于强
- 作品数：6 被引量：20H指数：2
- 供职机构：中国疾病预防控制中心传染病预防控制所更多>>
- 发文基金：国家重点基础研究发展计划艾滋病和病毒性肝炎等重大传染病防治专项山西省科技攻关计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 云南省西双版纳州鼠型斑疹伤寒暴发的调查(英文)被引量：2
- 2014年
- 目的阐明云南省西双版纳州鼠型斑疹伤寒的流行状况。方法收集云南省鼠型斑疹伤寒病例资料。于2011年6-9月在西双版纳地区采集鼠型斑疹伤寒临床诊断病例的急性期和恢复期血清,并在发病地区的居民区捕鼠,采集鼠血液和脾脏标本。用间接免疫荧光试验检测患者和鼠血清中的鼠型斑疹伤寒立克次体的IgM和IgG抗体,用实时荧光PCR试验检测急性期病人血块和鼠脾脏中的鼠型斑疹伤寒立克次体热休克蛋白基因(groELgene)。结果 2004-2011年,云南省共报告鼠型斑疹伤寒病例8 361例,所有州(市)均有病例报告,其中西双版纳州发病数和发病率最高(86.6/10万),占全省总病例数的73.1%(6 111/8 361)。发病数具有逐年上升之势,全年均有病例发生,6-10月为主要流行期。2011年云南省共报告鼠型斑疹伤寒1 369例,其中西双版纳州报告病例1 157例,发病率为102.10/10万,病例数占云南省病例数的84.51%。勐海县、勐腊县和景洪市分别占全州病例数的79.95%(n=925,278.74/10万)、18.06%(n=209,74.10/10万)和1.99%(n=23,4.42/10万),勐海县发病率显著高于勐腊县(2χ=346.3,P<0.001)和景洪市(2χ=1369,P<0.001)。对2011年的80例病人进行了实验室检测,在80例急性期病人血清标本中有63例为IgM抗体阳性;75例病人双份血清标本中有61例的恢复期血清滴度高于急性期4倍及以上;80例患者急性期血块中有8例为PCR阳性。依据实验室诊断标准,74例被确诊为鼠型斑疹伤寒,其中血清学诊断73例(包含7例同时为分子诊断),分子诊断1例,临床诊断和实验室检测符合率为92.50%(74/80)。黄胸鼠血清鼠型斑疹伤寒立克次体IgG抗体阳性率为14.0%(14/100),脾脏的PCR阳性率为9.0%(9/100)。结论西双版纳州存在较为严重的鼠型斑疹伤寒流行,其中勐海县流行最为严重。
- 张海林苏梅惠姚娜于强章域震杨卫红程雪琴冯云杨杜鹃宋淼白鹤鸣马龙聂志坚陈绍秋覃谊石山梅殷小栎张丽娟
- 关键词：鼠型斑疹伤寒间接免疫荧光试验流行病学特征
- 恙虫病东方体Karp株56-kDa外膜抗原基因片段的原核表达及免疫原性研究被引量：1
- 2012年
- 目的探讨恙虫病东方体56-kDa蛋白在大肠埃希菌中的表达及作为诊断性抗原的可行性。方法用PCR扩增恙虫病东方体Karp菌株编码56-kDa蛋白长约1 100bp的DNA,克隆至表达载体pET30a(+)。表达产物经SDS-PAGE、质谱分析及western blot鉴定分析。重组蛋白质纯化后作为包被抗原,用方阵实验确定最佳浓度包被,ELISA法检测其与立克次体目16种成员及10种致病菌阳性血清的反应性。用此重组蛋白质免疫小鼠后制备抗血清,分别用ELISA及间接免疫荧光法(IFA)检测抗血清的效价。结果重组质粒经PCR及测序分析证明,56-kDa外膜抗原的基因片段以正确的读码框连入到pET30a(+)质粒载体中,SDS-PAGE结果表明重组蛋白质在约46-kDa处有表达的目的条带,western blot分析显示该条带可与1∶1 600稀释的兔抗Karp血清反应,证实其具有免疫活性。质谱分析鉴定该蛋白质为恙虫病东方体56-kDa蛋白;方阵滴定确定选择抗原的最佳稀释度为1∶1 600,特异性分析结果表明,重组蛋白质除与查菲埃立克体、嗜吞噬细胞无形体及五日热巴尔通体存在弱交叉反应外,与其他细菌均无交叉反应。IFA及ELISA检测表明抗血清效价可达1∶1 600。结论构建的重组蛋白质可以作为恙虫病东方体快速诊断的抗原。
- 王园园陈强于强张丽娟
- 关键词：恙虫病东方体原核表达免疫原性
- 山东莱洲湾湿地长角血蜱无形体16SrRNA检测分析被引量：9
- 2012年
- 目的调查山东莱洲湾湿地优势硬蜱——长角血蜱(Haemaphysalis longicornis)人粒细胞无形体病原携带及分子流行病学特征。方法 2010年5月至10月,对莱洲市第一人民医院ICU及感染科收治的26名无形体确诊病例及6名可疑病例家居环境采集游离蜱114只,家畜山羊、牛及狗体表寄生硬蜱456只,分类鉴定后分组研磨提取DNA,巢氏PCR扩增无形体16SrRNA基因并测序及序列分析。结果 69组样本PCR扩增阳性率为43.5%。序列进化分析显示无形体病原主要分3个基因群,T1优势群占检出序列的60%,该群与我国安徽无形体院内感染患者及山东沂源地区发热患者检出序列归为一类。这一群在我国周边国家日本、韩国及德国野生动物及媒介蜱中均有检出。结论东北亚环西太平洋鸟类迁徒的重要"中转站"及越冬、栖息和繁殖地—莱洲湾湿地长角血蜱存在较高无形体病原体携带率,加强当地临床发热病人无形体鉴别诊断并采取必要防控措施具有重要临床及公共卫生意义。
- 于强刘庆辉鞠中斌胡永平刘光辉臧建辉王誓闻陈创夫张丽娟
- 关键词：无形体长角血蜱
- 山西省宁武县森林革蜱无形体分子流行病学调查被引量：2
- 2012年
- 人粒细胞无形体病是由嗜吞噬无形体引起的新发蜱传人兽共患病，在我国一些地区广泛存在。该病传播媒介主要为硬蜱。宁武县是山西省重点林业县，生态环境适宜蜱的生长和繁殖，农林作业及家畜养殖人员多数有蜱暴露史或叮咬史。为此，山西省疾病预防控制中心与中国疾病预防控制中心无形体研究室合作对该地区进行无形体病原体分子流行病学调查。
- 李国华于强张秋香潘磊张玉农姚娜田丽娜吴海霞张丽娟
- 关键词：人粒细胞无形体分子流行病学
- 普通TaqMan探针及raqMan MGB探针real-time PCR检测无形体msp-2基因方法的建立与比较被引量：4
- 2011年
- 目的建立敏感、特异、定量real-time PCR方法,用于无形体病早期诊断及立克次体病鉴别诊断。方法通过GenBank Blast比较分析,选择世界各地39株无形体,以msp-2特异基因保守区设计普通TaqMan探针及TaqManMGB探针并比较分析。结果普通TaqMan探针及TaqMan MGB探针2种方法均具有良好的特异性,除无形体外,遗传亲缘关系较近的其他立克次体目成员(17种)均扩增阴性。临床上其他8种常见致病菌呈阴性扩增。灵敏性评估结果发现普通TaqMan探针及TaqMan MGB探针最低检出浓度分别为102copies/μl及10copies/μl。两种探针方法均具有较好的重复性。结论本研究建立了敏感、特异的无形体早期诊断及立克次体鉴别诊断的荧光定量PCR技术,TaqMan MGB探针灵敏性高于普通TaqMan探针。
- 王誓闻张丽娟王园园禹惠兰梁长威陈强于强
- 关键词：无形体荧光定量PCRTAQMAN
- 3株嗜吞噬细胞无形体AnkA蛋白原核表达及免疫原性差异性研究被引量：2
- 2013年
- 目的研究分析3株嗜吞噬细胞无形体AnkA蛋白的免疫原性。方法利用原核表达PCR扩增了嗜吞噬细胞无形体Webster株,斯洛文尼亚1 567株,美国96HE58株ankA基因部分序列,构建pET-30a-AnkA表达载体,转化至大肠杆菌BL21中,以IPTG诱导高效表达融合蛋白,经飞行质谱鉴定氨基酸序列,免疫BALB/c小鼠制备多克隆抗体。Western blot分析3株菌AnkA重组蛋白与免疫小鼠血清抗体相互间的免疫反应以及交叉反应性。同时检测3株菌AnkA重组蛋白与我国无形体病人血清抗体反应性。结果表达的重组蛋白主要以可溶性形式存在,小鼠免疫获得高效价抗AnkA IgG抗体,3株菌重组蛋白免疫抗体间存在免疫交叉。3株菌重组蛋白与我国无形体病人血清抗体存在免疫反应。结论成功原核表达并纯化了3株嗜吞噬细胞无形体AnkA蛋白,重组蛋白与我国无形体病人阳性血清存在免疫反应。3株嗜吞噬细胞无形体AnkA重组蛋白与免疫小鼠多克隆抗体间存在交叉反应。
- 姚娜陈创夫于强张丽娟
- 关键词：原核表达免疫原性交叉反应性
