于亮
- 作品数：13 被引量：16H指数：2
- 供职机构：山东大学附属省立医院更多>>
- 发文基金：山东省科技发展计划项目山东省优秀中青年科学家科研奖励基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 上皮细胞黏附因子对下咽癌FaDu细胞转移影响的研究被引量：1
- 2013年
- 目的 研究小干扰RNA（siRNA）干扰上皮细胞黏附因子（epithelial cell adhesion molecule,EpCAM）表达对下咽癌FaDu细胞体外侵袭、迁移、克隆形成能力的影响,并分析其可能机制.方法 利用siRNA技术干扰FaDu细胞中EpCAM基因的表达;采用Transwell侵袭、迁移实验和平板克隆实验,分别检测干扰EpCAM表达对FaDu细胞侵袭、迁移及克隆形成能力的影响;借助Western blot检测干扰EpCAM表达对E-cadherin和β-catenin在细胞质及细胞骨架上表达的影响.结果 FaDu细胞转染EpCAM siRNA后,EpCAM在mRNA和蛋白水平表达较阴性对照组均显著下调（t =6.46,P＜0.05;t=10.25,P＜0.05）.侵袭实验显示：EpCAM siRNA组每个视野下平均细胞数目为（26.33 ±3.71）个,较FaDu组（61.47 ±6.70）个及阴性对照组（54.13 ±6.51）个下降明显,差异有统计学意义（t =7.95,t =6.42,P＜0.05）.迁移实验显示：EpCAM siRNA组每个视野下平均细胞数目为（79.87 ±8.44）个,低于FaDu组（167.53 ±11.49）个和阴性对照组（162.13±13.45）个,与阴性对照组相比差异有统计学意义（t =10.90,t=8.97,P＜0.05）.平板克隆实验中,EpCAM siRNA组平均克隆形成数目为（78.00 ±5.57）个,低于FaDu组（177.30±16.50）个和阴性对照组（173.67±13.50）个,差异具有统计学意义（=9.78,=11.35,P＜0.05）.Westem blot显示,EpCAM siRNA组E-cadherin和β-catenin在细胞骨架上表达水平显著升高,与阴性对照组相比差异均具有统计学意义（=4.58,P＜0.05;t =3.76,P＜0.05）;而在细胞质中表达则显著降低,与阴性对照组相比差异有统计学意义（t =6.60,P＜0.05;t=8.20,P＜0.05）;在总蛋白水平,E-cadherin和β-catenin表达无明显变化.结论 干扰FaDu细胞中EpCAM基因的表达,抑制细胞的侵袭、迁移和克隆形成能力,其机制可能与调节E-cadherin和β-catenin在细胞骨架和细胞质中的表达有关,EpCAM基因有可能成为下咽癌基因治疗的新靶点.
- 牟亚魁于亮逯素梅洒娜王海波徐伟
- 关键词：下咽肿瘤细胞黏附分子
- Twist基因高表达诱导Hep-2细胞上皮间质转化并促进其侵袭能力的实验被引量：1
- 2010年
- 目的探讨编码位于常染色体上的碱性螺旋-环-螺旋转录因子(Twist),在Hep-2细胞中的高表达对上皮细胞标记物——上皮钙黏蛋白(E-cadherin)、间充质细胞标记物——神经钙黏蛋白(N-cadherin)及Hep-2细胞的侵袭能力的影响。方法以人喉癌细胞系Hep-2为实验材料,将构建好的pcDNA3.1-Twist质粒利用脂质体2000转染于Hep-2细胞,利用Western-blotting方法检测转染pcDNA3.1-Twist的细胞中Twist、E-cadherin和N-cadherin蛋白的表达情况;采用倒置相差显微镜观察转染pcDNA3.1-Twist后细胞的形态学变化;利用细胞侵袭实验,检测Twist的高表达对Hep-2细胞侵袭能力的影响。结果Western-blotting检测发现转染pcDNA3.1-Twist的实验组细胞中Twist和N-cadherin的表达均上升,E-cadherin的表达下降,与对照组比较差异具有统计学意义(P<0.05);倒置相差显微镜发现细胞形态由转染前的多角型、椭圆型变为运动能力更强的细长、梭型;检测高表达TWIST的Hep-2细胞的侵袭能力,发现转染TWIST实验组的穿过膜的细胞数为85.33±6.66,明显高于pcDNA3.1组及对照组穿过膜的细胞数为29.33±10.70和32.00±3.61,差异具有统计学意义(F=52.32,P<0.05)。结论Twist能诱导Hep-2细胞上皮间充质转化现象的产生,提高Hep-2细胞的侵袭能力,可能通过调控E-cadherin和N-cadherin发挥作用。
- 于亮李会政徐伟刘闻闻逯素梅田家军李建峰王海波
- 关键词：TWIST转录因子喉肿瘤
- TWIST在紫杉醇诱导喉癌Hep-2细胞系凋亡中的作用研究被引量：2
- 2009年
- 目的初步探讨转录因子TWIST在喉癌Hep-2细胞中的表达及其与紫杉醇诱导Hep-2细胞凋亡的关系。方法以人喉癌Hep-2细胞系为实验材料，以1×10^-9、5×10^-9、10×10^-9、25×10^-9mol／L浓度的紫杉醇作用于Hep-2细胞，采用倒置相差显微镜和吖啶橙细胞化学染色观察其形态变化，四甲基偶氮唑蓝（MTF）比色法观察不同浓度紫杉醇对Hep-2细胞的相对存活率的影响，流式细胞术检测Hep-2细胞的凋亡率，RT—PCR和Westernblot检测紫杉醇作用后的Hep-2细胞中TWISTmRNA和蛋白水平的表达情况。结果倒置相差显微镜下和吖啶橙细胞化学染色可见细胞凋亡的形态学改变，显示加药组细胞染色体固缩，聚集成块状、新月状，出现凋亡小体。MTF显示紫杉醇对Hep-2细胞的生长抑制作用呈时间和剂量依赖性。流式细胞术检测10×10^-9mol／L紫杉醇作用24h、48h及72h细胞的凋亡率分别为（22．6±5．3）％、（38．7±7．9）％、（52．4±14．3）％，显著高于对照组（9．8±5．8）％，差异有统计学意义（F=12．621，P〈0．05）。RT—PCR和Westernblot分析10×10^-9mol／L紫杉醇作用24h、48h及72h的细胞中TwIsTmRNA和蛋白的表达均呈降低趋势，TWISTmRNA分别降低了16．7％、46．8％、76．9％，TwIsT蛋白分别降低了16．4％、33．6％、69．6％，差异有统计学意义（F值分别为10．407和18．013，P值均〈0．05）。结论TWIST在Hep-2细胞中的表达有可能参与了紫杉醇诱导的细胞凋亡。
- 于亮李会政逯素梅刘闻闻田家军李建峰王海波徐伟
- 关键词：细胞系肿瘤TWIST转录因子紫杉酚肿瘤
- 转录因子Twist与肿瘤
- 2010年
- 肿瘤的侵袭转移和耐药是影响肿瘤预后的重要因素，而转录因子Twist在肿瘤侵袭转移和耐药性方面发挥重要作用。本文就Twist在肿瘤的侵袭转移、耐药等方面的研究进展进行综述。
- 于亮徐伟
- 侵袭型真菌性鼻-鼻窦炎14例诊断和治疗临床分析被引量：8
- 2016年
- 目的 通过回顾性分析14例侵袭型真菌性鼻-鼻窦炎（invasive fungal rhinosinusitis,IFRS）患者的临床资料,探讨其临床发病特点、诊断标准及治疗原则.方法 对2008年1月到2015年10月期间,入院确诊为IFRS的14例患者的临床特征、诊断依据、治疗方案及预后情况等进行回顾性分析.14例患者中急性IFRS 5例;慢性IFRS 9例;曲霉菌9例,毛霉菌4例,鼻脑接合菌病1例;13例伴有糖尿病,1例血糖正常.全部患者给予内镜下病变彻底清除及静脉滴注抗真菌药物治疗.结果 9例慢性IFRS患者中1例为毛霉菌感染、7例为曲霉菌感染、1例鼻脑接合菌,均治愈,但视力下降、复视、失明、硬腭穿孔未能恢复.5例急性IFRS患者中3例为毛霉菌感染,其中2例死亡,1例治愈;2例为曲霉菌感染,1例治愈,1例好转出院后未继续治疗,3d后死亡.结论 IFRS患者多伴有糖尿病,积极手术清除病变组织并全身应用抗真菌足量足疗程治疗可使得患者获益.毛霉菌所致IFRS较为凶险.
- 时光刚时蕾张志玉万玉柱李冰于亮张二鹏鞠红霜何明强纪宏志
- 关键词：鼻窦炎侵袭型真菌
- 多药耐药基因ABCB1和ABCG2在下咽癌FaDu细胞多药耐药中的研究被引量：1
- 2012年
- 目的研究多药耐药基因ABCB1和ABCG2在下咽癌FaDu细胞株及其耐紫杉醇细胞株FaDu／T中的多药耐药特征及其机制，为进一步研究下咽癌细胞的多药耐药性及逆转提供理论支持。方法以人下咽癌细胞株FaDu为亲本细胞，采用浓度梯度递增法成功建立下咽癌细胞株FaDu的耐紫杉醇细胞株FaDu／T。四甲基偶氮唑蓝法分别检测FaDu和FaDu／T对顺铂、氟尿嘧啶、多柔比星和长春新碱的多药耐药性；多药耐药基因及蛋白表达变化情况分别通过RT—PCR，Western blot和激光共聚焦检测；c—Jun氨基末端激酶（c—Jun N—terminal kinase，JNK）信号转导通路相关蛋白的表达变化通过Western blot检测。结果耐药细胞株FaDu／T比FaDu细胞有更强的多药耐药性。FaDu细胞相比，FaDu／T细胞株中多药耐药蛋白ABCB1的表达增加（t=22．42，P〈0．05），但ABCG2表达下降（t=10．06，P〈0．05）。紫杉醇初始作用于FaDu细胞后JNK信号转导通路被激活，但是在FaDu／T细胞中JNK信号转导通路呈失活状态，丝裂原活化蛋白激酶信号转导通路的激活剂茴香霉素（Anisomycin）可以使FaDu／T细胞的JNK信号通路重新激活。耐药细胞株FaDu／T中加入茴香霉素时ABCB1表达下调（F=33．72，P〈0．05），ABCG2的表达升高（F=220．16，P〈0．05），但是在预先加入JNK特异性抑制剂SP600125的FaDu／T细胞株中加入茴香霉素时，ABCB1和ABCG2的表达无明显变化（P〉0．05），提示JNK信号通路在下咽癌的多药耐药过程中具有重要的调控作用。结论下咽癌FaDu细胞的多药耐药性以多药耐药蛋白ABCB1的高表达和ABCG2的低表达为主要特征，且两种耐药蛋白的表达变化与JNK信号转导通路密切相关。
- 马聚珂逯素梅于亮田家军李建峰王海波徐伟
- 关键词：下咽肿瘤肿瘤蛋白质类ATP结合匣式转运子
- 紫杉醇诱导喉咽癌耐药细胞株的生物学特性被引量：1
- 2011年
- 目的研究人喉咽癌细胞株FaDu与其耐药株FaDu/T在生物学特性方面的异同及内在联系。方法以喉咽癌FaDu细胞为亲本,通过紫杉醇(Taxol)递增法筛选出其耐药细胞株FaDu/T。MTT法检测其耐药性,流式细胞术检测其周期,吖啶橙和Hoechest 33342/PI染色法检测细胞凋亡情况;RT-PCR和Western blot检测多药耐药、凋亡相关基因。结果与FaDu细胞相比,FaDu/T细胞具有以下特点:①生长缓慢;②多药耐药性增强;③处于G0/G1期较多,而G2/M和S期较少,凋亡比例无明显差别;④耐药基因ABCB1表达增加;⑤抗凋亡蛋白Bcl-2表达增加,凋亡蛋白Bax、Caspase-3表达下降。结论 FaDu/T细胞中耐药及抗凋亡蛋白ABCB1、Bcl-2的高表达是肿瘤细胞化疗抵抗的关键原因,肿瘤细胞各生物学特性的内在联系有待进一步研究。
- 马聚珂徐伟王海波于亮田家军李建峰逯素梅
- 关键词：下咽肿瘤多药耐药相关蛋白质类流式细胞术
- 尼美舒利促进下咽癌细胞凋亡并抑制其转移的实验研究被引量：2
- 2010年
- 目的 研究尼美舒利[选择性环氧合酶-2（cyclooxygenase-2,Cox-2）抑制剂]对下咽癌细胞系FaDu凋亡和转移能力的影响.方法 应用梯度浓度的尼美舒利（0、10、50、100、500和1000 μmol/L）作用于FaDu细胞,四甲基偶氮唑蓝法（MTT）检测FaDu细胞的相对存活率.在有效药物浓度500μmol/L尼美舒利作用12 h后,吖啶橙染色检测细胞的形态变化.流式细胞术检测FaDu细胞的凋亡率.应用Transwell小室检测尼美舒利对FaDu细胞的侵袭和转移能力的影响.Western blot和反转录-聚合酶链反应（RT-PCR）检测Cox-2、基质金属蛋白酶-9（matrix metalloproteinase,MMP-9）和Caspase-3用药前后的表达变化.结果 MTT结果显示,尼美舒利可以显著降低FaDu细胞相对存活率,其效应具有时间和浓度依赖性（P值均〈0.05）.吖啶橙染色可见细胞凋亡的形态学改变,流式细胞术检测到尼美舒利作用6 h后,FaDu细胞的凋亡率为（32.4±6.1）%（（-x）±s）.尼美舒利使FaDu细胞的侵袭和转移能力下降.Western blot和RT-PCR检测Cox-2、MMP-9表达降低,而Caspase-3的表达升高.结论 选择性Cox-2抑制剂尼美舒利能够抑制FaDu细胞的生长、降低其侵袭和转移能力,促进细胞凋亡.
- 田家军于亮逯素梅李建峰王海波徐伟
- 关键词：磺胺类下咽肿瘤细胞凋亡肿瘤转移
- 降低TWIST的表达抑制喉癌Hep-2细胞的侵袭能力
- 目的探讨降低TWIST在Hep-2细胞中的表达,对E-cadherin、N-cadherin及Hep-2细胞的运动、侵袭能力的影响,为在喉癌的进展过程中,寻找并认识能够反映其具有恶性潜能的分子或分子事件,期望为患者的早期...
- 田家军徐伟于亮逯素梅
- 慢性鼻-鼻窦炎伴鼻息肉为突出表现的变应性肉芽肿性血管炎1例
- 目的 探讨以慢性鼻-鼻窦炎伴鼻息肉为突出表现的变应性肉芽肿性血管炎(Allergic Granulomatosis with Polyangiitis,AGPA)这一少见疾病的特点,提高对该疾病的认识。方法 病例报告分析...
- 于亮万玉柱纪宏志何明强时光刚
- 关键词：变应性肉芽肿性血管炎外科治疗
