上海交通大学医学院病理生理学系
- 作品数:25 被引量:31H指数:3
- 相关机构:首都医科大学基础医学院潍坊医学院基础医学院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金上海市自然科学基金上海市浦东新区卫生系统优秀青年医学人才培养计划更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学文化科学化学工程更多>>
- LPS下调肝细胞沉默信息调节因子2表达诱导急性肝损伤被引量:1
- 2021年
- 为探讨LPS所致急性肝脏炎症反应和肝损伤过程中沉默信息调节因子2(silent information regulator 2,SIRT2)的表达及作用,将C57BL/6J小鼠随机分成2组,分别腹腔注射LPS和生理盐水(normal saline,NS)。处理24 h后,研究发现相较于NS组,LPS组小鼠肝指数(liver index,LI)增加(P<0.05),血清丙氨酸转氨酶(alanine aminotransferase,ALT)和天冬氨酸转氨酶(aspartate aminotransferase,AST)水平显著升高(P<0.05)。同时,肝组织HE、F4/80和末端脱氧核苷酸转移酶介导的脱氧尿苷三磷酸缺口末端标记(terminal dexynucleotidyl transferase-mediated dUTP nick end labeling,TUNEL)染色结果显示,LPS组小鼠肝脏发生明显的炎症反应和肝细胞凋亡。而且,肝脏组织中SIRT2的mRNA和蛋白表达水平显著降低(P<0.01)。而与体内实验结果不同,体外给予AML12肝细胞LPS刺激后,肝细胞凋亡数及SIRT2 mRNA表达水平均无显著变化(P>0.05),但LPS刺激单核巨噬细胞RAW264.7后其上清液可显著抑制AML12细胞的SIRT2 mRNA表达(P<0.05)。同时,SIRT2敲减可导致LPS作用下AML12肝细胞增殖抑制和凋亡促进(P<0.05)。以上结果提示,LPS通过作用于巨噬细胞下调肝细胞中SIRT2的表达,进而抑制肝细胞增殖,促进其凋亡。
- 贺明张颖婷魏倩阮昕安晓飞孙英刚
- 关键词:脂多糖巨噬细胞肝细胞相互作用
- p53、TGF-β1及炎性细胞因子在新型酒精性肾损伤小鼠模型中的表达被引量:4
- 2019年
- 鉴于以往酒精性肾损伤模型的局限性,模拟人类常见饮酒模式,将20只小鼠随机分为对照组和酒精组,采用慢性酒精喂养加单次急性酒精灌胃的方法,建造新型酒精性肾损伤小鼠模型。通过苏木精-伊红染色法(hematoxylin-eosin staining, HE)、过碘酸-雪夫染色法(periodic acid-Schiff staining,PAS)染色观察肾脏组织病理学改变,实时荧光定量PCR检测转化生长因子β1(transforming growth factor beta 1,TGF-β1)、炎性细胞因子和p53的mRNA表达水平,Western blotting检测p53蛋白的表达。结果显示,与对照组比较,酒精组小鼠肾质量、肾脏指数明显升高(P<0.01);HE染色显示肾小球系膜细胞轻度增生,肾小管上皮细胞肿胀、间距增宽,间质内小血管增生、扩张、水肿,周围伴有炎性细胞浸润;PAS染色显示肾小球系膜细胞和系膜基质轻度增生;TGF-β1、炎性细胞因子(IL-1β、IL-6、TNF-α)及p53的mRNA表达增加(P<0.05);p53蛋白表达下调(P<0.01)。提示新型酒精性肾损伤小鼠模型构建成功,p53、TGF-β1及炎性细胞因子参与了新型酒精性肾损伤,这为今后的研究提供了可靠的模型和线索。
- 彭月霜韩可琪阮昕张颖婷魏倩赵珩安晓飞贺明
- 关键词:动物模型P53转化生长因子Β1炎性细胞因子
- 青藤碱类衍生物联合二甲双胍诱导骨髓瘤细胞凋亡的实验研究被引量:2
- 2021年
- 目的探究青藤碱类衍生物YL064联合二甲双胍对多发性骨髓瘤(multiple myeloma,MM)细胞凋亡的生物学效应。方法以不同浓度的YL064和二甲双胍单独或联合处理MM细胞系的RPMI8226和H929细胞,采用细胞计数试剂盒-8检测细胞增殖抑制率,应用药物联合指数(combination index,CI)分析两药是否存在协同效应,同时应用流式细胞仪检测细胞凋亡率,进一步利用蛋白质印迹法检测细胞凋亡相关蛋白聚ADP核糖聚合酶(poly ADP-ribose polymerase,PARP)和caspase-3表达的变化。结果RPMI8226和H929细胞经二甲双胍和YL064单独或联合处理24 h后,联合用药组细胞增殖抑制率均显著高于单独用药组,联合用药组RPMI8226和H929细胞的CI均小于1。联合用药组RPMI8226和H929细胞凋亡率亦显著高于单独用药组,差异有统计学意义(P<0.05)。进一步研究显示,联合用药组RPMI8226和H929细胞内PARP和caspase-3均发生明显剪切活化。结论青藤碱类衍生物YL064联合二甲双胍能够协同诱导MM细胞增殖阻滞并进一步诱导其凋亡。
- 谭雅月唐勇姚一芸王莹莹吴英理朱琦
- 关键词:二甲双胍多发性骨髓瘤细胞凋亡
- 新型口腔细菌丝氨酸蛋白酶抑制剂Tannerpin的制备与结晶
- 2021年
- 目的·采用生物化学和结构生物学的方法,制备和结晶高纯度的新型口腔细菌丝氨酸蛋白酶抑制剂Tannerpin。方法·通过氨基酸序列分析,在牙周疾病相关细菌中筛选得到新型丝氨酸蛋白酶抑制剂,并将其命名为Tannerpin;构建融合表达载体pSUMO3-Tannerpin,将其转入大肠埃希菌BL21(DE3)系统进行诱导表达;采用镍离子亲和层析、SUMO特异性蛋白酶2(SUMO-specific protease 2,SENP2)酶切和凝胶过滤层析组合的纯化方案对Tannerpin进行分离纯化,并经十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)进行验证;而后,对该纯化蛋白的结晶条件进行筛选及优化,并对其作用底物进行筛选。结果·SDS-PAGE结果显示,SUMO3-Tannerpin融合蛋白在大肠埃希菌中成功表达。利用纯化方案去除该蛋白的融合标签后,获得了相对分子质量约为43000的Tannerpin。通过结晶条件的初筛和优化,最终在20℃、pH=6.0、沉淀剂为28%聚乙二醇3350和8%Tacsimate的条件下获得了分辨率为1.7Å的Tannerpin晶体。然而,未筛选到Tannerpin的作用底物。结论·成功制备了口腔细菌分泌的新型丝氨酸蛋白酶抑制剂Tannerpin及其晶体,或将为后续其结构分析及功能研究奠定基础。
- 杨婷婷许佳伟周爱武叶玮
- 关键词:口腔细菌原核表达纯化
- 以髓系肉瘤合并皮肌炎为初发表现的急性早期前体T淋巴细胞白血病1例
- 2023年
- 急性早期前体T淋巴细胞白血病(early T-cell precursor acute lymphoblastic leukemia,ETP-ALL)属于早期非成熟的急性T淋巴细胞白血病(T-cell acute lymphoblastic leukemia,T-ALL),其肿瘤细胞即早期前体T细胞为早期从骨髓迁移至胸腺的胸腺细胞亚群,表达丰富的T系、干细胞和髓系相关的转录物,保留着多能分化潜能,是一种成熟阻滞、分化很差的干细胞白血病[1]。
- 王莹莹周世颖胡月梅罗浩翁巍
- 关键词:皮肌炎髓系肉瘤
- 翻转课堂在病理学与病理生理学总论整合课程中的应用与评价被引量:7
- 2021年
- 目的探讨和评价翻转课堂在病理学与病理生理学总论整合课程中的应用。方法选择2016级临床医学8年制的172名学生为观察组,采用传统课堂结合翻转课堂教学;2014级临床医学8年制的142名学生作为对照组,仅采用传统课堂教学。观察组采用翻转课堂教学,通过重新设计教学内容、课前提供相关知识点、小组讨论和课内展示等方法,注重培养学生学习的自主性、互动性和创新性。教学评价包括两组学生的问卷调查和期末考试成绩。采用SPSS 21.0软件进行t检验。结果观察组学生对翻转课堂满意度较高,认为其有助于提高学生的自主学习能力、口头表达能力及创新思维能力;但两组学生期末考试成绩差异没有统计学意义(P=0.306)。结论采用翻转课堂教学能够提高学生的学习兴趣,激发其自主学习和创新性,但单纯以期末理论考试来评价学生的教学效果尚不能体现翻转课堂的优越性,有待更多的评价指标考核其效果。
- 蔡军张亮赵倩
- 关键词:整合课程病理学与病理生理学教学改革
- 青藤碱衍生物调变多发性骨髓瘤细胞趋化因子受体的实验研究
- 2023年
- 背景与目的:多发性骨髓瘤(multiple myeloma,MM)细胞表面CXC族趋化因子受体(CXC motif chemokine receptor,CXCR)与骨髓微环境内趋化因子相互作用参与MM细胞生存、增殖和髓外侵袭。青藤碱衍生物YL064通过靶向MM细胞内信号转导通路分子发挥其生物学效应。本研究探究青藤碱衍生物YL064对MM细胞表面CXCR3的调变作用及其生物学效应。方法:以MM细胞系H929和MM1.S细胞为模型,利用慢病毒载体构建过表达CXCR3的H929-OE和MM1.S-OE细胞,采用克隆形成和体外迁移实验检测并比较H929、H929-OE、MM1.S和MM1.S-OE细胞克隆形成和迁移率;采用流式细胞术检测YL064处理后H929、H929-OE、MM1.S和MM1.S-OE细胞凋亡率;进一步以不同浓度YL064处理H929和MM1.S细胞,采用实时荧光定量聚合酶链反应(real-time fluorescence quantitative polymerase chain reaction,RTFQ-PCR)和蛋白质印迹法(Westernblot)检测细胞内CXCR3基因转录和蛋白水平及其下游信号转导通路关键分子细胞外调节蛋白激酶(extracellular regulated protein kinase,ERK)和p-蛋白激酶B(p-protein kinase B,p-AKT)蛋白水平的改变。结果:CXCR3过表达H929-OE和MM1.S-OE细胞克隆形成率分别为81.33%±5.79%和73.00%±4.90%,显著高于H929的58.33%±3.30%和MM1.S细胞的41.00%±3.14%;H929-OE和MM1.S-OE细胞迁移率分别为7.90%±0.81%和23.00%±1.63%,显著高于H929的4.63%±0.37%和MM1.S细胞的14.63%±1.04%;经YL064处理后,H929-OE和MM1.S-OE细胞凋亡率分别为29.80%±0.30%和14.2%±0.26%,显著低于H929的33.40%±0.25%和MM1.S细胞的21.60%±0.21%;上述结果比较差异有统计学意义(P均<0.05)。进一步研究发现YL064能够降低H929和MM1.S细胞克隆形成率和迁移率,同时抑制细胞内CXCR3基因转录并下调CXCR3、ERK和AKT蛋白表达。结论:CXCR3可以促进MM细胞增殖和迁移,青藤碱衍生物YL064能够下调MM细胞内CXCR3表达并抑制其下游信号转导通路进而干扰其增殖和迁移并诱导凋亡。
- 居身傲男王莹莹唐勇姚一芸吴英理朱琦
- 关键词:多发性骨髓瘤CXCR3细胞凋亡
- TRMT61A在肝癌细胞中的功能及其机制研究
- 2022年
- 目的·探究N1-甲基腺苷(N1-methyladenosine,m1A)甲基转移酶催化亚基(tRNA methyltransferase 61 Homolog A,TRMT61A)对肝癌细胞功能的影响及其潜在机制。方法·通过生物信息学软件分析TCGA数据库中TRMT61A在肝细胞肝癌患者样本中的表达情况并绘制相关生存曲线。通过CRISPR-Cas9技术构建稳定敲低TRMT61A表达的肝癌细胞系Huh7细胞和HepG2细胞,通过蛋白质印记法(Western blotting)检测对照组和敲低组细胞TRMT61A蛋白水平;通过斑点印迹实验检测2组细胞总RNA的m1A修饰水平。利用CCK-8法和平板克隆形成实验检测2组细胞增殖能力。使用碘化丙啶(propidium iodide,PI)染色和流式细胞术检测细胞周期;通过Western blotting检测细胞周期相关蛋白表达水平。使用Annexin V/PI细胞凋亡检测试剂盒检测细胞凋亡情况;通过Western blotting检测细胞凋亡相关蛋白表达水平。结果·经生物信息学软件分析,TCGA数据库中TRMT61A在肝癌患者癌组织中高表达,通过绘制生存曲线发现TRMT61A与肝癌患者的预后呈负相关。在肝癌细胞系Huh7和HepG2中稳定敲低TRMT61A后,细胞中TRMT61A蛋白水平下降,总RNA的m1A修饰水平下降。CCK-8实验结果显示在Huh7和HepG2细胞中稳定敲低TRMT61A后细胞增殖明显受到抑制;平板克隆实验结果显示在Huh7和HepG2细胞中稳定敲低TRMT61A后,克隆形成数目显著降低。TRMT61A敲低的Huh7和HepG2细胞出现G0/G1期细胞周期阻滞,细胞中P21蛋白水平显著上升,cyclin D1蛋白水平下降。此外,细胞凋亡检测结果显示敲低TRMT61A后Huh7和HepG2细胞凋亡率上升,而细胞剪切活化caspase3蛋白水平也明显上升。结论·敲低TRMT61A可抑制肝癌细胞增殖,并诱导其发生凋亡。
- 胡哲轩张欣沃璐璐李静池王娇周佽想赵倩
- 关键词:肝细胞肝癌细胞增殖细胞凋亡
- 受体酪氨酸激酶抑制剂在急性髓系白血病中的临床应用概况被引量:1
- 2020年
- 受体酪氨酸激酶(receptor tyrosine kinases,RTKs)控制着细胞的基本活动,包括增殖、周期控制、凋亡、代谢等。相应地,RTKs基因突变导致的异常激活在肿瘤的发生、发展中起重要作用。近年来,针对RTKs研发的受体酪氨酸激酶抑制剂(receptor tyrosine kinase inhibitors,rTKI)研究进展迅速并已在多种类型肿瘤的临床治疗中取得了良好的效果,如慢性粒细胞白血病、非小细胞肺癌和乳腺癌等。急性髓系白血病(acute myeloid leukemia,AML)中,Fms样酪氨酸激酶3(Fms-like tyrosine kinase 3,FLT3)抑制剂的临床应用显著改善了FLT3突变患者的预后,对AML的治疗具有重要意义。文章主要介绍rTKI在AML治疗中的临床应用现状,为AML治疗提供参考。
- 董新怡范秋月邱树涵周嘉瑶卢莹
- 关键词:急性髓系白血病受体酪氨酸激酶受体酪氨酸激酶抑制剂
- 对乳头状甲状腺癌临床分子靶标的筛选被引量:3
- 2019年
- 目的:通过对比分析乳头状甲状腺癌(papillary thyroid cancer,PTC)和癌旁组织中NF-κB信号通路相关基因的差异表达,以及52个实体瘤相关基因的突变情况,鉴定与PTC临床诊断治疗相关的肿瘤特异性分子靶点。方法:分别提取20例PTC石蜡样本的癌与癌旁组织的RNA及DNA,运用定量反转录聚合酶链式反应(quantitative reverse transcription PCR,qRT-PCR)分析NF-κB信号通路目的基因CD44、BCL2、CCND2、c-FLIP、IκBα、A20及ABINs的RNA水平表达,并用免疫组化方法进行蛋白水平表达验证。同时利用靶向二代测序(next generation sequencing,NGS)对其中5例随访复发病例的肿瘤相关基因的突变情况进行全面分析筛选。结果:PTC癌组织中CD44和CCND2基因在RNA和蛋白水平的表达均显著高于癌旁组织。在有淋巴结转移和无淋巴结转移的PTC间,各NF-κB目的基因的表达量差异均无统计学意义。在基因水平,ALK、BRAF、FGFR3/4、KIT、MYC及MAPK信号通路的HRAS、KRAS、NRAS及RET是PTC中的高频突变基因。有2例病例分别含35个和40个突变基因,存在很大肿瘤负荷,结合临床数据发现均为术后复发患者。常见的BRAF V600E突变并非都是体细胞突变(64%),也可为胚系突变(29%);用NGS和qPCR同时检测验证V600E时,2种方法检出结果的相符率达80%。结论:CD44和CCND2基因在乳头状甲状腺癌癌组织中高表达,BRAF、RAS、FGFRs、KIT和MYC等基因的肿瘤特异性突变可能作为临床上对PTC患者实施个体化治疗所需的分子靶点。NGS和qPCR技术对BRAF V600E检测具有很高平行性,联合应用可提高检出率。
- 杨迟晖张晶孟磊俊宫丽平常庆张泓曾乃燕
- 关键词:乳头状甲状腺癌荧光定量PCRBRAF