刘丹
- 作品数：5 被引量：2H指数：1
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- TSC2在胰岛素抵抗中的作用研究进展
- 2010年
- 刘丹冯乐平梁瑜祯
- 关键词：胰岛素抗药性
- 罗格列酮对高糖条件下NIT-1细胞FoxO1、TSC2表达及细胞功能的影响
- 目的探讨不同浓度葡萄糖及罗格列酮干预对胰岛β细胞株NIT-1的FoxO1、TSC2基因表达的影响及对细胞生长、分泌功能的影响。 方法将NIT-1细胞用RPMI-1640培养基进行培养,按培养液里葡萄糖浓度不同,分为五组:...
- 刘丹
- 关键词：FOXO1罗格列酮
- 文献传递
- 高浓度葡萄糖条件下罗格列酮对NIT-1细胞FOXO1、TSC2基因表达及细胞分泌功能的影响被引量：1
- 2010年
- 目的:研究罗格列酮在不同浓度葡萄糖条件下,对胰岛β细胞增殖凋亡与胰岛素分泌以及叉头转录因子-1(FOXO1)和结节性硬化症-2(TSC2)表达的影响。方法:将NIT-1细胞按每孔5×104个放置于24孔细胞培养板,培养48h后随机分为各处理组:5.6、7.8、11.1、16.7、22.2和27.6mmol.L-1葡萄糖组,继续培养24h后再分别施加1×10-5mol.L-1罗格列酮,分别于干预24和48h后取细胞培养上清液,采用放射免疫法检测胰岛素水平和免疫荧光法检测细胞增殖情况,RT-PCR半定量法检测FOXO1和TSC2mRNA表达水平。结果:①1×10-6～1×10-5mol.L-1罗格列酮可以分别在不同浓度葡萄糖培养条件下使胰岛NIT-1细胞增殖(P<0.05),且这种变化趋势随剂量的增加而增加(即1×10-5mol.L-1罗格列酮组>1×10-6mol.L-1罗格列酮组>1×10-7mol.L-1罗格列酮组)。1×10-5mol.L-1的罗格列酮干预后,可见细胞凋亡百分率增加趋势随着葡萄糖浓度不断升高;②在同一浓度罗格列酮作用下,当葡萄糖浓度为11.1mmol.L-1时,胰岛素分泌水平最高,高于其他各组(均P<0.05),随着葡萄糖浓度增加,胰岛素分泌量逐渐下降(11.1mmol.L-1葡萄糖组>16.7mmol.L-1葡萄糖组>22.5mmol.L-1葡萄糖组>27.6mmol.L-1葡萄糖组),而葡萄糖为5.6mmol.L-1时,胰岛素分泌量最低;③在1×10-5mol.L-1罗格列酮干预后,FOXO1和TSC-2mRNA的表达水平均较未干预组明显下降,且呈现出5.6mmol.L-1组<11.1mmol.L-1组<16.7mmol.L-1组<22.5mmol.L-1组<27.6mmol.L-1组的变化趋势,而且葡萄糖浓度>16.7mmol.L-1的各组均较前面小剂量葡萄糖组(≤11.1mmol.L-1各组)表达明显。结论:罗格列酮可以通过直接影响胰岛β细胞内FOXO1和TSC2表达促进胰岛β细胞的增殖及影响细胞胰岛素分泌功能,提示通过调控FOXO1和TSC2表达,可以直接影响胰岛β细胞的生物学功能,如分泌功能、细胞的增殖与凋亡以及改善胰岛素抵抗状况。
- 乔伟刘丹孙情梁瑜祯冯乐平
- 关键词：葡萄糖罗格列酮
- 一种高效经济的小鼠胰岛细胞分离纯化新技术被引量：1
- 2009年
- 目的:建立一种经济高效的小鼠胰岛细胞分离纯化方法,为进行NOD小鼠的胰岛移植提供实验条件。方法:将5-7周龄、体重20～25g的雄性昆明小鼠的胆总管结扎,并逆行Hank's液和胶原酶P灌注和分离消化,依次加入84%、67%、50%浓度的Histopaque介质后进行不连续密度梯度离心纯化胰岛细胞。双硫腙(dithizon,DTZ)和台盼兰染色分别鉴定胰岛细胞。用含5.6mmol/L葡萄糖DMEM培养液体外培养胰岛细胞,培养后的第3、5、7、9、11天取细胞上清检测胰岛素水平,并用16.7mmol/L的高浓度葡萄糖进行刺激,检测胰岛素水平确定胰岛细胞功能。结果:每个胰腺的胰岛细胞收获量在1200±124个,且纯度和活性均大于90%;体外培养9天内胰岛细胞基础胰岛素分泌水平无显著差异,至第11天时则明显减少(P<0.05);应用16.7mmol/L葡萄糖刺激后,第5、7、9、11天的胰岛素分泌水平较第3天的明显减少(P<0.05),然而在第7天、9天、11天时的胰岛素水平较第5天时显著降低。结论:胆总管逆行注射Hank's液和胶原酶P消化消化和不连续密度梯度Histopaque纯化的方法可以获得大量状态良好的胰岛,且胰岛细胞数量多,分泌状态良好。本分离方法是一种经济高效的胰岛细胞分离方法,同时离体后于5.6mmol/L葡萄糖DMEM培养第3天胰岛细胞胰岛素储备功能最佳,为移植研究的最佳状态。
- 梁瑜祯杨月莲罗静思刘丹冯乐平
- 关键词：胰岛素细胞培养
- HPV E6/E7 mRNA、HPV DNA、TCT、P16、Ki67对宫颈癌的筛查和诊断效能评估
- 目的：对比分析HPV E6/E7mRNA、HPV DNA、P16、TCT、Ki67单独及联合检测，选出诊断效能最高且卫生经济学最佳的筛查方法，旨在降低侵入性操作率及提高对高级别宫颈鳞状上皮内病变的诊断率，为临床诊疗提供依...
- 刘丹
- 关键词：宫颈癌疾病筛查
