- 应用聚合酶链反应标记高活性DNA探针被引量：1
- 1990年
- 聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)或称体外基因倍增技术,是一种在体外选择性地扩增特定DNA序列的新方法。它利用一对位于待扩增DNA序列两侧的取向相对的DNA引物,在DNA聚介酶的介导下,经过多次变性、退火和延伸过程的重复性循环,大量合成靶DNA序列。
- 吉昌华
- 关键词：聚合酶链反应DNA探针
- HIV疫苗研究的新突破——保护性免疫表位的确定
- 1991年
- HIV疫苗的研究曾遇到过巨大的障碍,但是,随着近两年不断取得前沿性进展,HIV疫苗的研究进入了一个新的阶段。首先,在动物模型中候选疫苗的效果得到证实使人们受到了极大的鼓舞。最近,对病毒变异性尤其是诱导T和B细胞记忆的关键靶位的研究所取得的进展又给HIV疫苗的设计带来了新的曙光。在HIV疫苗设计过程中。
- 吉昌华
- 关键词：HIV疫苗
- 用PCR突变技术克隆艾滋病病毒蛋白酶基因被引量：1
- 1993年
- 作者设计并合成了一对用于PCR技术的突变引物HIV-1 Pr1和HIV-1Pr2,分别在两引物中设计了两个突变点,使突变后基因含有EcoRI、HindⅢ和TAA序列,便于HIV-1 Pr基因的定向克隆和表达。用HIV-1 Pr1和HIV-1 Pr2作引物,采用PCR方法从HIV-1基因组DNA中扩增出了一个360bp长的DNA片段,用EcoRI和HindⅢ双酶切法将此片段定向克隆入pUC19质粒,将克隆基因插入M13mp18进行DNA序列分析。结果表明,该基因序列的读框完全正确,从而为HIV-1 Pr基因的表达及抑制剂的研究奠定了基础。
- 闰小君苏成芝吉昌华
- 关键词：艾滋病毒聚合酶链反应艾滋病
- 应用聚合酶链反应突变和克隆HIV-lgag基因片段被引量：2
- 1992年
- 作者设计并合成了一对突变引物PGO1和PGO2,分别在两引物中设计了两个突变点,使突变后基因含有EcoRI、BamHI和ATG及TAA序列,以便于HlV-1gag基因序列的定向克隆和表达。用PCO1和PGO2作引物,采用PCR方法从HIV-1基因组DNA中扩增出一个长504bp的DNA片段,用EcoRl和BamHI双酶切位点将此片段定向克隆入pUC19质粒。将克隆基因插入M13mp18进行DNA序列分析,结果表明,该基因序列及读框完全正确,且在其5′末端突变出EcoRI位点和ATG起始码,3′末端突变出TAA终业码和BamHI位点,从而为该基因的表达研究奠定了基础。
- 吉昌华苏成芝阎小君
- 关键词：聚合酶链反应克隆免疫缺陷病毒
- 保证多聚酶链反应技术成功的措施
- 1991年
- 多聚酶链反应(PCR)技术最突出的优点是灵敏度极高,但是,作为一种分子生物学新技术,这又是最大的缺点,极其微量的非样品靶序列的污染及实验设计稍欠周慎,就会导致整个实验的失败。本文对合理的实验设计和规范化的操作作一概述,力求避免上述不测。
- 闫小君吉昌华王成济
- 关键词：聚合酶链反应
- B细胞瘤免疫球蛋白基因研究进展
- 1991年
- Burkitt淋巴瘤伴有t(8;14),t(8;8)或t(8;22)易位,90%的滤泡淋巴瘤伴有t(14;18)易位。这些易位均涉及到免疫球蛋白重链或轻链基因位点和MYC或bc1-2和bc1-1基因的重组,重组MYCbc1-2或bc1-1基因的高水平表达是B细胞瘤发生的重要原因。
- 吉昌华苏成芝
- 关键词：淋巴瘤免疫球蛋白易位
- 抗人CD3单抗重、轻链可变区基因的体外扩增、克隆和序列分析被引量：2
- 1994年
- 根据免疫球蛋白重链和轻链可变区基因５’端序列和Ｊ区序列，化学合成适合于体外扩增抗体重、轻链可变区基因的二对引物。从体外培养的ＯＫＴ３杂交瘤细胞中提取总ＲＮＡ，反转录生成ｃＤＮＡ，以ｃＤＮＡ为模板，分别加入合成的重、轻链可变区引物进行ＰＣＲ，扩增出抗体重、轻链可变区基因片段。将扩增产物分别插入ｐＵＣ１９质粒，筛选出阳性克隆，用链终止法进行ＤＮＡ序列测定。所测重链可变区基因全长３５７ｂｐ，编码１１９个氨基酸，轻链可变区基因全长３２１ｂｐ，编码１０７个氨基酸。
- 杨安钢许辉吉昌华韩骅杨立宏金伯泉苏成芝
- 关键词：免疫球蛋白可变区基因
- 豚鼠iRNA对人AFP免疫抑制作用的对抗效应及其特征
- 1989年
- 豚鼠抗人AFP iRNA在体外能对抗人AFP对小鼠淋巴细胞MLR的抑制作用,其对抗效应随抑制程度的加深而增强。AFP特异性iRNA和抗体在小鼠体内均能对抗人AFP对PFC反应的抑制作用,但iRNA的对抗效应较抗体的对抗效应强,且与其注射时间呈负相关。iRNA的这两种对抗效应均对RNase敏感而耐受DNase和Pronase。
- 吉昌华王成济苏成芝
- 关键词：甲胎蛋白核糖核酸免疫抑制
- 兔肝、肠碱性磷酸酶的提纯和鉴定被引量：1
- 1993年
- 作者应用正丁醇抽提和DEAE-纤维素离子交换、NaCl线性梯度洗脱方法从家兔肝脏和小肠粘膜组织中提取出肝型碱性磷酸酶(L-ALP)和小肠型碱性磷酸酶(I-ALP).抑制试验表明,EDTA对I-ALP和L-ALP均有显著抑制作用,抑制率分别为46.7%和64.3％,二者相差不显著.L-苯丙氨酸对I-ALP有特异性抑制作用(P<0.01),而左旋咪唑对L-ALP有特异性抑制作用(P<0.05).热稳定性分析表明,L-ALP能耐受56℃20 min,I-ALP对热较敏感.经测定L-ALP和I-ALP的Km值分别为4.2×10^(-4)mol/L和1.3×10^(-3)mol/L.园盘聚丙烯酰胺凝胶电泳结果表明,L-ALP和I-ALP酶染色带谱差异显著,前者主要呈两条带,而后者可见四条带.
- 吉昌华张晓光沈利群苏成芝陈苏民
- 关键词：碱性磷酸酶同功酶
- 人类免疫缺陷病毒调控蛋白研究进展
- 1992年
- 人类免疫缺陷病毒(HIV)的复制和表达至少受6种调控蛋白调节,其中反式激活蛋白(TAT)、病毒蛋白表达的调控蛋白(REV)和负调控蛋白(NEF)是三种最重要的调控蛋白。TAT促进HIV的复制,REV促进mRNA的转录,NEF是一种负调控蛋白。三者相互作用共同控制HIV的复制或潜伏。
- 吉昌华苏成芝
- 关键词：免疫缺陷病毒调控蛋白
