单大铭
- 作品数：5 被引量：1H指数：1
- 供职机构：温州医学院附属第一医院更多>>
- 发文基金：浙江省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 真核表达载体pLNCX/anti-CD20scFv/IgGFc/CD80/CD28/ζ的构建及其在NIH 3T3细胞株中的表达被引量：1
- 2007年
- 目的:构建pLNCX/anti-CD20scFv/IgGFc/CD80/CD28/ζ的重组真核表达载体,并在NIH 3T3细胞株中表达。方法:采用DNA重组技术把pBULLET上的CD28-ζcDNA插入到已含anti-CD20scFv/IgGFc/CD80的真核表达载体pLNCX质粒上,转染NIH3T3细胞株,经G418筛选细胞,用RT-PCR、流式细胞术检测目的基因表达情况。结果:经菌落PCR、酶切及一次测序鉴定均证实pLNCX/anti-CD20scFv/IgGFc/CD80/CD28/ζ的成功构建;经RT-PCR法,能够从转染的NIH 3T3细胞中扩增出1条与目的基因大小一致的DNA片段,流式细胞术检测显示该目的基因能够在NIH 3T3细胞中表达目的蛋白。结论:重组表达载体pLNCX/anti-CD20scFv/IgGFc/CD80/CD28/ζ的构建,并在NIH3T3细胞株中的成功表达。
- 胡永仙俞康谭映霞吴建波沈志坚钱红兰梁彬单大铭
- 关键词：NIH3T3细胞
- 真核表达载体pLNCX／anti-CD20scFV/IgGFc／CD80／CD28/ζ的构建及其在NIH 3T3细胞株中的表达
- 目的:构建pLNCX／anti-CD20scFv／IgGFc／CD80／CD28／ζ的重组真核表达载体,并在NIH 3T3细胞株中表达。方法:采用DNA重组技术把pBULLET上的CD28-ζcDNA插入到已含anti-...
- 胡永仙俞康谭映霞吴建波沈志坚钱红兰梁彬单大铭
- 关键词：真核表达载体
- 文献传递
- 重组抗CD20scFv/IgFc/CD80/CD28/ζ基因T细胞对CD20阳性恶性肿瘤细胞的靶向治疗研究
- 俞康单大铭刘新华杨开颜吴建波谭映霞胡永仙钱红兰
- 该课题希望所构建的抗CD20-scFv-CD28/ζT细胞能够同时发挥细胞免疫和体液免疫的双重作用来产生免疫应答从而彻底清除肿瘤细胞，对于抗CD20-scFv-CD28/ζT细胞来说，希望表达于T细胞表面的抗CD20-s...
- 关键词：
- 重组anti－CD20 scFv／CD80／CD28/ζ非复制型逆转录病毒的构建及其在Jurkat细胞株中的表达
- 2008年
- 目的:构建表达anti-CD20 scFv/CD80/CD28/ζ重组非复制型逆转录病毒,转染Jurkat细胞株使其表达目的蛋白。方法:采用DNA重组技术把pBULLET上的CD28-ζcDNA插入到已含anti-CD20 scFv/CD80的真核逆转录病毒载体pLNCX质粒上,转染PA317细胞株,收获上清液获非复制型逆转录病毒,感染NI H3T3细胞株,用PCR、流式细胞术检测目的基因在NI H3T3细胞的表达情况,确定病毒滴度。挑取高滴度的包装细胞株收获病毒,感染Jurkat细胞,经G418筛选细胞,用RT-PCR检测目的基因表达情况。结果:经酶切及测序鉴定均证实pLNCX/anti-CD20 scFv/CD80/CD28/ζ的成功构建;用PCR能够从逆转录病毒感染的NI H3T3细胞中扩增出一条与目的基因大小一致的DNA片段;流式细胞术检测显示该目的基因能够在NI H3T3细胞中表达目的蛋白;经RT-PCR,能够从转染的Jurkat细胞株中扩增出1条与目的基因大小一致的DNA片段。结论:成功构建高滴度表达anti-CD20 scFv/CD80/CD28/ζ非复制型逆转录病毒,并能在Jurkat细胞中表达目的蛋白。
- 胡永仙俞康谭映霞沈志坚钱红兰梁彬单大铭
- 关键词：逆转录病毒3T3细胞JURKAT细胞
- 重组质粒PLNCX重组质粒pLNCN/anti-CD20scFv/IgGFc/CD80/CD28/ζ转染人类T淋巴细胞的实验研究
- 目的:克隆人类CD28和CD3ζ链分子的胞内区基因,将其与含anti-CD20scFv/IgGFc/CD80的pLNCX质粒相连构建真核表达载体,探讨表达anti-CD20 scFv/IgGFc/CD80/CD28/ζT...
- 胡永仙俞康单大铭杨开颜吴建波沈志坚谭映霞
- 文献传递
