基酸,蛋白的分子式为C_(4437)H_(6997)O_(1396)N_(1289)S_(38),分子质量为101.95 ku,理论等电点为6.15。多序列比对结果显示,HpPDAT具有LCAT家族典型保守域。系统发育分析显示,HpPDAT与微藻中的PDATs亲缘关系较近,而与高等植物的PDATs亲缘关系较远。不同光质(白光、高白光、高蓝光、紫外和白光+紫外)条件下HpPDAT基因的表达谱分析揭示,与黑暗条件下的藻细胞相比,所测光质条件下藻细胞HpPDAT基因的表达均上调,特别是高蓝光(10000 lx)显著促进了HpPDAT基因的表达,表达量达到黑暗条件下的9.6倍;不同光质条件下的细胞脂质合成发现,光照处理的总脂积累量要明显高于黑暗处理。HpPDAT的表达量与总脂的积累量呈现出一致性,在高蓝光处理下获得了最高的总脂积累量(27%),是黑暗处理的1.9倍。 赵春超 张宏江 臧敦秀 崔红利 李润植关键词:基因鉴定 光诱导 雨生红球藻 雨生红球藻蓝光受体向光素(PHOT)互作蛋白鉴定及烟草异源表达的生理效应 被引量:1 2023年 向光素(PHOT)是植物和绿藻特有的蓝光受体,鉴定PHOT的互作蛋白及探究其功能为阐明PHOT介导的信号途径与生理功能奠定基础。本研究采用酵母双杂交技术从雨生红球藻cDNA文库中筛选HaePHOT的候选互作蛋白,共获得23个阳性克隆,其中4个克隆注释为DnaJ。利用RNA-Seq数据,对雨生红球藻中HaePHOT与DnaJ的表达模式进行相关性分析,发现二者呈很强的正相关;进一步分析HaePHOT或DnaJ与虾青素合成及积累的关键基因(PSY、PDS、LYCB、BKT、BCH、CYP97B、KAS、FAD)表达量的相关性,发现HaePHOT及DnaJ分别与LYCB、BKT、BCH、CYP97B呈正相关,而与PSY、PDS、KAS、FAD呈负相关。瞬时转化烟草结果显示,在正常光(白光)下,野生烟草和过表达HaePHOT的烟草植株叶绿素a、叶绿素b和类胡萝卜素差异不显著;但蓝光下差异显著,且转基因烟草色素含量较高。qRT-PCR结果显示叶绿素a加氧酶(CAO)、原叶绿素酸酯氧化还原酶(POR)、八氢番茄红素合酶(PSY)、八氢番茄红素脱氢酶(PDS)和番茄红素β-环化酶(LYCB)编码基因在蓝光照射及转基因烟草中的表达显著提高,均与叶绿素和类胡萝卜素含量的变化趋势一致。这些发现为后续解析HaePHOT及其互作蛋白介导的调控机制提供了理论基础。 李旺宁 李亚男 梁梦静 张春辉 季春丽 李润植 崔玉琳 秦松 薛金爱 崔红利关键词:生理效应 亚麻荠FAD2-1和FAD3-1编码蛋白的生物信息学分析 被引量:4 2016年 △-12脂肪酸脱氢酶FAD2(fatty acid desaturase 2)和△-15脂肪酸脱氢酶FAD3(fatty acid desaturase 3)是控制亚油酸(18∶2;ω-6)和亚麻酸(18∶3;ω-3)合成的限速酶,亦在植物抵御低温等环境胁迫反应中起重要作用。本文利用生物信息学工具分析了亚麻荠(Camelina sativa)FAD2-1和FAD3-1编码蛋白的理化性质、二硫键、磷酸化位点、高级结构、保守域和功能系统进化等特征。结果表明,FAD2-1和FAD3-1编码蛋白理论pI相近(分别为8.39和8.42),然而前者不稳定系数(40.04)显著高于后者(29.46)。FAD2-1蛋白的磷酸化位点为23个,多于FAD3磷酸化位点(18个),预示FAD2-1更易受翻译后调控。这两种蛋白均含有3个保守的组氨酸富集区(Hisbox),且在C端含有内质网滞留信号,赋予其定位于内质网和催化双键形成的活性。FAD2-1的a-螺旋比例(45.31%)高于FAD3-1(33.16%),然而后者无规则卷曲比例(51.93%)大于前者(44.53%)。3D结构模拟显示,FAD2-1和FAD3-1功能域大小和构象存在差异,这可能影响到底物选择性和催化效率。这些结果为全面解析亚麻荠种子油脂合成和ω-3族脂肪酸富集的分子机理提供了科学参考。 刘宝玲 孙岩 高昌勇 苑丽霞 薛金爱 李润植 张莉关键词:亚麻荠 生物信息学分析 雨生红球藻caleosin基因的克隆、序列分析及表达特性 被引量:1 2020年 雨生红球藻钙蛋白(caleosin)有稳定油体的功能,为了研究该蛋白的理化特征及功能,利用同源克隆和cDNA末端快速扩增技术(RACE)相结合的方法获得雨生红球藻caleosin基因的cDNA全长序列,并进行生物信息学分析和HaeClo基因的表达分析。分析表明,HaeClo全长为1088 bp,共编码262个氨基酸,理论等电点为7.73。BLAST同源比对表明HaeClo的氨基酸序列与盘藻(Gonium pectoral)和莱茵衣藻(Chlamydomonas reinhardtii)来源的caleosin的相似性分别达到66%和61%,是一个典型的caleosin家族成员。多序列比对及系统进化也表明HaeClo与其他高等植物和低等植物来源的caleosin有共同的祖先。不同胁迫条件下,HaeClo基因在培养第3天时表达量均达到最高值,此时高蓝光+1/4氮处理组表达量达峰值,高白光+1/4氮处理组表达量次之,且目的蛋白在大肠杆菌中成功表达。本文首次从雨生红球藻中克隆获得编码caleosin的基因序列,并进行了生物信息学分析,对高光和缺氮不同胁迫条件下的雨生红球藻进行了表达分析,进一步研究了HaeClo基因在雨生红球藻中的表达,为雨生红球藻中caleosin的表达和功能研究奠定了基础。 朱琴 张宏江 张春辉 崔红利 薛金爱 李润植关键词:雨生红球藻 钙蛋白 基因克隆 系统进化